54,545 matches
-
agar-agar. Mediul trebuie să fie steril. Sterilizarea termică poate duce la o pierdere de NH3. Cultura mamă Culturile mamă sunt culturi mici de alge care se transferă cu regularitate într-un mediu proaspăt pentru a acționa ca material inițial de testare. Dacă nu sunt folosite cu regularitate, se scurg pe tuburile înclinate acoperite cu agar-agar. Culturile se transferă într-un mediu proaspăt cel puțin o dată la 2 luni. Culturile mamă se cresc în vase conice care conțin mediul corespunzător (volum cca.
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
densitatea la care cultura trebuie transferată într-un mediu nou. Acest lucru trebuie să se facă înainte ca algele din cultură să atingă faza morții. Precultura: Precultura are ca scop obținerea unei cantități de alge adecvată pentru inocularea culturilor de testare. Precultura se incubează în condițiile testării și se folosește în timpul creșterii exponențiale, în mod normal după o perioadă de incubare de aproximativ trei zile. Când culturile de alge conțin celule deformate sau anormale, ele sunt înlăturate. Apendicele 2 ISO 8692
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
într-un mediu nou. Acest lucru trebuie să se facă înainte ca algele din cultură să atingă faza morții. Precultura: Precultura are ca scop obținerea unei cantități de alge adecvată pentru inocularea culturilor de testare. Precultura se incubează în condițiile testării și se folosește în timpul creșterii exponențiale, în mod normal după o perioadă de incubare de aproximativ trei zile. Când culturile de alge conțin celule deformate sau anormale, ele sunt înlăturate. Apendicele 2 ISO 8692 - Calitatea Apei - testul de inhibare a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
mg/l) CE r50 (0 - 72 h) 0,84 0,60 - 1,03 CEb50 (0 - 72 h) 0,53 0,20 - 0,75 C.4. DETERMINAREA BIODEGRADABILITĂȚII "RAPIDE" PARTEA 1. CONSIDERAȚII GENERALE 1.1. INTRODUCERE Sunt descrise șase metode de testare care permit trierea substanțelor chimice pentru biodegradabilitate rapidă în mediul apos aerob: a) Epuizarea Carbonului Organic Dizolvat (COD) (Metoda C4-A) b) Test de screening OECD - Epuizarea COD (Metoda C4-B) c) Degajarea bioxidului de carbon (CO2) (Testul modificat Sturm) (Metoda C4-C
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
presiunea de vapori și caracteristicile de adsorbție. Structura sau formula chimică trebuie cunoscute pentru a calcula valorile teoretice și/sau a verifica valorile determinate ale parametrilor, de exemplu, CTO, CO2T, COD, COT, CCO (vezi anexele I și II). Substanțele de testare care sunt solubile în apă până la cel puțin 100 mg/l pot fi evaluate prin toate metodele, cu condiția ca ele să fie nevolatile și neadsorbante. Pentru acele substanțe chimice care sunt greu solubile în apă, volatile sau adsorbante, metodele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
greu solubile în apă, volatile sau adsorbante, metodele adecvate sunt indicate în tabelul 1 și descrise în anexa III. Substanțele chimice cu volatilitate moderată pot fi testate prin metoda epuizării COD, dacă există destul spațiu pentru gaz în vasele de testare (care trebuie să aibă dopuri adecvate). În acest caz, se pregătește și un martor abiotic care să permită urmărirea pierderilor de masă. Tabelul 1: Aplicabilitatea metodelor de testare Test Metoda analitică Adecvare la substanțele care sunt: puțin solubile volatile adsorbante
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
metoda epuizării COD, dacă există destul spațiu pentru gaz în vasele de testare (care trebuie să aibă dopuri adecvate). În acest caz, se pregătește și un martor abiotic care să permită urmărirea pierderilor de masă. Tabelul 1: Aplicabilitatea metodelor de testare Test Metoda analitică Adecvare la substanțele care sunt: puțin solubile volatile adsorbante Epuizare COD Carbon organic dizolvat - - +/- Epuizare OECD modificată Carbon organic dizolvat - - +/- Degajarea CO2 Respirometrie: degajarea CO2 + - + Respirometrie manometrică Respirometrie manometrică: consum de oxigen + +/- + Vas închis Respirometrie: oxigen dizolvat
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Carbon organic dizolvat - - +/- Degajarea CO2 Respirometrie: degajarea CO2 + - + Respirometrie manometrică Respirometrie manometrică: consum de oxigen + +/- + Vas închis Respirometrie: oxigen dizolvat +/- + + MITI Respirometrie: consum de oxigen + +/- + Sunt necesare informații legate de puritatea sau proporțiile relative ale componentelor majore ale compusului de testare pentru a interpreta rezultatele obținute, în special când rezultatele au valori mici sau marginale. Informațiile legate de toxicitatea substanței față de bacterii (anexa IV) sunt foarte folositoare pentru alegerea concentrațiilor și se pot dovedi esențiale pentru interpretarea corectă a valorilor scăzute
