614 matches
-
mastocitare, extrem de bine reprezentată în venele varicoase, permite formularea unei ipoteze patogenice pentru boala varicoasă, în contextul proprietăților funcționale ale acestor celule, datorate conținutului granular - care ar putea dezvolta capacitate autoimună, explicând astfel predispoziția individuală a unor subiecți pentru boala varicoasă. 7.8. EVALUAREA POPULAȚIEI LIMFOCITARE 7.8.1. REPERE FUNDAMENTALE În fiziopatologia încă neelucidată a bolii venoase cronice, prezența constantă a modificărilor inflamatorii a determinat concentrarea specialiștilor interesați de acest subiect asupra investigării procesului inflamator, ca și cauză patogenică majoră
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
a peretelui venos și a valvelor, cu rezultat în distrugerea peretelui și incompetență valvulară (Langer, Chavakis, 2009). Deși infiltratul inflamator conține și numeroase limfocite, despre evaluarea lor morfologică (ca și subtipuri celulare) și în relație cu funcționalitatea acestora, în boala varicoasă, există extrem de puține date în fluxul principal de publicații (Sayer, Smith, 2004). Recent, rezultatele unui studiu bazat pe determinarea subtipurilor limfocitare B și T prin flowcitometrie au condus la ipoteza conform căreia modificările cantitative limfocitare asociate cu boala varicoasă sunt
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
boala varicoasă, există extrem de puține date în fluxul principal de publicații (Sayer, Smith, 2004). Recent, rezultatele unui studiu bazat pe determinarea subtipurilor limfocitare B și T prin flowcitometrie au condus la ipoteza conform căreia modificările cantitative limfocitare asociate cu boala varicoasă sunt expresia memoriei imunologice a limfocitelor (Ojdana et al., 2009). Pornind de la absența datelor din literatură referitoare la populațiile limfocitare prezente în venele varicoase, obicetivul urmărit a fost reprezentat de investigarea limfocitelor T4 helper și T8 supresor la nivelul venei
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și T prin flowcitometrie au condus la ipoteza conform căreia modificările cantitative limfocitare asociate cu boala varicoasă sunt expresia memoriei imunologice a limfocitelor (Ojdana et al., 2009). Pornind de la absența datelor din literatură referitoare la populațiile limfocitare prezente în venele varicoase, obicetivul urmărit a fost reprezentat de investigarea limfocitelor T4 helper și T8 supresor la nivelul venei safene interne corespondente varicelor simple (stadiul CEAP 2-3) și, respectiv, complicate (stadiul CEAP 4-6), pentru a stabili un profil al expresiei subtipurilor limfocitare T
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
nivelul venei safene interne corespondente varicelor simple (stadiul CEAP 2-3) și, respectiv, complicate (stadiul CEAP 4-6), pentru a stabili un profil al expresiei subtipurilor limfocitare T și dacă există o corespondență între acestea și severitatea, respectiv progresia leziunilor specifice bolii varicoase. 7.8.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Evaluarea calitativă a urmărit stabilirea localizării preferențiale a limfocitelor T4 și T8, în peretele venelor varicoase. Evaluarea cantitativă a fost realizată prin numărarea celulelor pozitive imunohistochimic pentru anticorpii anti-CD4, respectiv anti-CD8, prezente în peretele
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
expresiei subtipurilor limfocitare T și dacă există o corespondență între acestea și severitatea, respectiv progresia leziunilor specifice bolii varicoase. 7.8.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Evaluarea calitativă a urmărit stabilirea localizării preferențiale a limfocitelor T4 și T8, în peretele venelor varicoase. Evaluarea cantitativă a fost realizată prin numărarea celulelor pozitive imunohistochimic pentru anticorpii anti-CD4, respectiv anti-CD8, prezente în peretele venelor varicoase, preluând și adaptând o metodologie de cuantificare utilizată în analiza biomarkerilor prognostici specifici patologiei tumorale, inclusiv limfocitelor T asociate proliferărilor
