6,940 matches
-
L 301, 17.10.1992, p. 17. 14 JO L 388, 30.12.1989, p. 18. 15 Analizele privind condițiile prevăzute în prezenta anexă trebuie efectuate înainte ca produsele prevăzute în anexele IV și V să fie adăugate la untul concentrat. 16 Se va realiza o verificare inopinată, în funcție de cantitățile produse, dar cel puțin o dată pentru fiecare 500 de tone și/sau o dată pe lună, în conformitate cu normele prevăzute în anexa XXV la Regulamentul (CE) nr. 213/2001. Untul concentrat și grăsimea
32005R1898-ro () [Corola-website/Law/294415_a_295744]
-
la untul concentrat. 16 Se va realiza o verificare inopinată, în funcție de cantitățile produse, dar cel puțin o dată pentru fiecare 500 de tone și/sau o dată pe lună, în conformitate cu normele prevăzute în anexa XXV la Regulamentul (CE) nr. 213/2001. Untul concentrat și grăsimea lactată, fracționate sau nu, sunt acceptate numai dacă rezultatul analizei este negativ. 17 Un tabel pentru fiecare categorie de unități care utilizează: (a) mai mult de 5 tone de echivalent-unt pe lună ("utilizatori mari"); (b) mai mult de
32005R1898-ro () [Corola-website/Law/294415_a_295744]
-
1) litera (b) punctul (ii)" 40 Se va realiza o verificare inopinată, în funcție de cantitățile produse, dar cel puțin pentru 500 de tone și/sau o dată pe lună, în conformitate cu normele prevăzute în aAnexa XXV la Regulamentul (CE) nr. 213/2001. Untul concentrat, fracționat sau nu, poate fi acceptat numai dacă rezultatul analizei este negativ. Publisher: OPOCE; Publication: RO; Publication Style: Romanian Page 1 of 90
32005R1898-ro () [Corola-website/Law/294415_a_295744]
-
sau testele biologice riscă să eșueze din cauza concurenței sau a inhibării bacteriilor saprofite. În cazul în care se obțin rezultate pozitive clare în urma testelor de selecție, însă testele de izolare sunt negative, trebuie repetate testele de izolare din același extract concentrat sau din țesut vascular suplimentar prelevat de la talonul tuberculilor tăiați din același eșantion și, după caz, trebuie testate eșantioane suplimentare. 12 Identificarea fiabilă a culturilor pure de izolări prezumtive de R. solanacearum necesită efectuarea testelor descrise în secțiunea VI.B.
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
10 ml). 1.1.4. Se centrifughează maceratul decantat la 7 000 g timp de 15 minute (sau la 10 000 g timp de zece minute) la o temperatură de 4-10 °C și se îndepărtează supranatantul fără a deranja extractul concentrat. 1.1.5. Se face o nouă suspensie a extractului concentrat în 1,5 ml tampon concentrat (apendicele 4). Se folosesc 500 μl pentru a testa R. solanacearum, 500 μl pentru Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus și 500 μl pentru referință
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
sau la 10 000 g timp de zece minute) la o temperatură de 4-10 °C și se îndepărtează supranatantul fără a deranja extractul concentrat. 1.1.5. Se face o nouă suspensie a extractului concentrat în 1,5 ml tampon concentrat (apendicele 4). Se folosesc 500 μl pentru a testa R. solanacearum, 500 μl pentru Clavibacter michiganensis subsp. sepedonicus și 500 μl pentru referință. Se adaugă glicerol steril la concentrația finală de 10-25 % (volum) la 500 μl de alicote de referință
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
10 000 g timp de zece minute (sau la 7 000 g timp de 15 minute), preferabil la o temperatură de 4-10 °C, se îndepărtează supranatantul și se face o nouă suspensie a extractului concentrat în 1 ml de tampon concentrat (apendicele 4). (b) Filtrare pe membrană (dimensiunea minimă a porilor de 0,45 μm) urmată de spălarea filtrului în 5-10 ml de tampon concentrat și reținerea soluțiilor de spălare. Această metodă este potrivită pentru volume mari de apă cu conținut
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
îndepărtează supranatantul și se face o nouă suspensie a extractului concentrat în 1 ml de tampon concentrat (apendicele 4). (b) Filtrare pe membrană (dimensiunea minimă a porilor de 0,45 μm) urmată de spălarea filtrului în 5-10 ml de tampon concentrat și reținerea soluțiilor de spălare. Această metodă este potrivită pentru volume mari de apă cu conținut mic de saprofite. În general, concentrarea nu se recomandă pentru eșantioanele de efluenți proveniți din prelucrarea cartofilor sau de efluenți de ape reziduale, dat
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
