6,336 matches
-
de control spre cavitatea antigenului virusului leucozei bovine fără să formeze o curbă de precipitare vizibilă cu antigenul sau ii) dacă nu este posibilă interpretarea pozitivă sau negativă. Pentru reacțiile neconcludente, se poate repeta proba și se poate utiliza un ser concentrat. 10. Pot fi utilizate orice altă configurație sau orice altă dispunere a cavităților, cu condiția ca serul E4 diluat la 1/10 cu un ser negativ să poată fi identificat ca fiind pozitiv. B. Metodă de standardizare a antigenului
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
sau ii) dacă nu este posibilă interpretarea pozitivă sau negativă. Pentru reacțiile neconcludente, se poate repeta proba și se poate utiliza un ser concentrat. 10. Pot fi utilizate orice altă configurație sau orice altă dispunere a cavităților, cu condiția ca serul E4 diluat la 1/10 cu un ser negativ să poată fi identificat ca fiind pozitiv. B. Metodă de standardizare a antigenului Soluții și materiale necesare 1. 40 mililitri de geloză 1,6% într-un tampon Tris 0,05 M
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
sau negativă. Pentru reacțiile neconcludente, se poate repeta proba și se poate utiliza un ser concentrat. 10. Pot fi utilizate orice altă configurație sau orice altă dispunere a cavităților, cu condiția ca serul E4 diluat la 1/10 cu un ser negativ să poată fi identificat ca fiind pozitiv. B. Metodă de standardizare a antigenului Soluții și materiale necesare 1. 40 mililitri de geloză 1,6% într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
fi identificat ca fiind pozitiv. B. Metodă de standardizare a antigenului Soluții și materiale necesare 1. 40 mililitri de geloză 1,6% într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 2. 15 mililitri ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru glicoproteinele virusului leucozei bovine, ser diluat la 1/10 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 3. 15 mililitri de ser de
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
1. 40 mililitri de geloză 1,6% într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 2. 15 mililitri ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru glicoproteinele virusului leucozei bovine, ser diluat la 1/10 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 3. 15 mililitri de ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru glicoproteinele virusului leucozei bovine, ser diluat
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
mililitri ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru glicoproteinele virusului leucozei bovine, ser diluat la 1/10 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 3. 15 mililitri de ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru glicoproteinele virusului leucozei bovine, ser diluat la 1/15 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 4. patru cutii Petri din material
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
bovine, ser diluat la 1/10 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 3. 15 mililitri de ser de leucoză bovină care nu are alți anticorpi decât pentru glicoproteinele virusului leucozei bovine, ser diluat la 1/15 într-un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 cu 8,5% NaCl; 4. patru cutii Petri din material plastic, cu un diametru de 85 milimetri; 5. un poanson cu diametrul de 4-6 milimetri
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
o baie de apă caldă (56oC). Mod de lucru Se dizolvă geloza (1,6%) în soluția tampon Tris/HCl încălzind cu grijă până la 100oC. Se utilizează baia de apă la 56oC timp de aproximativ o oră. Se adaugă soluțiile de ser de leucoză bovină în baia de apă la 56oC. Se amestecă apoi 15 mililitri din soluția de geloză la 56oC cu 15 mililitri de ser de leucoză bovină (1:10), se agită rapid și se varsă în două cutii Petri
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
utilizează baia de apă la 56oC timp de aproximativ o oră. Se adaugă soluțiile de ser de leucoză bovină în baia de apă la 56oC. Se amestecă apoi 15 mililitri din soluția de geloză la 56oC cu 15 mililitri de ser de leucoză bovină (1:10), se agită rapid și se varsă în două cutii Petri, câte 15 mililitri pe cutie. Se reîncep operațiunile descrise anterior cu serul leucozei bovine diluat la 1/5. Când geloza s-a întărit se fac
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
