54,545 matches
-
mai mare concentrație a substanței, dar fără alge și măsurând concentrațiile în soluție (sau, dacă nu este posibil din punct de vedere tehnic, în coloana de apă) la începutul și la sfârșitul perioadei de testare. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Reactivi 1.6.1.1. Soluțiile substanțelor de testare Soluțiile mamă de concentrația necesară sunt preparate prin dizolvarea substanței în apă deionizată sau în apă conform punctului 1.6.1.2. Concentrațiile alese sunt preparate prin adăugarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
soluție (sau, dacă nu este posibil din punct de vedere tehnic, în coloana de apă) la începutul și la sfârșitul perioadei de testare. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Reactivi 1.6.1.1. Soluțiile substanțelor de testare Soluțiile mamă de concentrația necesară sunt preparate prin dizolvarea substanței în apă deionizată sau în apă conform punctului 1.6.1.2. Concentrațiile alese sunt preparate prin adăugarea unor cantități alicote la preculturile de alge (vezi apendicele 1). Substanțele se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Pow ridicat, sau care formează dispersii stabile în loc de soluții apoase propriu-zise), se acceptă folosirea unei concentrații deasupra limitei de solubilitate a substanței, pentru a garanta concentrația maximă solubilă/stabilă. Totuși, este important ca această concentrație să nu perturbe sistemul de testare (de exemplu, o peliculă de substanță pe suprafața apei care să împiedice oxigenarea apei etc). Pentru a prepara soluțiile mamă ale substanțelor cu solubilitate scăzută în apă sau pentru a facilita dispersia acestor substanțe în mediul de test se pot
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
caz, valoarea pH-ului soluției mamă se ajustează la valoarea pH-ului apei de diluție, dacă nu există contraargumente specifice. Pentru ajustarea pH-ului sunt preferate HCl și NaOH. Această ajustare a pH-ului se face astfel încât concentrația substanței de testare din soluția mamă să nu se modifice în mod semnificativ. Dacă în urma acestei corecții de pH are loc o reacție chimică sau precipitarea fizică a substanței de testare, acest lucru trebuie consemnat. 1.6.1.2 Mediul de test Se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
NaOH. Această ajustare a pH-ului se face astfel încât concentrația substanței de testare din soluția mamă să nu se modifice în mod semnificativ. Dacă în urma acestei corecții de pH are loc o reacție chimică sau precipitarea fizică a substanței de testare, acest lucru trebuie consemnat. 1.6.1.2 Mediul de test Se poate utiliza apă distilată de bună calitate sau apă deionizată cu o conductibilitate mai mică de 5μS.cm-1. Aparatul pentru distilarea apei trebuie să nu conțină nici o componentă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
conform următorului tabel. Soluțiile mamă se sterilizează prin filtrare prin membrană sau termic și se depozitează la întuneric la 4oC. Soluția mamă numărul patru se sterilizează numai prin filtrare prin membrană. Nutrienți Concentrația soluției mamă Concentrația finală în soluția de testare Soluția mamă 1: macro-nutrienți NH4Cl 1,5 g/l 15 mg/l MgCl2∙6H2O 1,2 g/l 12 mg/l CaCl2∙2H2O 1,8 g/l 18 mg/l MgSO4∙7H2O 1,5 g/l 15 mg/l KH2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
l 50 mg/l pH-ul mediului după aerare este aproximativ 8. 1.6.2. Aparatură ― Echipament obișnuit de laborator, ― Vase de laborator cu un volum adecvat (de exemplu, vasele conice de 250 ml sunt adecvate când volumul soluției de testare este de 100 ml). Toate vasele de testare sunt identice în ceea ce privește materialul și dimensiunile. ― Aparatură pentru cultură: laboratorul sau camera în care se poate menține o temperatură în limita de 21 - 25șC, ±2șC și o iluminare continuă uniformă în gama
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
aerare este aproximativ 8. 1.6.2. Aparatură ― Echipament obișnuit de laborator, ― Vase de laborator cu un volum adecvat (de exemplu, vasele conice de 250 ml sunt adecvate când volumul soluției de testare este de 100 ml). Toate vasele de testare sunt identice în ceea ce privește materialul și dimensiunile. ― Aparatură pentru cultură: laboratorul sau camera în care se poate menține o temperatură în limita de 21 - 25șC, ±2șC și o iluminare continuă uniformă în gama spectrală 400-700 nm. Dacă algele din culturile martor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
sunt suficient de sensibile și dacă se demonstrează că sunt suficient de bine corelate cu densitatea celulară. 1.6.3. Organisme de experiență Se recomandă utilizarea de specii de alge verzi cu creștere rapidă, care prezintă avantaje pentru cultură și testare. Se preferă următoarele specii: - Selenastrum capricornutum, de exemplu, ATCC 22662 sau CCAP 278/4, - Scenedesmus subspicatus, de exemplu, 86.81 SAG. Notă: ATCC = Colecție de culturi tip American ( SUA) CCAP = Centrul de cultură al algelor și protozoarelor (UK) SAG = Colecție
