5,404 matches
-
supernatantul, se scurge complet și se resuspendă în PBS prin sonicare. Se stochează antigenul alicotat la -20°C. Titrare de antigen ELISA al bolii limbii albastre: Antigenul ELISA pentru boala limbii albastre este titrat prin ELISA indirectă. Diluții binare de antigen sunt titrate față de o diluție constantă (1/100) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează o diluție de 1:20 în PBS de antigen al bolii limbii albastre în raport cu o diluție serica binara (50 μl/godeu) pe
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
ELISA pentru boala limbii albastre este titrat prin ELISA indirectă. Diluții binare de antigen sunt titrate față de o diluție constantă (1/100) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează o diluție de 1:20 în PBS de antigen al bolii limbii albastre în raport cu o diluție serica binara (50 μl/godeu) pe placă de microtitrare, utilizând o pipeta multicanal. 2. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ 0,8 DO după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ 0,8 DO după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii limbii albastre. Celule VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ 0,8 DO după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii limbii albastre. Celule VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării virusului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii limbii albastre. Celule VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării virusului dar necesită concentrare de 50 până la 100 de ori pentru a fi eficient. Aceasta poate fi obținută prin oricare procedura de concentrare a proteinei; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării virusului dar necesită concentrare de 50 până la 100 de ori pentru a fi eficient. Aceasta poate fi obținută prin oricare procedura de concentrare a proteinei; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugare de 0,3% beta-propiolactonă. Ser martor pozitiv cunoscut: Utilizând ser și antigen de referință internațional, se produce un ser standard național, standardizat pentru a obține o proporție optimă în raport cu serul de referință internațional, liofilizat și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de 50 până la 100 de ori pentru a fi eficient. Aceasta poate fi obținută prin oricare procedura de concentrare a proteinei; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugare de 0,3% beta-propiolactonă. Ser martor pozitiv cunoscut: Utilizând ser și antigen de referință internațional, se produce un ser standard național, standardizat pentru a obține o proporție optimă în raport cu serul de referință internațional, liofilizat și utilizat că ser martor cunoscut la fiecare test. Serul de testat Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu antigenul și dacă formează o linie completă identică cu cea a serului martor. Un ser de testat este negativ dacă nu formează o linie specifică cu antigenul și dacă linia nu se intersectează linia serului martor. Placă Petri trebuie examinată în raport cu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu antigenul și dacă formează o linie completă identică cu cea a serului martor. Un ser de testat este negativ dacă nu formează o linie specifică cu antigenul și dacă linia nu se intersectează linia serului martor. Placă Petri trebuie examinată în raport cu un fond întunecat utilizând lumină indirectă. Boală hemoragica epizootica (BHE) Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
specifică cu antigenul și dacă linia nu se intersectează linia serului martor. Placă Petri trebuie examinată în raport cu un fond întunecat utilizând lumină indirectă. Boală hemoragica epizootica (BHE) Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii hemoragice epizootice. Celule VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
cu antigenul și dacă linia nu se intersectează linia serului martor. Placă Petri trebuie examinată în raport cu un fond întunecat utilizând lumină indirectă. Boală hemoragica epizootica (BHE) Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii hemoragice epizootice. Celule VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării virusului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii hemoragice epizootice. Celule VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării virusului, dar necesită concentrare de 50 până la 100 de ori pentru a fi eficient. Aceasta poate fi obținută prin oricare procedura de concentrare a proteinei; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
