6,556 matches
-
alcooli puri. 4.17. Eicosanol, soluție de 0,2 % (m/V) în cloroform (etalon intern). 4.18. Gaz vector: hidrogen sau heliu pur, pentru cromatografie în fază gazoasă. 4.19. Gaz auxiliar: hidrogen sau heliu pur, pentru cromatografie în fază gazoasă. 5. MOD DE LUCRU 5.1. Prepararea nesaponificabilelor 5.1.1. Se introduce într-un balon de 250 ml, cu ajutorul microseringii de 500 μl, un volum de soluție de eicosanol de 0,1 % în cloroform (4.17) care conține o
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
agită cu grijă (fără a o răsturna) până la solubilizarea completă a alcoolilor alifatici. Se lasă în repaus minimum 15 minute la temperatura camerei, apoi se centrifughează timp de câteva minute: soluția limpede este gata pentru analiza prin cromatografie în faza gazoasă. Nota 6: Eventuala formare a unei opalescențe ușoare este normală și nu provoacă nici o interferență. Formarea unei floculații albe sau apariția unei colorații roz indică prezența umidității sau alterarea reactivului. În acest caz, testul trebuie să fie repetat. 5.4
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
unei opalescențe ușoare este normală și nu provoacă nici o interferență. Formarea unei floculații albe sau apariția unei colorații roz indică prezența umidității sau alterarea reactivului. În acest caz, testul trebuie să fie repetat. 5.4. Analiza prin cromatografie în faza gazoasă. 5.4.1. Operațiuni preliminare, condiționarea coloanei 5.4.1.1. Se instalează coloana în cromatograful în fază gazoasă, legând extremitatea de intrare la evaporatorul conectat la sistemul de fracționare și extremitatea de ieșire la detector. Se efectuează controalele generale
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
indică prezența umidității sau alterarea reactivului. În acest caz, testul trebuie să fie repetat. 5.4. Analiza prin cromatografie în faza gazoasă. 5.4.1. Operațiuni preliminare, condiționarea coloanei 5.4.1.1. Se instalează coloana în cromatograful în fază gazoasă, legând extremitatea de intrare la evaporatorul conectat la sistemul de fracționare și extremitatea de ieșire la detector. Se efectuează controalele generale ale complexului de cromatografie în faza gazoasă (etanșeitatea circuitului de gaz, eficacitatea detectorului, eficacitatea sistemului de fracționare și a
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
coloanei 5.4.1.1. Se instalează coloana în cromatograful în fază gazoasă, legând extremitatea de intrare la evaporatorul conectat la sistemul de fracționare și extremitatea de ieșire la detector. Se efectuează controalele generale ale complexului de cromatografie în faza gazoasă (etanșeitatea circuitului de gaz, eficacitatea detectorului, eficacitatea sistemului de fracționare și a sistemului de înregistrare etc.) 5.4.1.2. Dacă coloana este utilizată pentru prima dată, se recomandă să se efectueze condiționarea sa. Se trece un ușor flux de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
înregistrare etc.) 5.4.1.2. Dacă coloana este utilizată pentru prima dată, se recomandă să se efectueze condiționarea sa. Se trece un ușor flux de gaz de-a lungul acestei coloane, apoi se conectează complexul de cromatografie în fază gazoasă și se începe o încălzire treptată până când se atinge o temperatură cu cel puțin 20°C mai mare decât cea de funcționare (nota 7). Se menține această temperatură timp de minimum 2 ore, apoi se pune complexul în condiții de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
o încălzire treptată până când se atinge o temperatură cu cel puțin 20°C mai mare decât cea de funcționare (nota 7). Se menține această temperatură timp de minimum 2 ore, apoi se pune complexul în condiții de funcționare (reglarea fluxului gazos și a separării, aprinderea flăcării, joncțiunea cu aparatul de înregistrare electronic, reglarea temperaturii camerei pentru coloană, a detectorului și a inițiatorului etc.) și se înregistrează semnalul la o sensibilitate de cel puțin două ori mai mare decât cea prevăzută pentru
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
atenuarea minimă, - sensibilitatea de înregistrare: 1-2 milivolți din limita scării, - viteza hârtiei: 30-60 cm pe oră, - cantitatea de substanță injectată: 0,5-1 μl de soluție de TMSE Aceste condiții pot fi modificate în funcție de caracteristicile coloanei și ale cromatografului în fază gazoasă, astfel încât să se obțină cromatograme care îndeplinesc condițiile următoare: - timpul de retenție a alcoolului în C26 trebuie să fie de 18 ± 5 minute, - punctul maxim al alcoolului în C22 trebuie să fie 80 ± 20 % din valoarea maximă admisibilă de citire
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
