6,336 matches
-
NestléTM), câte 200 µl în fiecare godeu timp de o oră la 37°C. 2.1.1.4. Se înlătură soluția de saturare și se scutură ușor plăcile pe un material absorbant. 2.1.2. Eșantioane 2.1.2.1. Serurile de testat și serurile pozitive și negative de control se diluează la 1/25 într-o SSTF +5% (m/v) de lapte praf degresat + 0,05% (v/v) Tween -20; se aplică apoi 100 µl în fiecare godeu. Se incubează
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
în fiecare godeu timp de o oră la 37°C. 2.1.1.4. Se înlătură soluția de saturare și se scutură ușor plăcile pe un material absorbant. 2.1.2. Eșantioane 2.1.2.1. Serurile de testat și serurile pozitive și negative de control se diluează la 1/25 într-o SSTF +5% (m/v) de lapte praf degresat + 0,05% (v/v) Tween -20; se aplică apoi 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de 1 oră
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. Pentru titrare, se realizează serii de diluție din 2 în 2 începând de la 1/25 (100 µl/godeu), prin utilizarea unei coloane a plăcii pentru fiecare ser; se procedează la fel pentru controalele pozitiv și negativ. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.2.2. Se clătesc plăcile conform descrierii din etapa 2.1.1.2. 2.1.3. Conjugat 2.1.3
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
Se citește placa la 600 nm (sau 620 nm). 2.2. Interpretarea rezultatelor 2.2.1. Se calculează valoarea pragului adăugând 0,6 la valoarea controlului negativ (0,6 este abaterea standard calculată începând cu un grup de 30 de seruri negative). 2.2.2. Eșantioanele testate care prezintă o valoare de absorbție inferioară pragului sunt considerate negative. 2.2.3. Eșantioanele testate care prezintă o valoare de absorbție superioară pragului + 0,15 sunt considerate pozitive. 2.2.4. Eșantioanele testate
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
utilizată o a doua tehnică pentru confirmarea rezultatului. 3. TESTUL ELISA DE BLOCARE PENTRU DETECTAREA PREZENȚEI ANTICORPILOR VIRUSULUI PESTEI CABALINE AFRICANE (VPCA) (TEST OBLIGATORIU) Testul ELISA de blocare are ca scop detectarea prezenței anticorpilor specifici virusului pestei cabaline africane în serurile provenite de la orice specie sensibilă la acest virus. VP7 constituie proteina antigenică principală a VPCA, fiind prezentă în toate cele 9 serotipuri. Deoarece anticorpul monoclonal este îndreptat tot împotriva proteinei VP7, testul va fi foarte sensibil și foarte specific. De
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
și foarte specific. De asemenea, antigenul recombinant VP7 este total inofensiv și, prin urmare, foarte sigur. Principiul testului este diminuarea reacției între proteina recombinantă VP7, în calitate de antigen legat de placa ELISA, și anticorpul monoclonal conjugat, specific proteinei VP7. Anticorpii din serurile de testat vor bloca reacția dintre antigen și anticorpul monoclonal, ceea ce va duce la diminuarea culorii. Testul descris în continuare este utilizat de laboratorul comunitar de referință pentru pesta cabalină africană din Algete, Spania. 3.1. Descrierea testului 3.1
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
stabilizează placa prin tratare cu ajutorul unei soluții de stabilizare (pentru a permite păstrarea pe termen lung la 4șC fără pierdere de activitate) și se usucă pe sugativă. 3.1.2. Eșantioane și controale 3.1.2.1. Cernere: se diluează serurile de testat și serurile de control în proporție de 1 la 10 direct pe placă în SSTF pentru obținerea unui volum final de 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de o oră la 37șC. 3.1.2.2
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
cu ajutorul unei soluții de stabilizare (pentru a permite păstrarea pe termen lung la 4șC fără pierdere de activitate) și se usucă pe sugativă. 3.1.2. Eșantioane și controale 3.1.2.1. Cernere: se diluează serurile de testat și serurile de control în proporție de 1 la 10 direct pe placă în SSTF pentru obținerea unui volum final de 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de o oră la 37șC. 3.1.2.2. Titrare: se pregătește o
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
direct pe placă în SSTF pentru obținerea unui volum final de 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de o oră la 37șC. 3.1.2.2. Titrare: se pregătește o serie de diluții din 2 în 2 de seruri de testat și de control pozitive (100 µl în fiecare godeu) de la 1/10 la 1/1280 care se depun în opt godeuri. Controlul negativ este testat la o diluție de 1/10. 3.1.3. Conjugat Se adaugă 50
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