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
valorii CEr50. Densitatea celulară inițială Se recomandă ca densitatea celulară inițială din culturile testate să fie de aproximativ 104 celule/ml pentru Selenastrum capricornutum și Scenedesmus subspicatus. Dacă se folosesc alte specii, biomasa trebuie să fie comparabilă. Concentrațiile substanței de testare Pentru testare se aleg cel puțin cinci concentrații în progresie geometrică cu o rație care nu depășește 2,2. La cele mai mici concentrații testate trebuie să nu se observe nici un efect asupra creșterii algelor. Cele mai ridicate concentrații testate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Densitatea celulară inițială Se recomandă ca densitatea celulară inițială din culturile testate să fie de aproximativ 104 celule/ml pentru Selenastrum capricornutum și Scenedesmus subspicatus. Dacă se folosesc alte specii, biomasa trebuie să fie comparabilă. Concentrațiile substanței de testare Pentru testare se aleg cel puțin cinci concentrații în progresie geometrică cu o rație care nu depășește 2,2. La cele mai mici concentrații testate trebuie să nu se observe nici un efect asupra creșterii algelor. Cele mai ridicate concentrații testate trebuie să
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
mici concentrații testate trebuie să nu se observe nici un efect asupra creșterii algelor. Cele mai ridicate concentrații testate trebuie să inhibeze creșterea cu cel puțin 50% față de martor și de preferință să oprească complet creșterea. Replici și martori Proiectul de testare include trei replici la fiecare concentrație testată. Se efectuează trei teste martor fără substanță și, dacă este relevant, se realizează și trei teste martor cu substanța auxiliară. Dacă se justifică, planul testului poate fi modificat astfel încât să se mărească numărul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
trei teste martor cu substanța auxiliară. Dacă se justifică, planul testului poate fi modificat astfel încât să se mărească numărul de concentrații și să se reducă numărul de replici pe concentrație. Desfășurarea testului Culturile care conțin concentrațiile dorite ale substanței de testare și cantitatea dorită de inocul sunt preparate adăugând cantități alicote din soluțiile mamă ale substanței la cantități adecvate de preculturi de alge (vezi apendicele 1). Se agită flacoanele de cultură și se introduc în aparatul de cultivare. Algele monocelulare sunt
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
menținute la o temperatură în intervalul 21 - 25șC ± 2șC. Densitatea celulară în fiecare flacon de test se determină la cel puțin 24, 48 și 72 de ore după începerea testului. Mediul de alge filtrat conținând concentrația adecvată de substanță de testare se folosește pentru a determina fundalul. Pentru măsurători de densitate celulară, altele decât metodele de numărare directă, se utilizează un mediu de alge filtrat cu concentrația adecvată de substanță. pH-ul se măsoară la începutul testului și la 72 de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
un mediu de alge filtrat cu concentrația adecvată de substanță. pH-ul se măsoară la începutul testului și la 72 de ore. pH-ul testelor martor nu variază în mod normal cu mai mult de 1,5 unități pe parcursul testului. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște că o substanță are tendința de evaporare, se pot folosi flacoane de testare închise, cu spațiul liber între capac și nivelul lichidului. S-au
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
pH-ul se măsoară la începutul testului și la 72 de ore. pH-ul testelor martor nu variază în mod normal cu mai mult de 1,5 unități pe parcursul testului. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște că o substanță are tendința de evaporare, se pot folosi flacoane de testare închise, cu spațiul liber între capac și nivelul lichidului. S-au propus variante ale acestei metode [vezi referința bibliografică (4)]. Trebuie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
mod normal cu mai mult de 1,5 unități pe parcursul testului. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște că o substanță are tendința de evaporare, se pot folosi flacoane de testare închise, cu spațiul liber între capac și nivelul lichidului. S-au propus variante ale acestei metode [vezi referința bibliografică (4)]. Trebuie făcute încercări pentru a determina cantitatea de substanță care rămâne în soluție și se recomandă o atenție deosebită la
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
