5,517 matches
-
1 (i), (ii) și (iii) din anexa B la Directiva 88/407/CEE; - un test de seroneutralizare sau un test ELISA pentru depistarea rinotraheitei infecțioase bovine sau vulvovaginitei pustuloase infecțioase; - un test de izolare a virusului (test de depistare a antigenilor prin fluorescență sau test imunoperoxidazic) pentru depistarea bolii mucoaselor-diareei virotice a bovinelor (MD-BVD), amânat după caz, până la vârsta de șase luni în cazul animalelor mai tinere; 11.4.3. au fost supuși unei perioade de carantină timp de treizeci de
32004D0639-ro () [Corola-website/Law/292495_a_293824]
-
de boala veziculoasă a porcului și unui test de depistare a anticorpilor de pestă porcină clasică, ale căror rezultate s-au dovedit negative.] 5 12 [10.4.C Au fost supuse, în cursul ultimelor 30 de zile, unui test cu antigen brucelic tamponat pentru depistarea brucelozei porcine, ale cărui rezultate s-au dovedit negative.] 10.5. Provin din șepteluri care nu sunt supuse unor restricții în cadrul programului național de eradicare a brucelozei. 10.6 Sunt/au fost5 expediate de la exploatația (exploatațiile
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
animale care urmează să fie sacrificate în temeiul unui program național de eradicare a bolilor și nu au fost vaccinate împotriva bolilor menționate la punctul 10.1 și au fost supuse, în cursul ultimelor 30 de zile, unui test cu antigen brucelic tamponat pentru depistarea brucelozei porcine, ale cărui rezultate s-au dovedit negative: 5 10 [10.4 B Au fost supuse, în cursul ultimelor 30 de zile, unui test de depistare a anticorpilor de boala veziculoasă a porcului și unui
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
simplă cu tuberculină aviară se efectuează în conformitate cu anexa B la Directiva 64/432/CEE, doar că locul injecției se află pe pielea flască de la baza urechii. Bruceloză (Brucella abortus) (BRL) Testul de seroaglutinare, reacția de fixare a complementului, testul cu antigen brucelic tamponat și testul de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) se efectuează în conformitate cu anexa C la Directiva 64/432/CEE. Bruceloză (Brucella abortus) (BRL) Testul de seroaglutinare, reacția de fixare a complementului, testul cu antigen brucelic tamponat și testul
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
a complementului, testul cu antigen brucelic tamponat și testul de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) se efectuează în conformitate cu anexa C la Directiva 64/432/CEE. Bruceloză (Brucella abortus) (BRL) Testul de seroaglutinare, reacția de fixare a complementului, testul cu antigen brucelic tamponat și testul de imunoadsorbție cu anticorpi marcați enzimatic (ELISA) se efectuează în conformitate cu anexa C la Directiva 64/432/CEE. Bruceloză (Brucella melitensis) (BRL) Testul se efectuează în conformitate cu anexa C la Directiva 64/432/CEE. Leucoză enzootică bovină (EBL
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
blocare sau de competitie se efectuează în conformitate cu protocolul următor: Testul ELISA de competitie, care utilizează anticorpul monoclonal 3-17-A3, este capabil să identifice anticorpi pentru toate serotipurile cunoscute ale virusului bolii limbii albastre (BTV). Principiul testului este întreruperea unei reacții între antigenul BTV și un anticorp monoclonal specific de grup (3-17-A3) prin adăugarea de ser de testare. Anticorpii de BTV prezenți în serul de testare blochează reactivitatea anticorpului monoclonal (AcM) și cauzează o reducere a dezvoltării scontate a culorii după adăugarea unui
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
testul spot - apendicele 1) sau pot fi titrate (titrarea serului - apendicele 2) pentru a defini punctele limită de diluție. Valorile de inhibiție mai mari decât 50 % pot fi considerate pozitive. Materiale și reactivi 1. Plăci de microtitrare ELISA adecvate. 2. Antigen: furnizat sub formă de concentrat celular, preparat după procedura descrisă în continuare și păstrat la o temperatură de -20 °C sau -70 ° C. 3. Tampon de blocare: tampon fosfat salin(PBS) ce conține 0,3 % ser bovin negativ în raport cu virusul
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
Apendicele 2: Schemă de titrare a serului (10 seruri/placă) ***[PLEASE INSERT THE REST OF THE TABLE FROM THE ORIGINAL]*** Controale Seruri de testare Protocolul de testare: Control conjugat (Cc): Godeurile 1A și 1B corespund controlului de blank ce cuprinde antigenul BTV și un conjugat. Se poate utiliza pentru a etalona cititorul ELISA. Control AcM (Cm): Coloanele 1 și 2, rândurile G și H corespund controlului anticorpului monoclonal ce cuprinde antigenul BTV, anticorpul monoclonal și conjugatul. Aceste godeuri reprezintă culoarea cea
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
