6,022 matches
-
1 pct. (i): se prepară un set de diluții duble ale antiserului în tampon IF (apendicele 3): 1/4 din titru (T/4), 1/2 din titru (T/2), titru (T) și de două ori titrul (2T). (ii) În conformitate cu pregătirea lamei de test de la 2.1 pct. (ii): se prepară diluția de lucru (WD) a antiserului în tampon IF. Diluția de lucru este diluția antiserului cu specificitate optimă și este de obicei jumătate din titru. Figura 1 Pregătirea lamei de test
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
În conformitate cu pregătirea lamei de test de la 2.1 pct. (ii): se prepară diluția de lucru (WD) a antiserului în tampon IF. Diluția de lucru este diluția antiserului cu specificitate optimă și este de obicei jumătate din titru. Figura 1 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (i) și 2.3 pct. (i) Diluție standard a extractului concentrat resuspendat T = titru FITC T/4 T/2 T 2T => diluțiile duble ale antiserului Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
standard a extractului concentrat resuspendat T = titru FITC T/4 T/2 T 2T => diluțiile duble ale antiserului Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 Figura 2 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (ii) și 2.3 pct. (ii) FITC Diluție standard a antiserului pur pur 1/10 !/100 1/1000 => Diluțiile decimale ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
standard a antiserului pur pur 1/10 !/100 1/1000 => Diluțiile decimale ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 2.3.1. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă Se acoperă ferestrele de test cu diluția sau diluțiile antiserului. În ferestrele FITC se aplică PBS. Volumul antiserului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul extractului aplicat. 2.3.2. Se incubează acoperit timp de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
FITC se aplică PBS. Volumul antiserului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul extractului aplicat. 2.3.2. Se incubează acoperit timp de 30 de minute la temperatura camerei. 2.3.3. Se scutură picăturile de antiser de pe lamă și se clătesc lamele cu atenție cu un tampon IF. Se spală timp de cinci minute în soluție tampon IF - Tween și apoi cinci minute în tampon IF (apendicele 3). Excesul de umezeală se îndepărtează cu grijă. 2.3.4
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Volumul antiserului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul extractului aplicat. 2.3.2. Se incubează acoperit timp de 30 de minute la temperatura camerei. 2.3.3. Se scutură picăturile de antiser de pe lamă și se clătesc lamele cu atenție cu un tampon IF. Se spală timp de cinci minute în soluție tampon IF - Tween și apoi cinci minute în tampon IF (apendicele 3). Excesul de umezeală se îndepărtează cu grijă. 2.3.4. Se aranjează lamele pe
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
clătesc lamele cu atenție cu un tampon IF. Se spală timp de cinci minute în soluție tampon IF - Tween și apoi cinci minute în tampon IF (apendicele 3). Excesul de umezeală se îndepărtează cu grijă. 2.3.4. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă. Se acoperă ferestrele de test și fereastra FITC cu diluția conjugatului FITC utilizat pentru determinarea titrului. Volumul conjugatului aplicat în ferestre trebuie să fie echivalent cu volumul antiserului aplicat. 2.3.5. Se incubează acoperit timp de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Se îndepărtează cu grijă excesul de umezeală. 2.3.7. Se pipetează 5 - 10 μl glicerol tamponat fosfatic 0,1 M (apendicele 3) sau un suport similar în fiecare fereastră și se acoperă. 2.4. Citirea testului IF Se examinează lamele de test la un microscop cu epifluorescență cu filtre compatibile excitării FITC sub imersiune în ulei la o mărire de 500 - 1000. Se examinează ferestrele de pe două diametre în unghi drept și de-a lungul perimetrului. Se verifică mai întâi
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de test la un microscop cu epifluorescență cu filtre compatibile excitării FITC sub imersiune în ulei la o mărire de 500 - 1000. Se examinează ferestrele de pe două diametre în unghi drept și de-a lungul perimetrului. Se verifică mai întâi lama de control pozitiv. Celulele trebuie să fie intens fluorescente și colorate complet. Notă: Testul trebuie repetat dacă apare o colorație anormală. Se citesc lamele de test. Se observă mai întâi absența celulelor fluorescente în ferestrele de control FITC. Celulele fluorescente
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