probei prelevate pentru determinare, în grame. 6. EXPRIMAREA REZULTATELOR Se raportează conținutul de alcooli alifatici în miligrame la 100 g de substanță grasă și suma lor ca "alcooli alifatici totali". APENDICE Determinarea vitezei liniare a gazului În cromatograful în fază gazoasă, reglat la condiții de operare normale, se injectează 1-3 μl de metan (sau propan) și se cronometrează timpul folosit de gaz pentru a parcurge coloana, între momentul de injecție și cel de ieșire din valoarea de vârf (tM). Viteza liniară
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
în secunde. Figura 1: Cromatograma fracțiunii alcoolice a unui ulei virgin 1 = Eicosanol 2 = Docosanol 3 = Tricosanol 4 = Tetracosanol 5 = Pentacosanol 6 = Hexacosanol 7 = Heptacosanol 8 = Octacosanol ANEXA V DETERMINAREA COMPOZIȚIEI ȘI A CONȚINUTULUI DE STEROLI CU AJUTORUL CROMATOGRAFIEI ÎN FAZĂ GAZOASĂ CU COLOANĂ CAPILARĂ 1. OBIECT Metoda descrie procedeul de determinare a conținutului de steroli, simpli și totali, al materiilor grase. 2. PRINCIPIUL METODEI Materia grasă, la care s-a adăugat α-colestanol ca etalon intern, este saponificată cu hidroxid de potasiu
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de potasiu soluție în etanol, apoi nesaponificabilul este extras cu eter etilic. Fracțiunea sterolică este separată de extractul nesaponificabil prin cromatografie pe placă de silicagel bazic; sterolii recuperați din silicagel sunt transformați în trimetilsilileteri și analizați prin cromatografie în fază gazoasă în coloană capilară. 3. APARATURĂ 3.1. Balon de 250 ml echipat cu un condensator cu reflux cu racordurile din sticlă rodată. 3.2. Pâlnie de decantare de 500 ml. 3.3. Baloane de 250 ml. 3.4. Echipament complet
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
Balon cu vid de 50 ml cu un racord mamă din sticlă rodată 12/21 adaptabil la pâlnia de filtrare (3.7). 3.9. Eprubetă cu fund conic de 10 ml, prevăzută cu dop ermetic. 3.10. Cromatograf în fază gazoasă adaptat la funcționarea cu coloană capilară, dotat cu un sistem de separare, alcătuit din: 3.10.1. Incintă termostatată pentru coloană, care permite menținerea temperaturii dorite cu o precizie de circa 1°C 3.10.2. Ansamblu de vaporizare termoreglabil
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
m și un diametru interior de 0,25-0,32 mm, acoperită în interior cu lichid SE-52 sau SE-54 sau echivalent, cu o grosime cuprinsă între 0,10 și 0,30 μm. 3.12. Microseringă pentru cromatografie în fază gazoasă de 10 μl cu ac cementat. 4. REACTIVI 4.1. Hidroxid de potasiu, soluție etanolică până la aproximativ 2N: se dizolvă, prin răcire, 130 g de hidroxid de potasiu (titru minim 85 %) în 200 ml de apă distilată, apoi se completează
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de steroli: se prepară în momentul folosirii din sterolii extrași din uleiurile care le conțin. 4.17. α-colestanol soluție de 0,2 % (m/V) în cloroform (etalon intern). 4.18. Gaz vector: hidrogen sau heliu pur, pentru cromatografie în fază gazoasă. 4.19. Gaz auxiliar: hidrogen sau heliu pur, pentru cromatografie în fază gazoasă. 5. MOD DE LUCRU 5.1. Prepararea nesaponificabilului 5.1.1. În balonul de 250 ml se introduce, cu ajutorul microseringii de 500 μl, un volum de soluție
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
le conțin. 4.17. α-colestanol soluție de 0,2 % (m/V) în cloroform (etalon intern). 4.18. Gaz vector: hidrogen sau heliu pur, pentru cromatografie în fază gazoasă. 4.19. Gaz auxiliar: hidrogen sau heliu pur, pentru cromatografie în fază gazoasă. 5. MOD DE LUCRU 5.1. Prepararea nesaponificabilului 5.1.1. În balonul de 250 ml se introduce, cu ajutorul microseringii de 500 μl, un volum de soluție de α-colestanol de 0,2 % în cloroform (4.17) care conține o cantitate
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
se agită cu grijă (fără a o răsturna) până la solubilizarea completă a sterolilor. Se lasă în repaus minimum 15 minute la temperatura ambiantă, apoi se centrifughează timp de câteva minute: soluția limpede este gata pentru analiza prin cromatografie în faza gazoasă. Nota 5: Eventuala formare a unei opalescențe ușoare este normală și nu provoacă nici un deranjament. Formarea unei floculații albe sau apariția unei colorații roz sunt indici de prezență a umidității sau de alterare a reactivului. În acest caz, testul trebuie
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
este normală și nu provoacă nici un deranjament. Formarea unei floculații albe sau apariția unei colorații roz sunt indici de prezență a umidității sau de alterare a reactivului. În acest caz, testul trebuie repetat. 5.4. Analiza prin cromatografie în faza gazoasă 5.4.1. Operațiuni preliminare, condiționarea coloanei 5.4.1.1. Se instalează coloana în cromatograful în fază gazoasă, legând extremitatea de intrare la evaporatorul conectat la sistemul de separare și extremitatea de ieșire la detector. Se efectuează controalele generale