extracte de eșantion proaspăt preparate. După caz, se pot folosi și extracte conservate în soluție de glicerol la o temperatură cuprinsă între - 68 °C și - 86 °C. Glicerolul poate fi separat de eșantion prin adăugarea a 1 ml de tampon concentrat (a se vedea apendicele 4), recentrifugarea timp de cincisprezece minute la 7 000 g și resuspendarea în același volum de tampon concentrat. Acest lucru este rareori necesar, mai ales atunci când eșantioanele sunt fixate de lame prin flambare. Se prepară lame
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
68 °C și - 86 °C. Glicerolul poate fi separat de eșantion prin adăugarea a 1 ml de tampon concentrat (a se vedea apendicele 4), recentrifugarea timp de cincisprezece minute la 7 000 g și resuspendarea în același volum de tampon concentrat. Acest lucru este rareori necesar, mai ales atunci când eșantioanele sunt fixate de lame prin flambare. Se prepară lame de control pozitiv separate dintr-o sușă omologă sau orice altă sușă de referință de R. solanacearum în suspensie în extract de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
metode: (i) Extracte concentrate cu relativ puțin amidon: Se pipetează un volum standard (15 μl este adecvat unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre cu diametru mai mare) dintr-o diluție de 1/100 de extract concentrat resuspendat în prima fereastră. Apoi, se pipetează un volum similar de extract concentrat nediluat (1/1) în ferestrele rămase din primul șir. Al doilea șir poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, în conformitate cu cele indicate în
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
15 μl este adecvat unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre cu diametru mai mare) dintr-o diluție de 1/100 de extract concentrat resuspendat în prima fereastră. Apoi, se pipetează un volum similar de extract concentrat nediluat (1/1) în ferestrele rămase din primul șir. Al doilea șir poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, în conformitate cu cele indicate în figura 1. (ii) Pentru alte extracte concentrate: Se pregătesc diluții zecimale (1/10
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
pipetează un volum similar de extract concentrat nediluat (1/1) în ferestrele rămase din primul șir. Al doilea șir poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, în conformitate cu cele indicate în figura 1. (ii) Pentru alte extracte concentrate: Se pregătesc diluții zecimale (1/10, 1/100) din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard (15 μl corespund unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre cu un diametru mai mare
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
ferestrele rămase din primul șir. Al doilea șir poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, în conformitate cu cele indicate în figura 1. (ii) Pentru alte extracte concentrate: Se pregătesc diluții zecimale (1/10, 1/100) din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard (15 μl corespund unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre cu un diametru mai mare) din extractul concentrat resuspendat și din fiecare diluție într-un șir
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
diluții zecimale (1/10, 1/100) din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard (15 μl corespund unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre cu un diametru mai mare) din extractul concentrat resuspendat și din fiecare diluție într-un șir de ferestre. Șirul rămas poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, în conformitate cu cele indicate în figura 2. 5.2. Se lasă picăturile să se usuce la temperatura ambiantă
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
punctul 5.1 (ii): Se prepară diluția de lucru a anticorpilor în tampon pentru imunofluorescență. Diluția de lucru are efect asupra specificității. Figura 1: Pregătirea lamei de test în conformitate cu punctele 5.1. (i) și 5.3. (i) Diluții ale extractului concentrat resuspendat 1/100 1/1 1/1 1/1 1/1 Diluții ale extractului concentrat resuspendat (T = titru) T/2 T/4 T/2 T 2T Diluții duble ale antiserului/anticorpilor ***[PLEASE INSERT FIGURE AND REPLACE TEXT WITH THE ROMANIAN
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Diluția de lucru are efect asupra specificității. Figura 1: Pregătirea lamei de test în conformitate cu punctele 5.1. (i) și 5.3. (i) Diluții ale extractului concentrat resuspendat 1/100 1/1 1/1 1/1 1/1 Diluții ale extractului concentrat resuspendat (T = titru) T/2 T/4 T/2 T 2T Diluții duble ale antiserului/anticorpilor ***[PLEASE INSERT FIGURE AND REPLACE TEXT WITH THE ROMANIAN CORRESPONDENT]*** Échantillon 1 = eșantion 1 Double de l'échantillon 1 ou échantillon 2 = Duplicatul eșantionului