ferestrele de pe două diametre în unghi drept și de-a lungul perimetrului. Se verifică mai întâi lama de control pozitiv. Celulele trebuie să fie intens fluorescente și colorate complet. Notă: Testul trebuie repetat dacă apare o colorație anormală. Se citesc lamele de test. Se observă mai întâi absența celulelor fluorescente în ferestrele de control FITC. Celulele fluorescente din controlul FITC indică legături nespecifice ale conjugatului, autofluorescență sau contaminare. Notă: Dacă se observă acestea, testul trebuie repetat. Se observă celulele intens fluorescente
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Apă distilată 1 litru Se dizolvă ingredientele și se verifică pH-ul. Se divizează în părți alicote după cum se consideră necesar. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 °C timp de 15 minute. Tampon IF-Tween Acest tampon este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1% Tween 20 la tamponul IF. 0,1 M glicerol tamponat fosfatic pH 7,6 Acest tampon este utilizat ca fluid de suport la ferestrele lamei IF pentru mărirea fluorescenței. Na2HPO4.·12H2O 3,2 g NaH2PO4·2H2O
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de 15 minute. Tampon IF-Tween Acest tampon este utilizat pentru spălarea lamelor. Se adaugă 0,1% Tween 20 la tamponul IF. 0,1 M glicerol tamponat fosfatic pH 7,6 Acest tampon este utilizat ca fluid de suport la ferestrele lamei IF pentru mărirea fluorescenței. Na2HPO4.·12H2O 3,2 g NaH2PO4·2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml Apendicele 4 Determinarea nivelului de contaminare în testul IF Suprafața (S) a ferestrei lamei multipuț (1) unde D este
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
fluid de suport la ferestrele lamei IF pentru mărirea fluorescenței. Na2HPO4.·12H2O 3,2 g NaH2PO4·2H2O 0,15 g Glicerol 50 ml Apă distilată 100 ml Apendicele 4 Determinarea nivelului de contaminare în testul IF Suprafața (S) a ferestrei lamei multipuț (1) unde D este diametrul ferestrei Suprafața (s) a câmpului obiectivului (2) Unde d este diametrul câmpului Se calculează d fie prin măsurare directă sau din următoarele formule: (3) unde i = coeficientul de câmp (depinde de tipul ocularului și
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
o parte din acesta (din care au fost luate eșantioanele) în ambalajul original etichetat, de câte ori este posibil, - partea rămasă din eșantioane, de câte ori este posibil, - orice rest de extras și material preparat suplimentar pentru testul sau testele de triere, de exemplu lamele de imunofluorescență, și - toată documentația relevantă, până la finalizarea respectivei metode. 2. În cazul confirmării organismului, ar trebui să se păstreze să și conserve în condiții corespunzătoare: - materialul prevăzut în alin. (1), și - un eșantion din tomata sau vânăta infectată inoculată
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
aliat Fabricare din semifabricate de la poziția nr. 7224 ex 7301 Palplanșe Fabricare din materiale de la poziția nr 7206 7302 Material pentru construirea de cale ferată sau cale rulare tramvai din fier sau oțel, următoarele: șine, contrașine și șine cu cremalieră, lame de macaz, inimi de schimbător de cale, ace de macaz și alte piese de macaz, traverse din lemn (traverse), eclise de joantă, saboți de șina, saboți de șină sub formă de pană, plăci sub șină (plăci de bază), bride de
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
pentru forare în piatră sau săpare în pământ) Fabricare în care: - toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție decât cea a produsului și - valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului 8208 Cuțite și lame de tăiat pentru utilaje și dispozitive mecanice Fabricare în care: - toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție decât ce a produsului și - valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului ex 8211 Cuțite cu
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
de tăiat pentru utilaje și dispozitive mecanice Fabricare în care: - toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție decât ce a produsului și - valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului ex 8211 Cuțite cu lame de tăiat, dințate sau nu (inclusiv cosoare) altele decât cuțitele de la poziția tarifară nr. 8208 Fabricare în care toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție decât cea a produsului. Totuși, lamele și mânerele de cuțit din metal comun pot
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