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
prezență a umidității sau de alterare a reactivului. În acest caz, testul trebuie repetat. 5.4. Analiza prin cromatografie în faza gazoasă 5.4.1. Operațiuni preliminare, condiționarea coloanei 5.4.1.1. Se instalează coloana în cromatograful în fază gazoasă, legând extremitatea de intrare la evaporatorul conectat la sistemul de separare și extremitatea de ieșire la detector. Se efectuează controalele generale ale complexului de cromatografie în faza gazoasă (etanșeitatea circuitului de gaz, eficacitatea detectorului, eficacitatea sistemului de separare și a
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
coloanei 5.4.1.1. Se instalează coloana în cromatograful în fază gazoasă, legând extremitatea de intrare la evaporatorul conectat la sistemul de separare și extremitatea de ieșire la detector. Se efectuează controalele generale ale complexului de cromatografie în faza gazoasă (etanșeitatea circuitului de gaz, eficacitatea detectorului, eficacitatea sistemului de separare și a sistemului de înregistrare etc.). 5.4.1.2. Dacă coloana este utilizată pentru prima dată, se recomandă să se efectueze condiționarea sa. Se trece un ușor flux de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
înregistrare etc.). 5.4.1.2. Dacă coloana este utilizată pentru prima dată, se recomandă să se efectueze condiționarea sa. Se trece un ușor flux de gaz de-a lungul acestei coloane, apoi se conectează complexul de cromatografie în fază gazoasă și se începe o încălzire treptată până când se atinge o temperatură cu cel puțin 20°C mai mare decât cea de funcționare (nota 6). Se menține această temperatură timp de minimum 2 ore, apoi se asigură condițiile de funcționare pentru
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
o încălzire treptată până când se atinge o temperatură cu cel puțin 20°C mai mare decât cea de funcționare (nota 6). Se menține această temperatură timp de minimum 2 ore, apoi se asigură condițiile de funcționare pentru complex (reglarea fluxului gazos și a fracționării, aprinderea flăcării, joncțiunea cu aparatul de înregistrare electronic, reglarea temperaturii camerei pentru coloană, a detectorului și inițiatorului etc.) și se înregistrează semnalul la o sensibilitate de cel puțin două ori mai mare decât cea prevăzută pentru executarea
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
ori atenuarea minimă, - sensibilitatea de înregistrare: 1-2 mV din limita scării, - viteza hârtiei: 30-60 cm/h, - cantitatea de substanță injectată: 0,5-1 μl de soluție de TMSE. Aceste condiții pot fi modificate în funcție de caracteristicile coloanei și ale cromatografului în fază gazoasă pentru a se obține cromatograme care îndeplinesc condițiile următoare: - timpul de retenție a β-sitosterolului trebuie să fie de 20 ± 5 minute, - valoarea de vârf pentru campesterol trebuie să fie: pentru uleiul de măsline (conținut mediu 3 %) 15 ± 5 % din limita
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
valorii de vârf corespondente și suma ariilor valorilor de vârf ale sterolilor. % de sterol x = x 100 Ax = aria valorii de vârf x, ΣA = suma ariilor tuturor valorilor de vârf. APENDICE Determinarea vitezei liniare a gazului În cromatograful în fază gazoasă, reglat în condiții de operare normale, se injectează 1-3 μl de metan (sau propan) și se cronometrează timpul folosit de gaz pentru a parcurge coloana, între momentul de injecție și cel de ieșire din valoarea de vârf (tM). Viteza liniară
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
24Z]-24-etiliden-5-colesten-3β 1,03 1,03 14 Δ-5,24-stigmastadienol [24S,R]-24-etil-Δ-5,24-colestadienă-3β 1,08 1,08 15 Δ-7-stigmastenol [24S,R]-24-etil-Δ-7,24-colesten-3β 1,12 1,12 16 Δ-7-avenesterol [24Z]-24-etiliden-Δ-7-colesten-3β 1,16 1,16 Figura 1 Cromatografie în fază gazoasă a fracțiunii sterolice a unui ulei de măsline brut Figura 2 Cromatografie în fază gazoasă a fracțiunii sterolice a unui ulei de măsline rafinat ANEXA VI DETERMINAREA CONȚINUTULUI DE ERITRODIOL ȘI DE UVAOL INTRODUCERE Eritrodiolul (termen generic care desemnează în
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
1,08 15 Δ-7-stigmastenol [24S,R]-24-etil-Δ-7,24-colesten-3β 1,12 1,12 16 Δ-7-avenesterol [24Z]-24-etiliden-Δ-7-colesten-3β 1,16 1,16 Figura 1 Cromatografie în fază gazoasă a fracțiunii sterolice a unui ulei de măsline brut Figura 2 Cromatografie în fază gazoasă a fracțiunii sterolice a unui ulei de măsline rafinat ANEXA VI DETERMINAREA CONȚINUTULUI DE ERITRODIOL ȘI DE UVAOL INTRODUCERE Eritrodiolul (termen generic care desemnează în mod convențional ansamblul de dioli eritrodiol și uvaol) este un element constitutiv al nesaponificabilului care
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]