VERO și BHK sunt recomandate. Antigenul este prezent în supernatant la sfarsitul multiplicării virusului, dar necesită concentrare de 50 până la 100 de ori pentru a fi eficient. Aceasta poate fi obținută prin oricare procedura de concentrare a proteinei; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugare de 0,3% beta-propiolactonă. Ser martor pozitiv cunoscut: Utilizând ser și antigen de referință internațional, se produce un ser standard național, standardizat pentru a obține o proporție optimă, în raport cu serul de referință internațional, liofilizat și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de 50 până la 100 de ori pentru a fi eficient. Aceasta poate fi obținută prin oricare procedura de concentrare a proteinei; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugare de 0,3% beta-propiolactonă. Ser martor pozitiv cunoscut: Utilizând ser și antigen de referință internațional, se produce un ser standard național, standardizat pentru a obține o proporție optimă, în raport cu serul de referință internațional, liofilizat și utilizat că ser martor cunoscut la fiecare test. Serul de testat Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu antigenul și dacă formează o linie completă identică cu cea a serului martor. Un ser de testat este negativ dacă nu formează o linie specifică cu antigenul și dacă linia nu se intersectează linia serului martor. Placă Petri trebuie examinată în raport cu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu antigenul și dacă formează o linie completă identică cu cea a serului martor. Un ser de testat este negativ dacă nu formează o linie specifică cu antigenul și dacă linia nu se intersectează linia serului martor. Placă Petri trebuie examinată în raport cu un fond întunecat utilizând iluminare indirectă. Rino-traheita infecțioasă bovina (IBR)/Vulvo-vaginita pustuloasa bovina (IPV) Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Serul: Toate serurile
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
IBR)/Vulvo-vaginita pustuloasa bovina (IPV) Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Serul: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate la cald la 56°C, timp de 30 minute. Procedeu: Testul de seroneutralizare cu ser în diluție constantă și antigen în diluții diferite pe placă de microtitrare, utilizând MDBK sau alte celule susceptibile. Tulpina de virus Oxford, tulpina Colorado sau orice altă tulpina de referință este utilizată la un titru de 100 TCID^50/0,025 ml; probe inactivate de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
trebuie să fie adăugate la mediul de transport, de exemplu penicilină 1.000 UI, neomicina sulfat 100 UI, polimixin B sulfat 50 UI, micostatin 100 UI. B. Testul de virus-neutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: preparat stoc de antigen al virusului febrei aftoase în culturi celulare sau pe limbi de vită și stocat la -70°C sau mai puțin sau la -20°C după adăugarea a 50% glicerol. Acesta este antigenul stoc. Virusul febrei aftoase este stabil în aceste
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
efectuat în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: preparat stoc de antigen al virusului febrei aftoase în culturi celulare sau pe limbi de vită și stocat la -70°C sau mai puțin sau la -20°C după adăugarea a 50% glicerol. Acesta este antigenul stoc. Virusul febrei aftoase este stabil în aceste condiții și titrul variază puțin pe o perioadă de luni de zile. Procedeu: Testul este efectuat în plăci de microtitrare cu fund plat destinate pentru culturi tisulare, utilizând celule susceptibile de tipul
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
valorile martorilor depășesc aceste limite, testările se repetă. La un titru final de 1/11 sau mai putin sunt considerate negative. C. Determinarea și cuantificarea de anticorpi prin ELISA va fi efectuată în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: Antiserul de iepure în raport cu antigen 146S a șapte tipuri de virus al febrei aftoase (FMDV) utilizat la o concentrație optimă predeterminata în tampon carbonat/bicarbonat, pH 9,6. Antigenele sunt preparate din tulpini selectate de virus multiplicat pe monostraturi de celule BHK-21. Supernatantul nepurificat este
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
cuantificarea de anticorpi prin ELISA va fi efectuată în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: Antiserul de iepure în raport cu antigen 146S a șapte tipuri de virus al febrei aftoase (FMDV) utilizat la o concentrație optimă predeterminata în tampon carbonat/bicarbonat, pH 9,6. Antigenele sunt preparate din tulpini selectate de virus multiplicat pe monostraturi de celule BHK-21. Supernatantul nepurificat este utilizat și pretitrat în conformitate cu protocolul, dar fără adăugare de ser, pentru a da o diluție care după adăugarea unui volum egal de PBST (tampon
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
-20 și indicator roșu fenol) ce va da o densitate optică între 1,2 și 1,5. Virușii pot fi utilizați inactivați. PBST este utilizat că diluant. Antiserul de porc de Guineea este preparat prin inocularea porcilor de Guineea cu antigen 146S al fiecărui serotip. O concentrație optimă predeterminata este preparată în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]