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
8.2. PARTICULARITĂȚI ALE METODEI Evaluarea calitativă a urmărit stabilirea localizării preferențiale a limfocitelor T4 și T8, în peretele venelor varicoase. Evaluarea cantitativă a fost realizată prin numărarea celulelor pozitive imunohistochimic pentru anticorpii anti-CD4, respectiv anti-CD8, prezente în peretele venelor varicoase, preluând și adaptând o metodologie de cuantificare utilizată în analiza biomarkerilor prognostici specifici patologiei tumorale, inclusiv limfocitelor T asociate proliferărilor tumorale (Zlobec et al., 2007a). Valoarea medie raportată pentru fiecare caz a rezultat ca urmare a cuantificării celulelor marcate imunohistochimic
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
al., 2007a). Valoarea medie raportată pentru fiecare caz a rezultat ca urmare a cuantificării celulelor marcate imunohistochimic prezente în 5 câmpuri microscopice, la magnificație x 200. 7.8.3. REZULTATE 7.8.3.1. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE T ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2 3 Examenul calitativ a evidențiat prezența limfocitelor T4 și T8 la nivelul tunicii medii, cu localizare difuză în interiorul componentei colagenice care separă celulele musculare netede. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 8 cazuri analizate
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
colagenice care separă celulele musculare netede. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 8 cazuri analizate, o valoare medie de 25,67 limfocite T4, și 10,60 limfocite T8 (tabel 55). 7.8.3.2. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 4-6 Examenul calitativ a evidențiat aceeași distribuție a limfocitelor ca și varicele simple, și anume dispersate în interiorul cadrului colagenic prezent în tunica medie. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 5 cazuri analizate, o valoare medie
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
de 42,80 limfocite T4 și, respectiv, 18,56 limfocite T8 (tabelul 56). Analiza statistică a demonstrat diferențe semnificative statistice între limfocitele T4 și, respectiv, T8, în cadrul sublotului 2 (fig. 178). 7.8.3.3. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE VERSUS VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 2-3 VERSUS STADIUL CEAP 4-6 Analiza statistică a numărului mediu de limfocite T4, comparativ sublot 1 versus sublot 2, a relevat prezența de diferențe semnificative statistic (p = 0,0005) (fig. 179). Analiza statistică
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fig. 179). Analiza statistică a numărului mediu de limfocite T8, comparativ sublot 1 versus sublot 2, a relevat prezența de diferențe semnificative statistic (p = 0,03) (fig. 180). Imaginile următoare ilustrează prezența limfocitelor T4 și, respectiv, T8, la nivelul peretelui varicos (fig. 180-183). Fig. 180. Reacție imunohistochimică intens pozitivă evidențiind prezența limfocitelor T4 (IHC, Ac-CD4, x 20) Fig. 181. Reacție imunohistochimică intens pozitivă evidențiind prezența limfocitelor T8 (IHC, Ac CD8, x 20) 7.8.4. DISCUȚII Teoria inflamatorie câștigă teren în
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
cu memorie (Kalia et al., 2006). Trebuie însă subliniat faptul că numărul studiilor dedicate acestui subiect este foarte mic, iar metodologia de investigare se bazează în principal pe analiza populațiilor celulare în sângele periferic și în sângele recoltat din venele varicoase (Schmid Schonbein et al., 2001, Ojdana et al., 2009), existând, după cunoștința noastră, un singur raport care include date obținute printr-o analiză morfologică imunohistochimică (Sayer, Smith, 2004). Rezultatele pot fi interpretate în contextul răspunsului imun-inflamator existent la nivelul întregului
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