Godeurile 1A și 1B corespund controlului de blank ce cuprinde antigenul BTV și un conjugat. Se poate utiliza pentru a etalona cititorul ELISA. Control AcM (Cm): Coloanele 1 și 2, rândurile G și H corespund controlului anticorpului monoclonal ce cuprinde antigenul BTV, anticorpul monoclonal și conjugatul. Aceste godeuri reprezintă culoarea cea mai pronunțată. Media valorilor densității optice ale acestui control reprezintă valoarea de inhibiție 0 %. Control pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E și F. Aceste godeuri
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
anticorpul monoclonal și conjugatul. Aceste godeuri reprezintă culoarea cea mai pronunțată. Media valorilor densității optice ale acestui control reprezintă valoarea de inhibiție 0 %. Control pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E și F. Aceste godeuri cuprind antigenul BTV, antiserul puternic pozitiv și, respectiv, slab pozitiv, AcM și conjugatul. Control negativ (C-) Godeurile 2A și 2B corespund controalelor negative, care cuprind antigenul BTV, antiserul BTV negativ, AcM și conjugatul. Ser de testare: Pentru studii serologice la scară mare
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E și F. Aceste godeuri cuprind antigenul BTV, antiserul puternic pozitiv și, respectiv, slab pozitiv, AcM și conjugatul. Control negativ (C-) Godeurile 2A și 2B corespund controalelor negative, care cuprind antigenul BTV, antiserul BTV negativ, AcM și conjugatul. Ser de testare: Pentru studii serologice la scară mare și teste de control rapide, serurile se pot testa într-o diluție unică 1:5 (apendicele 1). Eventual, 10 seruri se pot testa într-
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
o diluție unică 1:5 (apendicele 1). Eventual, 10 seruri se pot testa într-o serie de diluții de la 1:5 până la 1:640 (apendicele 2). Vor rezulta informații cu privire la titrul anticorpului din serul de testare. Procedura: 1. Se diluează antigenul BTV la concentrația pretitrată în PBS, se agită energic cu ajutorul unui aparat cu ultrasunete pentru a dispersa agregatele de virus (în absența unui aparat cu ultrasunete, se agită puternic cu pipeta) și se adaugă 50 µl în toate godeurile plăcii
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
unui aparat cu ultrasunete pentru a dispersa agregatele de virus (în absența unui aparat cu ultrasunete, se agită puternic cu pipeta) și se adaugă 50 µl în toate godeurile plăcii ELISA. Se loveste usor placa de masa pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează pentru 60 de minute la 37 °C într-un incubator-agitator. Se spală plăcile de trei ori prin umplearea și se golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă cu hârtie sugativă. 3. Godeurile de control: Se adaugă
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
ochiul liber, fie folosind un cititor spectrofotometric. Analiza rezultatelor: Cu ajutorul unui program, pe calculator se editează valorile densității optice (DO) și procentul de inhibiție (PI) ale serurilor de testare și blank pe baza valorii medii înregistrate în godeurile de control antigen. Aceste valori ale DO și PI se utilizează pentru a determina dacă testul a fost efectuat în limitele acceptabile. Limitele superioare (UCL) și cele inferioare (LCL) ale controlului AcM (antigen plus AcM în absența serului de testare) se situează între
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
blank pe baza valorii medii înregistrate în godeurile de control antigen. Aceste valori ale DO și PI se utilizează pentru a determina dacă testul a fost efectuat în limitele acceptabile. Limitele superioare (UCL) și cele inferioare (LCL) ale controlului AcM (antigen plus AcM în absența serului de testare) se situează între valorile 0,4 și 1,4 ale DO. Plăcile care nu sunt conforme criteriilor menționate anterior trebuie respinse. În absența unui program pe calculator, se editează valorile DO cu ajutorul unei
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
și 1,4 ale DO. Plăcile care nu sunt conforme criteriilor menționate anterior trebuie respinse. În absența unui program pe calculator, se editează valorile DO cu ajutorul unei imprimante ELISA. Se calculează valoarea medie a densității optice pentru godeurile de control antigen, care este echivalentă cu 100 %. Se determină valoarea DO la 50 % și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărui eșantion. Procentul valorii de inhibiție (PI) = 100 - (DO a fiecărui control/media DO a Cm) × 100. Godeurile ce contin serul de
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
pot de asemenea titra pentru a indica gradul de pozitivitate. Citirea cu ochiul liber: Eșantioanele pozitive și negative sunt ușor reperabile cu ochiul liber; eșantioanele slab pozitive sau cele puternic negative pot fi mai dificil interpretabile cu ochiul liber. Prepararea antigenului virusului BTV pentru ELISA: 1. Se spală de trei ori 40-60 de linii celulare BHK-21 confluente cu mediu Eagle fără ser și se infectează cu serotipul 1 al virusului bolii limbii albastre în mediul Eagle fără ser. 2. Se incubează