în laborator. BOTULISM, TRANSMIS PRIN ALIMENTE Descriere clinică Tablou clinic compatibil cu botulismul, de exemplu simptome precum diplopie, vedere tulbure și deficiență bulbară. O paralizie simetrică poate evolua rapid. Criterii de laborator pentru diagnostic - Detectarea toxinei de Clostridium botulinum în ser, scaun, conținutul stomacului sau alimentele consumate de pacient - Izolarea Clostridium botulinum din scaun. Clasificare a cazurilor Posibil: N.A. Probabil: Un caz compatibil clinic cu o legătură epidemiologică Confirmat: Un caz compatibil clinic și confirmat în laborator. BRUCELOZĂ Descriere clinică Tablou
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
exemplu o apariție discretă a simptomelor și icter sau creștere a nivelurilor transaminazelor serice. Hepatită A, acută Criterii de laborator pentru diagnostic - Cercetare pozitivă a anticorpilor IgM la virusul hepatitei A (anti-HAV) - Detectarea antigenului în scaun - Detectarea acidului nucleic în ser. Clasificare a cazurilor Posibil: N.A. Probabil: Un caz ce corespunde definiției cazului clinic și are o legătură epidemiologică Confirmat: Un caz ce corespunde definiției cazului clinic și este confirmat în laborator. Hepatită B, acută Criterii de laborator pentru diagnostic - Cercetare
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
Un caz ce corespunde definiției cazului clinic și este confirmat în laborator. Hepatită B, acută Criterii de laborator pentru diagnostic - Cercetare pozitivă a anticorpilor IgM la antigenul nucleocapsidic al hepatitei B (anti-HBc) - Detectarea acidului nucleic al virusului hepatitei B în ser. Clasificare a cazurilor Posibil: N.A. Probabil: Un caz HbsAg pozitiv și are un tablou clinic compatibil cu o hepatită acută Confirmat: Un caz confirmat în laborator. Hepatită C Criterii de laborator pentru diagnostic - Detectarea anticorpilor HCV specifici - Detectarea acidului nucleic
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
cutanată, icter sau insuficiență renală. Criterii de laborator pentru diagnostic - Izolarea Leptospira dintr-un eșantion clinic - Evidențierea unei creșteri specifice a titrului de aglutinare a Leptospira - Evidențierea Leptospira într-un eșantion clinic prin imunofluorescență - Detectarea anticorpilor IgM ai Leptospira în ser. Clasificare a cazurilor Posibil: N.A. Probabil: N.A. Confirmat: Un caz compatibil clinic și confirmat în laborator. LISTERIOZĂ Descriere clinică Infecție cauzată de Listeria monocytogenes ce poate să producă unul sau mai multe dintre sindroamele clinice, inclusiv nașterea unui făt mort
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
în mod normal steril - Detectarea antigenului de N. meningitidis dintr-un loc în mod normal steril - Evidențierea diplococilor Gram negativi dintr-un loc în mod normal steril prin microscopie Pentru caz probabil: - Un singur titru ridicat de anticorpi meningococici în ser de convalescent. Clasificare a cazurilor Posibil: N.A. Probabil: Un tablou clinic compatibil cu boala meningococică invazivă fără confirmare în laborator sau cu o identificare a N. meningitidis dintr-un loc nesteril sau cu niveluri înalte de anticorpi meningococici în ser
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
ser de convalescent. Clasificare a cazurilor Posibil: N.A. Probabil: Un tablou clinic compatibil cu boala meningococică invazivă fără confirmare în laborator sau cu o identificare a N. meningitidis dintr-un loc nesteril sau cu niveluri înalte de anticorpi meningococici în ser de convalescent Confirmat: Un caz compatibil clinic și confirmat în laborator. A se nota că purtătorii asimptomatici nu trebuie raportați. OREION Descriere clinică Tablou clinic compatibil cu oreionul, de exemplu apariție brutală a unei tumefacții unilaterale sau bilaterale, dureroase, inflamare
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
acidului nucleic al turbării într-un eșantion clinic - Izolarea (în cultură celulară sau un animal de laborator) a virusului rabic din salivă, lichid cefalo-rahidian (LCR) sau țesut al sistemului nervos central - Identificarea titrului anticorpilor ce neutralizează turbarea (neutralizare completă) în serul sau LCR ale unei persoane nevaccinate. Clasificare a cazurilor Posibil: Un caz compatibil clinic fără confirmare în laborator Probabil: N.A. Confirmat: Un caz compatibil clinic și confirmat în laborator. RUBEOLĂ Descriere clinică Tablou clinic compatibil cu rubeola, de exemplu o
jrc5505as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90675_a_91462]
-
se asigura ca animalele rămase să aibă o stare de sănătate satisfăcătoare înainte de a fi admise în centrul de colectare, conform paragrafului 13 punctul 3. Totuși, referitor la bruceloză, când animalele sunt pozitive, se pune în aplicare următorul protocol: (i) serurile pozitive se supun unui test de aglutinare serică, precum și unui test menționat la prima liniuță care nu a fost efectuat anterior; (ii) se efectuează un control epidemiologic la exploatațiile de origine ale animalelor reactive; (iii) la animalele pozitive se efectuează