de uzină al produsului ex 8211 Cuțite cu lame de tăiat, dințate sau nu (inclusiv cosoare) altele decât cuțitele de la poziția tarifară nr. 8208 Fabricare în care toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție decât cea a produsului. Totuși, lamele și mânerele de cuțit din metal comun pot fi folosite. 8214 Alte articole de tăiat (de exemplu, mașini de tuns, satâre de măcelărie sau de bucătărie, cuțite pentru mașini de tocat și mărunțit, cuțite pentru hârtie); seturi și instrumente de
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
prețul de uzină al produsului și - în care, în limita precizată mai sus, materialele încadrate în aceeași poziție tarifară cu produsul sunt folosite numai până la o valoare de 5% din prețul de uzină al produsului 8429 Buldozere autopropulsate, buldozere cu lamă orientabilă, gredere, nivelatoare, screpere, lopeți mecanice, excavatoare, încărcătoare, utilaje de compactare și rulouri compresoare pentru drumuri - Rulouri compresoare - Altele Fabricare în care valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului Fabricare: - în care valoarea tuturor
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
forme primare de la poziția tarifară nr. 7224 ex 7301 Palplanșe Fabricare din materialele de la poziția tarifară nr 7206 7302 Material pentru construirea de cale ferată sau cale rulare tramvai din fier sau oțel, următoarele: șine, contrașine și șine cu cremalieră, lame de macaz, inimi de schimbător de cale, ace de macaz și alte piese de macaz, traverse din lemn (traverse), eclise de joantă, saboți de șina, saboți de șină sub formă de pană, plăci sub șină (plăci de bază), bride de
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
unelte pentru forare în piatră sau săpare în pământ) Fabricare în care: - toate materialele folosite sunt încadrate în altă poziție tarifară decât produsul și - valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului 8208 Cuțite și lame de tăiat pentru utilaje și dispozitive mecanice Fabricare în care: - toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție tarifară decât produsul și - valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului ex 8211 Cuțite cu lame
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
lame de tăiat pentru utilaje și dispozitive mecanice Fabricare în care: - toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție tarifară decât produsul și - valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului ex 8211 Cuțite cu lame de tăiat, dințate sau nu (inclusiv cosoare) altele decât cuțitele de la poziția tarifară nr. 8208 Fabricare în care toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție tarifară decât produsul. Totuși, lamele și mânerele de cuțit din metal comun pot fi
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
prețul de uzină al produsului ex 8211 Cuțite cu lame de tăiat, dințate sau nu (inclusiv cosoare) altele decât cuțitele de la poziția tarifară nr. 8208 Fabricare în care toate materialele folosite sunt încadrate la altă poziție tarifară decât produsul. Totuși, lamele și mânerele de cuțit din metal comun pot fi folosite. 8214 Alte articole de tăiat (de exemplu, mașini de tuns, satâre de măcelărie sau de bucătărie, cuțite pentru mașini de tocat și mărunțit, cuțite pentru hârtie); seturi și instrumente de
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
din prețul de uzină al produsului și - în care, în limita precizată mai sus, materialele încadrate în poziția tarifară nr. 8431 sunt folosite numai până la o valoare de 5% din prețul de uzină al produsului 8429 Buldozere autopropulsate, buldozere cu lamă orientabilă, gredere, utilaje de nivelare, mașină de încărcat cu bene, excavatoare, încărcătoare, utilaje de compactare și rulouri compresoare pentru drumuri - Rulouri compresoare - Altele Fabricare în care valoarea tuturor materialelor folosite nu depășește 40% din prețul de uzină al produsului Fabricare
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]
-
forme primare de la poziția tarifară nr. 7224 ex 7301 Palplanșe Fabricare din materialele de la poziția tarifară nr 7206 7302 Material pentru construirea de cale ferată sau cale rulare tramvai din fier sau oțel, următoarele: șine, contrașine și șine cu cremalieră, lame de macaz, inimi de schimbător de cale, ace de macaz și alte piese de macaz, traverse din lemn (traverse), eclise de joantă, saboți de șina, saboți de șină sub formă de pană, plăci sub șină (plăci de bază), bride de
jrc3370as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88528_a_89315]