5,630 matches
-
blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
sticlă. 4. Se centrifughează la 2.000 până la 3.000 rpm (pentru a desprinde celulele aglutinate). 5. Se înlătura supernatantul și se resuspendă celulele în aproximativ 30 ml de PBS ce conține 1% "Sarkosyl" și 2 ml florură de fenilmetilsulfonil (tampon de liza). Aceasta poate determina celulele să formeze un gel și poate fi adăugat mai mult tampon de liza pentru a reduce acest efect. (NB: florură de fenilmetilsulfonil este nociv (toxic) - a se manipula cu mare atenție). 6. Se distrug
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Se înlătura supernatantul și se resuspendă celulele în aproximativ 30 ml de PBS ce conține 1% "Sarkosyl" și 2 ml florură de fenilmetilsulfonil (tampon de liza). Aceasta poate determina celulele să formeze un gel și poate fi adăugat mai mult tampon de liza pentru a reduce acest efect. (NB: florură de fenilmetilsulfonil este nociv (toxic) - a se manipula cu mare atenție). 6. Se distrug celulele timp de 60 de secunde, utilizând un ultrasonator, la o amplitudine de 30 de microni. 7
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
secunde, utilizând un ultrasonator, la o amplitudine de 30 de microni. 7. Se centrifughează la 10.000 rpm timp de 10 minute. 8. Se păstrează supernatantul la +4°C și se resuspendă celulele rămase conglomerate (aglutinate) în 10-20 ml de tampon de liza. 9. Se ultrasonează și se clarifica, păstrând supernatantul pentru fiecare stadiu, în total de trei ori. 10. Se comasează supernatanții și se centrifughează la 24.000 rpm (100.000 g) timp de 120 minute la +4°C pe
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
antigen de referință internațional, se produce un ser standard național, standardizat pentru a obține o proporție optimă în raport cu serul de referință internațional, liofilizat și utilizat că ser martor cunoscut la fiecare test. Serul de testat Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon barbital sodic sau borat, pH 8,5% până la 9% este turnata într-o placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
antigen de referință internațional, se produce un ser standard național, standardizat pentru a obține o proporție optimă, în raport cu serul de referință internațional, liofilizat și utilizat că ser martor cunoscut la fiecare test. Serul de testat Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon barbitol sodic sau borat, pH 8,5% până la 9% este turnata într-o placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
citopatic (ECP). În cazul în care sunt negative, se fac pasaje oarbe ale culturii peste culturi noi și se reexaminează timp de 48 de ore. Specificitatea fiecărui efect citopatic trebuie să fie confirmată. Mediul de transport recomandat: 1. 0,08M tampon fosfat pH 7,2 conținând 0,01% albumina serica bovina, 0,002% roșu fenol și antibiotice. 2. Mediu pentru culturi celulare (exemplul MEM Eagle) cu pH 7,2, conținând 0,04 M tampon Hepes, 0,01% albumina serica bovina și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Mediul de transport recomandat: 1. 0,08M tampon fosfat pH 7,2 conținând 0,01% albumina serica bovina, 0,002% roșu fenol și antibiotice. 2. Mediu pentru culturi celulare (exemplul MEM Eagle) cu pH 7,2, conținând 0,04 M tampon Hepes, 0,01% albumina serica bovina și antibiotice. 3. Antibiotice (per mililitru final) trebuie să fie adăugate la mediul de transport, de exemplu penicilină 1.000 UI, neomicina sulfat 100 UI, polimixin B sulfat 50 UI, micostatin 100 UI. B.
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
sunt considerate negative. C. Determinarea și cuantificarea de anticorpi prin ELISA va fi efectuată în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: Antiserul de iepure în raport cu antigen 146S a șapte tipuri de virus al febrei aftoase (FMDV) utilizat la o concentrație optimă predeterminata în tampon carbonat/bicarbonat, pH 9,6. Antigenele sunt preparate din tulpini selectate de virus multiplicat pe monostraturi de celule BHK-21. Supernatantul nepurificat este utilizat și pretitrat în conformitate cu protocolul, dar fără adăugare de ser, pentru a da o diluție care după adăugarea
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
Antigenele sunt preparate din tulpini selectate de virus multiplicat pe monostraturi de celule BHK-21. Supernatantul nepurificat este utilizat și pretitrat în conformitate cu protocolul, dar fără adăugare de ser, pentru a da o diluție care după adăugarea unui volum egal de PBST (tampon fosfat salin conținând 0,05% Tween -20 și indicator roșu fenol) ce va da o densitate optică între 1,2 și 1,5. Virușii pot fi utilizați inactivați. PBST este utilizat că diluant. Antiserul de porc de Guineea este preparat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive. Materiale și reagenți: 1. Plăci corespunzătoare pentru microtitrare ELISA. 2. Antigen: furnizat că și concentrat de extract celular, preparat conform descrierii anterioare și stocat la -20°C sau -70°C. 3. Tampon de blocare: fosfat salin tamponat (PBS) conținând 0,3% ser bovin adult BTV negativ, 0,1% (v/v) Tween-20 (furnizat ca soluție monolaurat sorbitol polioxietilen) în PBS. 4. Anticorpi monoconali: 3-17-A3 (furnizat că supernatant cultură de țesut hibridom) împotriva grupului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
v) Tween-20 (furnizat ca soluție monolaurat sorbitol polioxietilen) în PBS. 4. Anticorpi monoconali: 3-17-A3 (furnizat că supernatant cultură de țesut hibridom) împotriva grupului specific polipeptid VP7, stocați la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
trei ori prin umplerea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă prin scuturare (lovire puternică a plăcii cu fața în jos pe o hârtie de filtru) pe hârtie de filtru. 3. Control godeuri: Se adaugă 100 μl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
pe hârtie de filtru. 3. Control godeuri: Se adaugă 100 μl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
sticlă. 4. Se centrifughează la 2.000 până la 3.000 rpm (pentru a desprinde celulele aglutinate). 5. Se înlătura supernatantul și se resuspendă celulele în aproximativ 30 ml de PBS ce conține 1% "Sarkosyl" și 2 ml florură de fenilmetilsulfonil (tampon de liza). Aceasta poate determina celulele să formeze un gel și poate fi adăugat mai mult tampon de liza pentru a reduce acest efect. (NB: florură de fenilmetilsulfonil este nociv (toxic) - a se manipula cu mare atenție). 6. Se distrug
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Se înlătura supernatantul și se resuspendă celulele în aproximativ 30 ml de PBS ce conține 1% "Sarkosyl" și 2 ml florură de fenilmetilsulfonil (tampon de liza). Aceasta poate determina celulele să formeze un gel și poate fi adăugat mai mult tampon de liza pentru a reduce acest efect. (NB: florură de fenilmetilsulfonil este nociv (toxic) - a se manipula cu mare atenție). 6. Se distrug celulele timp de 60 de secunde, utilizând un ultrasonator, la o amplitudine de 30 de microni. 7
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]