creștere) trebuie folosite pentru testul de limită. Dacă într-un test de limită se întâlnește o descreștere minimă de 25% sau mai mult, atât a biomasei cât și a vitezei de creștere față de testul martor, trebuie să se efectueze o testare completă. 2. DATE ȘI EVALUARE Densitatea celulară măsurată în culturile tratate și culturile martor se înregistrează în tabel împreună cu concentrațiile substanței de testare și timpii de măsurare. Valoarea medie a densității celulare pentru fiecare concentrație a substanței de testare și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
atât a biomasei cât și a vitezei de creștere față de testul martor, trebuie să se efectueze o testare completă. 2. DATE ȘI EVALUARE Densitatea celulară măsurată în culturile tratate și culturile martor se înregistrează în tabel împreună cu concentrațiile substanței de testare și timpii de măsurare. Valoarea medie a densității celulare pentru fiecare concentrație a substanței de testare și pentru martori se tratează în funcție de timp (0 - 72 de ore) pentru a obține curbele de creștere. Pentru a determina relația concentrație/efect se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
o testare completă. 2. DATE ȘI EVALUARE Densitatea celulară măsurată în culturile tratate și culturile martor se înregistrează în tabel împreună cu concentrațiile substanței de testare și timpii de măsurare. Valoarea medie a densității celulare pentru fiecare concentrație a substanței de testare și pentru martori se tratează în funcție de timp (0 - 72 de ore) pentru a obține curbele de creștere. Pentru a determina relația concentrație/efect se folosesc următoarele două abordări. Unele substanțe pot stimula creșterea la concentrații scăzute. Se iau în considerare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
ml măsurat la tn, t1 = timpul primei măsurători după începerea testului tn = timpul a n-a măsurători după începerea testului n = numărul de măsurători efectuate după începerea testului Procentul de inhibiție a creșterii celulare la fiecare concentrație a substanței de testare (IA) se calculează conform formulei: unde: Ac= aria dintre curba de creștere a testului martor și linia orizontală N = N0 At= aria dintre curba de creștere la concentrația t și linia orizontală N = N0 Valorile IA sunt trasate pe hârtie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
t0= este timpul de la începutul testului Ca metodă alternativă, viteza medie specifică de creștere se calculează din panta dreptei de regresie a diagramei lnN versus timp. Procentul de inhibiție a vitezei specifice de creștere la fiecare concentrație a substanței de testare (Iμt) se calculează cu formula: unde: μc= viteza medie specifică de creștere pentru proba martor μt= viteza medie specifică de creștere pentru concentrația testată Scăderea procentuală a vitezei medii specifice de creștere la fiecare concentrație a substanței față de testul martor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
individuală a ariei dintre curba de creștere A (vezi punctul 1.2.1) sau a vitezei specifică de creștere μ (vezi punctul 2.2) pentru fiecare replică. 3. RAPORT Protocolul de test cuprinde, dacă este posibil, următoarele informații: - substanța de testare: date de identificare chimică a substanței, - organismele de experiență: origine, cultura de laborator, numărul sușei, metodă de cultivare, - condițiile experimentale: - data de începere și de încheiere a testului, durata, - temperatură, - compoziția mediului, - aparatul de cultivare, - pH-ul soluției la începutul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
identificare chimică a substanței, - organismele de experiență: origine, cultura de laborator, numărul sușei, metodă de cultivare, - condițiile experimentale: - data de începere și de încheiere a testului, durata, - temperatură, - compoziția mediului, - aparatul de cultivare, - pH-ul soluției la începutul și sfârșitul testării (cu o explicație, dacă se observă modificările pH-ului de mai mult de 1,5 unități) - substanța și metoda folosită pentru solubilizarea substanței de testare și concentrația în soluție, - intensitatea și calitatea luminii, - concentrațiile testate (determinate sau nominale). - Rezultate: - densitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
testului, durata, - temperatură, - compoziția mediului, - aparatul de cultivare, - pH-ul soluției la începutul și sfârșitul testării (cu o explicație, dacă se observă modificările pH-ului de mai mult de 1,5 unități) - substanța și metoda folosită pentru solubilizarea substanței de testare și concentrația în soluție, - intensitatea și calitatea luminii, - concentrațiile testate (determinate sau nominale). - Rezultate: - densitatea celulară pentru fiecare flacon la fiecare timp de măsurare și metoda de măsurare a densității celulare, - valorile medii ale densității celulare, - curbele de creștere, - prezentarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]