în contextul răspunsului imun-inflamator existent la nivelul întregului organism, și care include și afectarea teritoriul venos. Astfel, un studiu foarte recent (Ojdana et al., 2009) demonstrează că în sângele periferic nu există o diferență semnificativă statistic între pacienții cu boală varicoasă și martor, în ceea ce privește numărul total de limfocite T CD4+ și CD8+, precum și subseturile particulare de limfocite T cu memorie. În timp, se constată o diferența semnificativă statistic între sângele periferic și sângele obținut de la nivelul venelor varicoase, pentru toate seturile
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
pacienții cu boală varicoasă și martor, în ceea ce privește numărul total de limfocite T CD4+ și CD8+, precum și subseturile particulare de limfocite T cu memorie. În timp, se constată o diferența semnificativă statistic între sângele periferic și sângele obținut de la nivelul venelor varicoase, pentru toate seturile și subseturile de celule T menționate anterior. Aceste rezultate au importante implicații în elucidarea statusului inflamator local și deschid perspectiva implicării celulelor T cu memorie imunologică în patogeneza bolii venoase cronice. Aceste date se corelează cu două
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
date se corelează cu două studii axate asupra morfologiei infiltratului inflamator (preponderent limfocitar) din valvulele venoase și din peretele venos (SchmidSchonbein et al., 2001, Sayer, Smith, 2004). Studiul nostru se individualizează în cadrul cercetărilor asupra infiltratului imun prezent în structura peretelui varicos prin două elemente: (i) evaluarea distinctă a limfocitelor T4 helper și T8 citotoxic; (ii) compararea rezultatelor cantitative (valoare medie limfocite T4, respectiv T8), corespondente venelor varicoase simple (stadiul CEAP 2-3) și venelor varicoase complicate (stadiul CEAP 4-6). Atragem atenția asupra
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
2004). Studiul nostru se individualizează în cadrul cercetărilor asupra infiltratului imun prezent în structura peretelui varicos prin două elemente: (i) evaluarea distinctă a limfocitelor T4 helper și T8 citotoxic; (ii) compararea rezultatelor cantitative (valoare medie limfocite T4, respectiv T8), corespondente venelor varicoase simple (stadiul CEAP 2-3) și venelor varicoase complicate (stadiul CEAP 4-6). Atragem atenția asupra faptului că, deși modalitatea de cuantificare a fost diferită, valorile obținute sunt relativ comparabile cu singurele raportări numerice prezente din literatură (valoare medie 49 limfocite T
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
asupra infiltratului imun prezent în structura peretelui varicos prin două elemente: (i) evaluarea distinctă a limfocitelor T4 helper și T8 citotoxic; (ii) compararea rezultatelor cantitative (valoare medie limfocite T4, respectiv T8), corespondente venelor varicoase simple (stadiul CEAP 2-3) și venelor varicoase complicate (stadiul CEAP 4-6). Atragem atenția asupra faptului că, deși modalitatea de cuantificare a fost diferită, valorile obținute sunt relativ comparabile cu singurele raportări numerice prezente din literatură (valoare medie 49 limfocite T/5,5 mm2 în venele varicoase, cu
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
venelor varicoase complicate (stadiul CEAP 4-6). Atragem atenția asupra faptului că, deși modalitatea de cuantificare a fost diferită, valorile obținute sunt relativ comparabile cu singurele raportări numerice prezente din literatură (valoare medie 49 limfocite T/5,5 mm2 în venele varicoase, cu varianții între minim 30 și maxim 67 (Sayer, Smith, 2004)). În acest context, diferențele semnificative statistic între limfocitele T4 și, respectiv, T8, în cadrul fiecărui sublot în parte, precum și între limfocitele T4, respectiv T8, în comparația sublot 1 versus sublot
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
ar putea exista o relație directă, dependentă de un anumit prag numeric, cu evoluția leziunilor morfologice identificabile în componentele tisulare ale structurii venoase. Capitolul 8 STUDIU MORFOLOGIC ULTRATRUCTURAL AL SISTEMULUI VENOS SUPERFICIAL 8.1. INTRODUCERE Cercetarea substratului morfologic al bolii varicoase a beneficiat, în mod indubitabil, de posibilitatea penetrării la nivel ultrastructural, prin investigarea electrono microscopică. Din această perspectivă, începând cu anii 80, câteva grupuri de interes s-au focalizat asupra identificării leziunilor prezente la nivelul peretelui venos, în tentativa de