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
în PBS) cu ajutorul unor tuburi de centrifugare Beckmann de 30 ml și al unui rotor SW 28. 11. Se elimină supernatantul, se lasă tuburile să se scurgă bine și se repune în suspensie fragmentul în PBS prin sonicare. Se stochează antigenul în părți alicote la -20 °C. Titrarea antigenului virusului BTV pentru ELISA Titrarea antigenului bolii limbii albastre pentru ELISA se face prin tehnica ELISA indirectă. Diluțiile în progresie geometrică ale antigenului se titrează în funcție de o diluție constantă (1/100) de
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
de 30 ml și al unui rotor SW 28. 11. Se elimină supernatantul, se lasă tuburile să se scurgă bine și se repune în suspensie fragmentul în PBS prin sonicare. Se stochează antigenul în părți alicote la -20 °C. Titrarea antigenului virusului BTV pentru ELISA Titrarea antigenului bolii limbii albastre pentru ELISA se face prin tehnica ELISA indirectă. Diluțiile în progresie geometrică ale antigenului se titrează în funcție de o diluție constantă (1/100) de anticorp monoclonal 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
rotor SW 28. 11. Se elimină supernatantul, se lasă tuburile să se scurgă bine și se repune în suspensie fragmentul în PBS prin sonicare. Se stochează antigenul în părți alicote la -20 °C. Titrarea antigenului virusului BTV pentru ELISA Titrarea antigenului bolii limbii albastre pentru ELISA se face prin tehnica ELISA indirectă. Diluțiile în progresie geometrică ale antigenului se titrează în funcție de o diluție constantă (1/100) de anticorp monoclonal 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează antigenul BTV în PBS la
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
în suspensie fragmentul în PBS prin sonicare. Se stochează antigenul în părți alicote la -20 °C. Titrarea antigenului virusului BTV pentru ELISA Titrarea antigenului bolii limbii albastre pentru ELISA se face prin tehnica ELISA indirectă. Diluțiile în progresie geometrică ale antigenului se titrează în funcție de o diluție constantă (1/100) de anticorp monoclonal 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează antigenul BTV în PBS la o diluție de 1:20 pe o placă de microtitrare într-o serie de diluții în progresie
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
BTV pentru ELISA Titrarea antigenului bolii limbii albastre pentru ELISA se face prin tehnica ELISA indirectă. Diluțiile în progresie geometrică ale antigenului se titrează în funcție de o diluție constantă (1/100) de anticorp monoclonal 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează antigenul BTV în PBS la o diluție de 1:20 pe o placă de microtitrare într-o serie de diluții în progresie geometrică (50 µl/godeu) utilizând o pipetă multicanal. 2. Se incubează o oră la 37 °C într-un agitator
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
Se adaugă substrat și cromogen după indicațiile anterioare. Se întrerupe reacția după 10 minute prin adăugarea acidului sulfuric 1 M (50 µl/godeu). În testul de concurență, anticorpul monoclonal trebuie să fie în exces, astfel, se alege o diluție a antigenului ce se găsește pe curba de titrare (nu în zona de platou) care dă aproximativ o DO de 0,8 după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar se efectuează în conformitate cu protocolul următor: Antigen: Se prepară antigen
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
o diluție a antigenului ce se găsește pe curba de titrare (nu în zona de platou) care dă aproximativ o DO de 0,8 după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar se efectuează în conformitate cu protocolul următor: Antigen: Se prepară antigen precipitant în orice sistem de cultură celulară compatibil cu o multiplicare rapidă a serotipului de referință al virusului bolii limbii albastre. Se recomandă celule BHK sau Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la sfârșitul creșterii virale
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]
-
antigenului ce se găsește pe curba de titrare (nu în zona de platou) care dă aproximativ o DO de 0,8 după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar se efectuează în conformitate cu protocolul următor: Antigen: Se prepară antigen precipitant în orice sistem de cultură celulară compatibil cu o multiplicare rapidă a serotipului de referință al virusului bolii limbii albastre. Se recomandă celule BHK sau Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la sfârșitul creșterii virale, dar necesită o
32004D0212-ro () [Corola-website/Law/292306_a_293635]