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 Figura 2: Pregătirea lamei de test în conformitate cu punctele 5.1. (ii) și 5.3. (ii) Diluție de lucru a antiserului/anticorpilor 1/1 1/10 1/100 gol gol Diluție decimală a extractului concentrat resuspendat ***[PLEASE INSERT FIGURE AND REPLACE TEXT WITH THE ROMANIAN CORRESPONDENT]*** Échantillon 1 = eșantion 1 Double de l'échantillon 1 ou échantillon 2 = Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 5.3.1. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă umedă
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
5.4.5. Interpretarea testului IF: (i) În cazul în care sunt descoperite celule intens fluorescente cu morfologie caracteristică, se determină numărul mediu de celule tipice pe câmp microscopic și se calculează numărul de celule tipice pe ml de extract concentrat resuspendat (apendicele 5). Lectura testului de imunofluorescență se consideră ca fiind pozitivă pentru eșantioanele care conțin cel puțin 5 x 103 de celule tipice pe ml de extract concentrat resuspendat. Eșantionul se consideră ca fiind potențial infectat și se efectuează
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
și se calculează numărul de celule tipice pe ml de extract concentrat resuspendat (apendicele 5). Lectura testului de imunofluorescență se consideră ca fiind pozitivă pentru eșantioanele care conțin cel puțin 5 x 103 de celule tipice pe ml de extract concentrat resuspendat. Eșantionul se consideră ca fiind potențial infectat și se efectuează un nou test. (ii) Lectura testului de imunofluorescență se consideră ca fiind negativă pentru eșantioanele care conțin mai puțin de 5 x 103 de celule pe ml de extract
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
resuspendat. Eșantionul se consideră ca fiind potențial infectat și se efectuează un nou test. (ii) Lectura testului de imunofluorescență se consideră ca fiind negativă pentru eșantioanele care conțin mai puțin de 5 x 103 de celule pe ml de extract concentrat resuspendat și eșantionul se consideră ca fiind negativ. Efectuarea altor teste nu este obligatorie. 6. Testele PCR Principii În cazul în care testul PCR se folosește drept test principal de selecție, iar rezultatul acestuia este pozitiv, trebuie efectuat un test
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
în testul PCR: - Extractul eșantionului care a produs anterior rezultate negative pentru depistarea R. solanacearum; - Tampoanele de control utilizate pentru a extrage bacteria și ADN din eșantion; - Amestecul reactiv pentru PCR. Următoarele controale pozitive ar trebui incluse: - Alicote ale extractelor concentrate resuspendate la care s-a adăugat R. solanacearum (preparare: a se vedea apendicele 3 B). - Suspensie de 106 de celule pe ml dintr-un izolat virulent de R. solanacearum în apă (exemplu, NCPPB 4156 = PD 2762 = CFBP 3857; a se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
etanol la 100 % (- 20 °C), se omogenizează scurt în agitator și se incubează pe gheață timp de zece minute. (11) Se centrifughează la 15 000 g timp de 20 de minute la 4 °C și se îndepărtează etanolul din extractul concentrat. (12) Se adaugă 500 μl de etanol la 80 % (- 20 °C) și se amestecă rotind tubul. (13) Se centrifughează la 15 000 g timp de zece minute la 4 °C, se păstrează extractul concentrat și se îndepărtează etanolul. (14) Extractul
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
și se îndepărtează etanolul din extractul concentrat. (12) Se adaugă 500 μl de etanol la 80 % (- 20 °C) și se amestecă rotind tubul. (13) Se centrifughează la 15 000 g timp de zece minute la 4 °C, se păstrează extractul concentrat și se îndepărtează etanolul. (14) Extractul concentrat se lasă să se usuce în aer liber sau într-un SpeedVac ADN. (15) Se face o nouă suspensie de extract concentrat în 100 μl de apă ultrapură sterilă și se lasă la
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
12) Se adaugă 500 μl de etanol la 80 % (- 20 °C) și se amestecă rotind tubul. (13) Se centrifughează la 15 000 g timp de zece minute la 4 °C, se păstrează extractul concentrat și se îndepărtează etanolul. (14) Extractul concentrat se lasă să se usuce în aer liber sau într-un SpeedVac ADN. (15) Se face o nouă suspensie de extract concentrat în 100 μl de apă ultrapură sterilă și se lasă la temperatura ambiantă timp de cel puțin douăzeci
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]