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
anii 80, câteva grupuri de interes s-au focalizat asupra identificării leziunilor prezente la nivelul peretelui venos, în tentativa de a putea înțelege și, implicit, de a putea explica mecanismul patogenic intrinsec care determină transformările celulare și tisulare specifice bolii varicoase. Sunt puține studii dedicate acestui subiect, iar construcția lor este diferită - deoarece abordează componentele celor trei tunici care realizează structura peretelui venos (intima, media, adventicea) fie individual, fie în ansamblu. În acest context, am considerat oportun să sintetizăm, ca punct
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
adventicea) fie individual, fie în ansamblu. În acest context, am considerat oportun să sintetizăm, ca punct de plecare, datele referitoare la caracteristicile endoteliului, ale matricei extracelulare fibrilare (colagen, elastină) și nefibrilare și ale celulelor musculare netede. La nivelul intimei venelor varicoase, comparativ cu cele normale, sunt identificate următoarele modificări: (i) plierea, invaginarea, fragmentarea și detașarea endoteliului, dezintegrarea țesutului conjunctiv subendotelial și a laminei elastice interne creșterea numărului faldurilor intimale, în paralel cu creșterea diametrului lumenului, determinând creșterea ariei de secțiune (Wali
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
coeziv (Bouissou et al., 1988, Goldman, Froneck, 1989, Wali, Eid, 2001). Din trecerea în revistă a datelor neomogene prezente în fluxul principal de publicații rezultă că nu există încă un tablou ultrastructural definit, unanim acceptat care să susțină patogenia bolii varicoase. Din acest motiv, informațiile neconcordante legate de creșteri, scăderi sau inexistența modificărilor componentelor individuale trebuie tratate cu precauție, fiind recomandată, întotdeauna, o raportare la structura ansamblului, printr-o evaluare calitativă și cantitativă globală (Travers et al., 1996, Wali, Eid, 2001
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fiind recomandată, întotdeauna, o raportare la structura ansamblului, printr-o evaluare calitativă și cantitativă globală (Travers et al., 1996, Wali, Eid, 2001, Wali, Eid, 2002). În acest context, obiectivul prezentului studiu a fost reprezentat de analiza modificărilor ultrastructurale din venele varicoase, investigarea noastră fiind concentrată asupra componentelor structurale endoteliale, colagenice, elastice și musculare, în scopul de a contribui la caracterizarea leziunilor prezente la nivelul intimei, mediei și adventicei venoase. 8.2. MATERIAL ȘI METODĂ Materialul a fost reprezentat de 8 fragmente
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
endoteliale, colagenice, elastice și musculare, în scopul de a contribui la caracterizarea leziunilor prezente la nivelul intimei, mediei și adventicei venoase. 8.2. MATERIAL ȘI METODĂ Materialul a fost reprezentat de 8 fragmente de venă safenă internă, prelevate din teritoriul varicos - în 4 cazuri de la vene simple (cazurile 1-4, stadiul CEAP 2-3), în celelalte 4 cazuri de la vene complicate (cazurile 5-8, stadiul CEAP 4-6), 1 caz prezentând tromboză vasculară. Studiul de microscopie electronică a fost realizat în Laboratorul de Patologie Ultrastructurală
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
asamblarea regulată, în fascicule de fibre paralele. Atât în medie, cât și în intimă, au fost identificate numeroase vase de tip arteriolar, prezența acestora fiind asociată unor zone de hemoragie intramurală. 8.4. DISCUȚII Tabloul histopatologic al leziunilor caracteristice bolii varicoase este completat printro gamă largă de modificări ultrastructurale care pot fi corelate cu mecanismul patogenic responsabil de slăbirea peretelui venos. Este extrem de dificil de stabilit o secvență exactă a apariției leziunilor, cu atât mai mult a celor instalate la nivel
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]