apoi 15 mililitri din soluția de geloză la 56oC cu 15 mililitri de ser de leucoză bovină (1:10), se agită rapid și se varsă în două cutii Petri, câte 15 mililitri pe cutie. Se reîncep operațiunile descrise anterior cu serul leucozei bovine diluat la 1/5. Când geloza s-a întărit se fac găurile în felul următor: Adăugare de antigeni i) Cutiile Petri nr. 1 și 3: cavitatea A = antigen de referință nediluat, cavitatea B = antigen de referință diluat la
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
antigen care trebuie testat diluat la 1/2, cavitatea C = antigen care trebuie testat diluate la 1/4, cavitatea D = antigen care trebuie testat diluat la 1/8. Instrucțiuni complementare 1. Experimentul trebuie efectuat cu două grade de diluție a serului (1:5 și 1:10) pentru a obține precipitarea optimă. 2. Dacă diametrul de precipitare este prea mic pentru fiecare din cele două grade de diluție, serul va face obiectul unei diluții suplimentare. 3. Dacă diametrul de precipitare este prea
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
8. Instrucțiuni complementare 1. Experimentul trebuie efectuat cu două grade de diluție a serului (1:5 și 1:10) pentru a obține precipitarea optimă. 2. Dacă diametrul de precipitare este prea mic pentru fiecare din cele două grade de diluție, serul va face obiectul unei diluții suplimentare. 3. Dacă diametrul de precipitare este prea mare pentru cele două grade de diluție și dacă precipitatul dispare, trebuie ales un grad de diluție mai scăzut pentru ser. 4. Concentrația finală a gelozei trebuie
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
din cele două grade de diluție, serul va face obiectul unei diluții suplimentare. 3. Dacă diametrul de precipitare este prea mare pentru cele două grade de diluție și dacă precipitatul dispare, trebuie ales un grad de diluție mai scăzut pentru ser. 4. Concentrația finală a gelozei trebuie să fie de 0,8%, iar cea a serului de 5%, respectiv 10%. 5. Se notează diametrele măsurate în sistemul de coordonate următor. Diluția de lucru este cea în care se înregistrează același diametru
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
diametrul de precipitare este prea mare pentru cele două grade de diluție și dacă precipitatul dispare, trebuie ales un grad de diluție mai scăzut pentru ser. 4. Concentrația finală a gelozei trebuie să fie de 0,8%, iar cea a serului de 5%, respectiv 10%. 5. Se notează diametrele măsurate în sistemul de coordonate următor. Diluția de lucru este cea în care se înregistrează același diametru pentru antigenul care trebuie testat și pentru antigenul de referință. C. Teste de imunoadsorbție cu
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
de obturare, dacă este necesar; h) soluții pentru diluarea eșantionului examinat, prepararea reactivilor și spălare; i) un sistem de citire corespunzător substratului utilizat. 2. Standardizarea și sensibilitatea testului Sensibilitatea testului ELISA trebuie să fie la un astfel de nivel încât serul E4 să prezinte o reacție pozitivă când este diluat de 10 ori (eșantioane de ser) sau de 250 de ori (eșantioane de lapte) mai mult decât diluția obținută de la eșantioane puse în comun. La testele în care probele (seruri și
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
i) un sistem de citire corespunzător substratului utilizat. 2. Standardizarea și sensibilitatea testului Sensibilitatea testului ELISA trebuie să fie la un astfel de nivel încât serul E4 să prezinte o reacție pozitivă când este diluat de 10 ori (eșantioane de ser) sau de 250 de ori (eșantioane de lapte) mai mult decât diluția obținută de la eșantioane puse în comun. La testele în care probele (seruri și lapte) sunt examinate individual, serul E4 diluat la 1:10 (ser negativ) sau la 1
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
încât serul E4 să prezinte o reacție pozitivă când este diluat de 10 ori (eșantioane de ser) sau de 250 de ori (eșantioane de lapte) mai mult decât diluția obținută de la eșantioane puse în comun. La testele în care probele (seruri și lapte) sunt examinate individual, serul E4 diluat la 1:10 (ser negativ) sau la 1:250 (lapte negativ) trebuie să prezinte o reacție pozitivă când este examinat în aceeași diluție de testare ca cea utilizată pentru testele individuale. Institutele
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