jrc5533as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90703_a_91490]
-
se asigura ca animalele rămase să aibă o stare de sănătate satisfăcătoare înainte de a fi admise în centrul de colectare, conform paragrafului 13 punctul 3. Totuși, referitor la bruceloză, când animalele sunt pozitive, se pune în aplicare următorul protocol: (i) serurile pozitive se supun unui test de aglutinare serică, precum și unui test menționat la prima liniuță de mai sus care nu a fost efectuat anterior; (ii) un control epidemiologic se efectuează la exploatațiile de origine ale animalelor reactive, (iii) la animalele
jrc5533as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90703_a_91490]
-
către laborator, fragmentele de organe de pește ce urmează a fi examinate trebuie să fie prelevate cu ajutorul unor instrumente de disecție plasate în tuburi de plastic sterile care conțin mediul de transport, adică mediu de cultură celulară compus din 10% ser de vacă și antibiotice. Combinația de 200 UI de penicilină, 200 μg de streptomicină și 200 μg de kanamicină pe mililitru (ml) este recomandabilă, dar se pot folosi și alte antibiotice a căror eficacitate este dovedită. Țesuturile care trebuie examinate
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
la 15°C sau cel mult timp de 18 ore la 4°C. Proporția de antiser trebuie să fie de cel puțin 1/2 000 într-un test de neutralizare pe porțiuni la 50%. Tratamentul tuturor celulelor inoculate cu un ser antiviral NPI (virus care, în anumite regiuni ale Europei, este prezent în 50% din eșantioanele de pești) are ca scop împiedicarea apariției în culturile celulare inoculate a unui ECP rezultând din virusul NPI. Acest tratament permite reducerea duratei examenelor virusologice
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
examenelor virusologice ca și numărul de cazuri în care apariția unui ECP trebuie considerată ca un semn potențial al prezenței SHV sau NHI. Atunci când probele provin din unități de producție considerate ca nefiind atinse de NPI, tratamentul celulelor inoculate cu ser antiviral NPI poate fi omis. III. Examen virusologic 1. Culturi celulare și medii Celule BF-2 sau RTG-2 și EPC sau FHM sunt cultivate la temperaturi de la 20 la 30°C într-un mediu adecvat, de pildă un mediu Eagle's
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
virusologic 1. Culturi celulare și medii Celule BF-2 sau RTG-2 și EPC sau FHM sunt cultivate la temperaturi de la 20 la 30°C într-un mediu adecvat, de pildă un mediu Eagle's MEM (sau versiuni modificate), adiționat cu 10% ser de fetus bovin și antibiotice la concentrații standard. Atunci când celulele sunt cultivate în flacoane închise, se recomandă să se tamponeze mediul cu bicarbonat. Mediul folosit pentru cultura celulară în unități deschise poate fi tamponat cu Tris-HCL (23 mM) și cu
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
și 1:10 000 într-un mediu de cultură celulară. Se amestecă părți alicote din cele două diluții ale lichidului de suprafață și se incubează separat timp de 60 de minute la 15°C în părți egale cu următorii reactivi: - ser conținând un grup de anticorpi specifici împotriva virusului SHV la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - ser conținând un grup de anticorpi specifici împotriva virusului SHV la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - grup de antiseruri
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
lichidului de suprafață și se incubează separat timp de 60 de minute la 15°C în părți egale cu următorii reactivi: - ser conținând un grup de anticorpi specifici împotriva virusului SHV la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - ser conținând un grup de anticorpi specifici împotriva virusului SHV la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - grup de antiseruri împotriva serotipurilor indigene ale virusului NPI la o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - mediu de cultură singur
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
o diluție de 1:50 (vol:vol) (1), - mediu de cultură singur (control pozitiv). Pentru fiecare din amestecurile de suprafață viral-ser, se inoculează cel puțin două culturi celulare cu 50 de μl de amestec de lichid de suprafață și de ser și se incubează la 15°C. Se controlează apariția unui ECP în conformitate cu partea I III 4. Anumite tulpini ale virusului SHV nu reacționează la testele de neutralizare. Aceste tulpini izolate trebuie identificate prin tehnicile IF sau ELISA. Se pot aplica
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]