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
dovezi în cazul acestei substanțe înainte ca ea să fie acceptată ca substanță de referință. La testele de respirometrie, compușii care conțin azot pot afecta consumul de oxigen din cauza nitrificării (vezi anexele II și V). 1.4. PRINCIPIUL METODELOR DE TESTARE O soluție sau suspensie a substanței de testare în mediu mineral este inoculată și incubată în condiții aerobe la întuneric sau lumină difuză. Cantitatea de COD datorată inoculului în soluție trebuie să fie menținută la valori cât mai mici posibile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
să fie acceptată ca substanță de referință. La testele de respirometrie, compușii care conțin azot pot afecta consumul de oxigen din cauza nitrificării (vezi anexele II și V). 1.4. PRINCIPIUL METODELOR DE TESTARE O soluție sau suspensie a substanței de testare în mediu mineral este inoculată și incubată în condiții aerobe la întuneric sau lumină difuză. Cantitatea de COD datorată inoculului în soluție trebuie să fie menținută la valori cât mai mici posibile în comparație cu cantitatea de COD datorată substanței de testare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
testare în mediu mineral este inoculată și incubată în condiții aerobe la întuneric sau lumină difuză. Cantitatea de COD datorată inoculului în soluție trebuie să fie menținută la valori cât mai mici posibile în comparație cu cantitatea de COD datorată substanței de testare. Activitatea endogenă a inoculului este cuantificată făcând teste paralele blanc, cu inocul și fără substanță de testare, deși activitatea endogenă a celulelor în prezența substanței nu se suprapune exact peste activitatea endogenă a martorului. În paralel se testează o substanță
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de COD datorată inoculului în soluție trebuie să fie menținută la valori cât mai mici posibile în comparație cu cantitatea de COD datorată substanței de testare. Activitatea endogenă a inoculului este cuantificată făcând teste paralele blanc, cu inocul și fără substanță de testare, deși activitatea endogenă a celulelor în prezența substanței nu se suprapune exact peste activitatea endogenă a martorului. În paralel se testează o substanță de referință pentru a controla funcționarea modului de operare. În general, degradarea este urmată de determinarea parametrilor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
intervale destul de scurte, pentru a permite identificarea momentului de începere și terminare a biodegradării. Respirometrele automate o măsurare continuă. COD se măsoară uneori alături de un alt parametru, dar acest lucru se face în mod obișnuit numai la începutul și sfârșitul testării. De asemenea, se poate folosi o analiză chimică specifică pentru a estima degradarea primară a substanței de testare și pentru a determina concentrația substanțelor intermediare formate (obligatoriu în testul MITI). În mod normal, testul durează 28 zile. Totuși, testele se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
continuă. COD se măsoară uneori alături de un alt parametru, dar acest lucru se face în mod obișnuit numai la începutul și sfârșitul testării. De asemenea, se poate folosi o analiză chimică specifică pentru a estima degradarea primară a substanței de testare și pentru a determina concentrația substanțelor intermediare formate (obligatoriu în testul MITI). În mod normal, testul durează 28 zile. Totuși, testele se pot încheia înainte de 28 zile, adică de îndată ce curba biodegradării se aplatizează pentru cel puțin 3 determinări. Testele se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
1.5.1. Reproductibilitate Dată fiind natura biodegradării și a culturilor bacteriene mixte folosite ca inoculi, determinările se fac cel puțin în duplicat. S-a observat experimental că la o concentrație mai mare de microorganisme adăugate inițial în mediul de testare variațiile între replici sunt mai mici. Testele inter-laboratoare au arătat de asemenea că pot exista mari variații între rezultatele obținute de diferite laboratoare, dar că se poate ajunge la o armonizare acceptabilă în cazul compușilor ușor biodegradabili. 1.5.2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de degradare a substanței de referință a atins nivelul de biodegradabilitate rapidă în 14 zile. Dacă nu este întrunită nici una din aceste condiții, testul se repetă. Dată fiind rigoarea metodelor, valorile scăzute nu înseamnă în mod necesar că substanța de testare nu este biodegradabilă în condiții de mediu, ci că sunt necesare alte studii pentru a determina biodegradabilitatea. Dacă într-un test de toxicitate care conține atât substanța de testare cât și o substanță chimică de referință are loc mai puțin
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
