5,916 matches
-
serotipurile cunoscute de virus al bolii limbii albastre (BTV). Principiul testului este întreruperea reacției între antigenul bolii limbii albastre și un grup specific de anticorpi monoclonali (3-17-A3) prin adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive. Materiale și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive. Materiale și reagenți: 1. Plăci corespunzătoare pentru microtitrare ELISA. 2. Antigen: furnizat că și concentrat de extract celular, preparat conform descrierii anterioare și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
și reagenți: 1. Plăci corespunzătoare pentru microtitrare ELISA. 2. Antigen: furnizat că și concentrat de extract celular, preparat conform descrierii anterioare și stocat la -20°C sau -70°C. 3. Tampon de blocare: fosfat salin tamponat (PBS) conținând 0,3% ser bovin adult BTV negativ, 0,1% (v/v) Tween-20 (furnizat ca soluție monolaurat sorbitol polioxietilen) în PBS. 4. Anticorpi monoconali: 3-17-A3 (furnizat că supernatant cultură de țesut hibridom) împotriva grupului specific polipeptid VP7, stocați la -20°C sau liofilizați și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
pentru 473,4 ml de apă distilata. (Atenție - totdeauna se adaugă acid peste apă, niciodată apă peste acid). 8. Agitator orbital. 9. Placă ELISA de citire (testul se poate citi cu ochiul liber). Formă testului Cc: testare (control) conjugat (fără ser/fără anticorp monoclonal); C++: testare (control) ser intens pozitiv; C+: testare (control) ser slab pozitiv; C-: testare (control) ser negativ; Cm: testare (control) anticorpi monoclonali (fără ser). Godeurile 1A și 1B reprezintă un blank de control conținând antigen al bolii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
Atenție - totdeauna se adaugă acid peste apă, niciodată apă peste acid). 8. Agitator orbital. 9. Placă ELISA de citire (testul se poate citi cu ochiul liber). Formă testului Cc: testare (control) conjugat (fără ser/fără anticorp monoclonal); C++: testare (control) ser intens pozitiv; C+: testare (control) ser slab pozitiv; C-: testare (control) ser negativ; Cm: testare (control) anticorpi monoclonali (fără ser). Godeurile 1A și 1B reprezintă un blank de control conținând antigen al bolii limbii albastre și conjugat. Acesta poate fi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
apă, niciodată apă peste acid). 8. Agitator orbital. 9. Placă ELISA de citire (testul se poate citi cu ochiul liber). Formă testului Cc: testare (control) conjugat (fără ser/fără anticorp monoclonal); C++: testare (control) ser intens pozitiv; C+: testare (control) ser slab pozitiv; C-: testare (control) ser negativ; Cm: testare (control) anticorpi monoclonali (fără ser). Godeurile 1A și 1B reprezintă un blank de control conținând antigen al bolii limbii albastre și conjugat. Acesta poate fi utilizat că blank la cititorul ELISA
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
Agitator orbital. 9. Placă ELISA de citire (testul se poate citi cu ochiul liber). Formă testului Cc: testare (control) conjugat (fără ser/fără anticorp monoclonal); C++: testare (control) ser intens pozitiv; C+: testare (control) ser slab pozitiv; C-: testare (control) ser negativ; Cm: testare (control) anticorpi monoclonali (fără ser). Godeurile 1A și 1B reprezintă un blank de control conținând antigen al bolii limbii albastre și conjugat. Acesta poate fi utilizat că blank la cititorul ELISA. Control al Mab (Cm): Coloane 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
se poate citi cu ochiul liber). Formă testului Cc: testare (control) conjugat (fără ser/fără anticorp monoclonal); C++: testare (control) ser intens pozitiv; C+: testare (control) ser slab pozitiv; C-: testare (control) ser negativ; Cm: testare (control) anticorpi monoclonali (fără ser). Godeurile 1A și 1B reprezintă un blank de control conținând antigen al bolii limbii albastre și conjugat. Acesta poate fi utilizat că blank la cititorul ELISA. Control al Mab (Cm): Coloane 1 și 2, rândurile G și H reprezintă controlul
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
2, rândurile C-D-E-F. Aceste godeuri conțin antigen BTV, antiser BTV intens pozitiv și slab pozitiv și respectiv, Mab și conjugat. Control negativ (C-): Godeurile 2A și 2B sunt controale negative ce conțin antigen BTV, antiser BTV negativ, Mab și conjugat. Seruri test: Pentru examinări serologice pe scară largă și evidențiere rapidă, pot fi testate seruri la o singură diluție de 1:5 (apendice 1). În mod alternativ, 10 seruri pot fi testate peste o diluție cuprinsă între 1:5 și 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