reacție pozitivă când este diluat de 10 ori (eșantioane de ser) sau de 250 de ori (eșantioane de lapte) mai mult decât diluția obținută de la eșantioane puse în comun. La testele în care probele (seruri și lapte) sunt examinate individual, serul E4 diluat la 1:10 (ser negativ) sau la 1:250 (lapte negativ) trebuie să prezinte o reacție pozitivă când este examinat în aceeași diluție de testare ca cea utilizată pentru testele individuale. Institutele oficiale indicate la pct. A.2
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
10 ori (eșantioane de ser) sau de 250 de ori (eșantioane de lapte) mai mult decât diluția obținută de la eșantioane puse în comun. La testele în care probele (seruri și lapte) sunt examinate individual, serul E4 diluat la 1:10 (ser negativ) sau la 1:250 (lapte negativ) trebuie să prezinte o reacție pozitivă când este examinat în aceeași diluție de testare ca cea utilizată pentru testele individuale. Institutele oficiale indicate la pct. A.2. vor fi responsabile de controlul calității
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
utilizată pentru testele individuale. Institutele oficiale indicate la pct. A.2. vor fi responsabile de controlul calității metodei ELISA, în special pentru a determina, pentru fiecare lot de producție, numărul de eșantioane de pus în comun în funcție de titrul obținut pentru serul E4. Serul E4 va fi furnizat de laboratorul veterinar național din Copenhaga 3. Condiții de utilizare a testului ELISA pentru studiul LBE Metoda ELISA poate fi utilizată pentru un eșantion de lapte sau de zer provenind dintr-o exploatație care
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
testele individuale. Institutele oficiale indicate la pct. A.2. vor fi responsabile de controlul calității metodei ELISA, în special pentru a determina, pentru fiecare lot de producție, numărul de eșantioane de pus în comun în funcție de titrul obținut pentru serul E4. Serul E4 va fi furnizat de laboratorul veterinar național din Copenhaga 3. Condiții de utilizare a testului ELISA pentru studiul LBE Metoda ELISA poate fi utilizată pentru un eșantion de lapte sau de zer provenind dintr-o exploatație care cuprinde cel
jrc3321as1997 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88478_a_89265]
-
2. Procedura (a) O cantitate de 0, 025 ml PBS se așează în mod egal în toate godeurile unei plăci de microtitrare din plastic (cu godeuri care au fundul în formă de V) (b) Se așează 0, 025 ml de ser în primul godeu al plăcii. (c) Se utilizează diluator de microtitrare pentru a se efectua o diluare dublă a serului pe suprafața plăcii. (d) Se adaugă 0, 025 ml de fluid alantoamniotic diluat care conține 4 sau 8 HAU. (e
jrc2401as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87555_a_88342]
-
de microtitrare din plastic (cu godeuri care au fundul în formă de V) (b) Se așează 0, 025 ml de ser în primul godeu al plăcii. (c) Se utilizează diluator de microtitrare pentru a se efectua o diluare dublă a serului pe suprafața plăcii. (d) Se adaugă 0, 025 ml de fluid alantoamniotic diluat care conține 4 sau 8 HAU. (e) Se amestecă prin lovire ușoară de masa de laborator și se așează placa la o temperatură de 4°C timp
jrc2401as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87555_a_88342]
-
opt unități de virus (este necesar să se includă în fiecare test o titrare HA pentru confirmarea prezenței HAU). (j) Valabilitatea rezultatelor depinde de obținerea unui titru mai mic de 2³ pentru patru HAU sau 2² pentru opt HAU cu serul martor negativ și un titru cuprins într-o singură diluție a titrului cunoscut al serului martor pozitiv. 3. Interpretarea testelor Antigenul utilizat va influența nivelul la care un ser este considerat pozitiv: - pentru patru HAU un ser pozitiv este orice
jrc2401as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87555_a_88342]
-
pentru confirmarea prezenței HAU). (j) Valabilitatea rezultatelor depinde de obținerea unui titru mai mic de 2³ pentru patru HAU sau 2² pentru opt HAU cu serul martor negativ și un titru cuprins într-o singură diluție a titrului cunoscut al serului martor pozitiv. 3. Interpretarea testelor Antigenul utilizat va influența nivelul la care un ser este considerat pozitiv: - pentru patru HAU un ser pozitiv este orice ser care prezintă un titru de 2² sau mai mare, pentru opt HAU un ser
jrc2401as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87555_a_88342]