metodelor, valorile scăzute nu înseamnă în mod necesar că substanța de testare nu este biodegradabilă în condiții de mediu, ci că sunt necesare alte studii pentru a determina biodegradabilitatea. Dacă într-un test de toxicitate care conține atât substanța de testare cât și o substanță chimică de referință are loc mai puțin de 35% degradare (bazat pe COD) sau mai puțin de 25% (bazat pe CTO sau CO2T) în 14 zile, se poate presupune că substanța de testare este inhibitoare (vezi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
atât substanța de testare cât și o substanță chimică de referință are loc mai puțin de 35% degradare (bazat pe COD) sau mai puțin de 25% (bazat pe CTO sau CO2T) în 14 zile, se poate presupune că substanța de testare este inhibitoare (vezi și anexa IV). Seria de teste se repetă, dacă este posibil folosind o concentrație mai scăzută a substanței de testare și/sau o concentrație mai ridicată a inoculului, dar nu mai mult de 30 mg solide/litru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
puțin de 25% (bazat pe CTO sau CO2T) în 14 zile, se poate presupune că substanța de testare este inhibitoare (vezi și anexa IV). Seria de teste se repetă, dacă este posibil folosind o concentrație mai scăzută a substanței de testare și/sau o concentrație mai ridicată a inoculului, dar nu mai mult de 30 mg solide/litru. 1.6. MOD DE OPERARE GENERAL ȘI PREGĂTIRI Condițiile generale aplicabile testelor sunt rezumate în tabelul 2. Aparatura și alte condiții experimentale legate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
alte condiții experimentale legate în mod specific de un anume test sunt descrise în subcapitolul destinat testului respectiv. Tabelul 2: Condiții experimentale Test Epuizare COD EliminareCO 2 Respiro-metrie manometrică Test de screening OECD Vas închis MITI (I) Concentrația substanței de testare în mg/l 100 2-10 100 mg COD/l 10-40 10-20 10-40 mg CTO/l 50-100 5-10 Concentrația inoculului (în celule/l, aprox) 30 mg/l SS sau 100 ml efluent /l (107-108) 0,5ml efluent secundar /l (105) 5
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
25±1șC COD = carbon organic dizolvat CTO = cerere teoretică de oxigen SS = solide în suspensie 1.6.1. Apa de diluție Se folosește apa deionizată sau distilată fără concentrații inhibitoare de substanțe toxice (de exemplu, ioni de Cu ++). Compusul de testare trebuie să nu contribuie cu mai mult de 10% la conținutul de carbon organic al apei. Pentru a elimina valorile ridicate ale probei blanc este necesar ca apa de testare să aibă o puritate ridicată. Contaminarea poate rezulta din impuritățile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de substanțe toxice (de exemplu, ioni de Cu ++). Compusul de testare trebuie să nu contribuie cu mai mult de 10% la conținutul de carbon organic al apei. Pentru a elimina valorile ridicate ale probei blanc este necesar ca apa de testare să aibă o puritate ridicată. Contaminarea poate rezulta din impuritățile inerente și din rășinile schimbătoare de ioni și material provenit din liza de bacterii și alge. Pentru fiecare serie tratată se folosește numai o șarjă de apă, verificată înainte prin
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
înainte prin analiza COD. O astfel de verificare nu este necesară pentru testul în vas flacon închis, dar consumul de oxigen al apei trebuie să fie scăzut. 1.6.2. Soluțiile mamă ale componentelor minerale Pentru a prepara soluțiile de testare se prepară soluțiile mamă ale componentelor minerale, cu concentrațiile adecvate. Se pot folosi următoarele soluții mamă (cu factori de diluție diferiți) pentru metodele: epuizare COD, test de screening modificat OECD, eliminare CO2, respirometrie manometrică, testul în vas închis. Factorii de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
prepararea acestei soluții imediat înainte de folosire, se adaugă o picătură de HCl concentrat sau 0,4 g sare disodică a acidului etilendiamin-tetraacetic (EDTA) pe litru. 1.6.3. Soluții mamă ale substanțelor chimice De exemplu, 1-10 g de substanță de testare sau de referință se dizolvă în apă deionizată și se completează până la 1 litru, când solubilitatea depășește 1 g /l. În caz contrar, soluțiile mamă se prepară în mediu mineral sau se adaugă substanța de testare direct în mediul mineral
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
g de substanță de testare sau de referință se dizolvă în apă deionizată și se completează până la 1 litru, când solubilitatea depășește 1 g /l. În caz contrar, soluțiile mamă se prepară în mediu mineral sau se adaugă substanța de testare direct în mediul mineral. Pentru manevrarea substanțelor chimice mai puțin solubile, vezi anexa III, dar în testul MITI (Metoda C.4 -F), nu se folosesc nici solvenți și nici agenți de emulsionare. 1.6.4. Inocul Inoculul poate proveni dintr-
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]