pozitiv și respectiv, Mab și conjugat. Control negativ (C-): Godeurile 2A și 2B sunt controale negative ce conțin antigen BTV, antiser BTV negativ, Mab și conjugat. Seruri test: Pentru examinări serologice pe scară largă și evidențiere rapidă, pot fi testate seruri la o singură diluție de 1:5 (apendice 1). În mod alternativ, 10 seruri pot fi testate peste o diluție cuprinsă între 1:5 și 1:640 (apendice 2). Aceste godeuri oferă o indicație asupra titrului de anticorpi în serurile
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
controale negative ce conțin antigen BTV, antiser BTV negativ, Mab și conjugat. Seruri test: Pentru examinări serologice pe scară largă și evidențiere rapidă, pot fi testate seruri la o singură diluție de 1:5 (apendice 1). În mod alternativ, 10 seruri pot fi testate peste o diluție cuprinsă între 1:5 și 1:640 (apendice 2). Aceste godeuri oferă o indicație asupra titrului de anticorpi în serurile de testat. Procedura: 1. Se diluează antigen BTV în PBS la concentrație de pretitrare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
seruri la o singură diluție de 1:5 (apendice 1). În mod alternativ, 10 seruri pot fi testate peste o diluție cuprinsă între 1:5 și 1:640 (apendice 2). Aceste godeuri oferă o indicație asupra titrului de anticorpi în serurile de testat. Procedura: 1. Se diluează antigen BTV în PBS la concentrație de pretitrare, sonicat rapid pentru a dispersa virus agregat (dacă sonicatorul nu este disponibil se pipetează puternic) și se adaugă 50 μl pe toate godeurile plăcii ELISA. Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
se usucă prin scuturare (lovire puternică a plăcii cu fața în jos pe o hârtie de filtru) pe hârtie de filtru. 3. Control godeuri: Se adaugă 100 μl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
hârtie de filtru) pe hârtie de filtru. 3. Control godeuri: Se adaugă 100 μl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce nu conțin anticorpi față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă se examinează și se înregistrează vizual sau utilizând un cititor spectofotometric. Analize și rezultate: Utilizând pachetul software se tipăresc valorile DO (densităților optice) și procentajul de inhibiție (PI) pentru
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă se examinează și se înregistrează vizual sau utilizând un cititor spectofotometric. Analize și rezultate: Utilizând pachetul software se tipăresc valorile DO (densităților optice) și procentajul de inhibiție (PI) pentru testare și control de seruri bazate pe valorile înregistrate în godeurile de control al antigenului. Dată exprimată că valori DO și PI este utilizată pentru a determina dacă testul a fost efectuat în limite acceptabile. Limitele de control superioare (DCL) și limitele de control inferioare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
Dată exprimată că valori DO și PI este utilizată pentru a determina dacă testul a fost efectuat în limite acceptabile. Limitele de control superioare (DCL) și limitele de control inferioare (LCL) pentru controlul Mab (antigen și cu Mab în absență serurilor de testare) sunt în intervalul de valori DO 0,4 și 1,4. Orice placă ce nu îndeplinește criteriile de mai sus trebuie eliminată. Dacă un pachet software al calculatorului nu este utilizabil, se printează valorile DO utilizând imprimantă ELISA
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
cu valoarea 100%. Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm) x 100. Godeurile de control duble ale serurilor negative și godeurile blank în duplicat trebuie să înregistreze valori PI între +25% și -25% și respectiv între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se dezvoltă. Controlul serurilor intens pozitive
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
duble ale serurilor negative și godeurile blank în duplicat trebuie să înregistreze valori PI între +25% și -25% și respectiv între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se dezvoltă. Controlul serurilor intens pozitive și slab pozitive trebuie să înregistreze valori PI între +81% și +100% și respectiv între +51% și +80%. Diagnosticul de prag pentru seruri de testat este de 50% (50% PI sau 50% DO). Probele ce înregistrează valori PI
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se dezvoltă. Controlul serurilor intens pozitive și slab pozitive trebuie să înregistreze valori PI între +81% și +100% și respectiv între +51% și +80%. Diagnosticul de prag pentru seruri de testat este de 50% (50% PI sau 50% DO). Probele ce înregistrează valori PI 50% sunt înregistrate că negative. Probele ce înregistrează valori PI peste și sub pragul pentru godeurile duble sunt considerate dubioase; asemenea probe pot fi retestate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]