7,100 matches
-
un tampon PBS-Tween-20, se adaugă virusul ce urmează să fie identificat, diluat din doi în doi sau din patru în patru, și se lasă să reacționeze cu anticorpul captator timp de 60 de minute la 37°C. După clătirea cu tamponul PBS-Tween-20, se adaugă anticorpii biotinilați, al căror specific corespunde cu cel al anticorpilor captatori, și se lasă să reacționeze timp de 60 de minute la 20°C. După o ultimă clătire, se efectuează vizualizarea enzimei fixate cu ajutorul substraturilor ELISA corespunzătoare
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
4), fără activare metabolică, se prepară, de obicei, un amestec din 0,05 ml sau 0,1 ml de soluție de testat, 0,1 ml de cultură bacteriană proaspătă (ce conține aproximativ 108 celule viabile) și 0,5 ml de tampon steril cu 2,0 ml geloză de acoperire (agar). Pentru testul cu activare metabolică, se prepară, de obicei, un amestec din 0,5 ml preparat de activare metabolică, ce conține o cantitate specifică de fracție postmitocondrială (în proporție de 5
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
placă. Geloza de acoperire se lasă să se solidifice înainte de incubare. Pentru metoda de preincubare (2) (3) (5) (6), substanța de testat/soluția de testat se supune la preincubare împreună cu sușa experimentală (ce conține aproximativ 108 celule viabile) și cu tamponul steril sau sistemul de activare metabolică (0,5 ml) de obicei timp de 20 de minute sau mai mult, la 30-37oC, înainte de a fi amestecată cu geloza de acoperire și turnată pe suprafața unui mediu minimal de geloză depus pe
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
unui mediu minimal de geloză depus pe placă. De obicei, se prepară un amestec din 0,05 ml sau 0,1 ml de substanță de testat/soluție de testat, 0,1 ml bacterii și 0,5 ml amestec S9 sau tampon steril cu 2,0 ml geloză de acoperire. Eprubetele ar trebui să fie aerate cu ajutorul unui agitator în timpul preincubării. Pentru o bună estimare a variației, ar trebui să se utilizeze câte trei plăci cu depuneri pentru fiecare doză. Se acceptă
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
acestor rezultate. 9. dezvoltarea politicii de mediu comunitare trebuie să ia în calcul rezultatele obținute și experiența dobândită prin acțiunile specifice puse în aplicare în cadrul LIFE. 10. se recomandă luarea în considerare a rutelor de migrație și a rolului zonelor tampon în contextul proiectelor ce contribuie la punerea în aplicare a proiectului "Natura 2000". 11. proiectele pregătitoare trebuie să vizeze dezvoltarea unor noi acțiuni și instrumente comunitare privind mediul și/sau actualizarea legislației și politicilor de mediu. 12. Decizia Parlamentului European
jrc4766as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89932_a_90719]
-
instrument steril. Eșantioanele trebuie amplasate aseptic într-un container pentru eșantioane sau într-o pungă din plastic pentru diluție la abator, transferate apoi la laborator și omogenizate (aparat Stomacher peristaltic sau mixer rotativ (omogenizator)). Dacă se utilizează o metodă nedistructivă, tampoanele trebuie umezite înainte de colectarea eșantioanelor. Ar trebui utilizat un diluant 0,1% peptonă + 0,85% NaCl ca soluție pentru umezirea tampoanelor. Suprafața de eșantionare pentru tamponare ar trebui să acopere cel puțin 100 cm2 pentru fiecare zonă de eșantionare. Tamponul
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
transferate apoi la laborator și omogenizate (aparat Stomacher peristaltic sau mixer rotativ (omogenizator)). Dacă se utilizează o metodă nedistructivă, tampoanele trebuie umezite înainte de colectarea eșantioanelor. Ar trebui utilizat un diluant 0,1% peptonă + 0,85% NaCl ca soluție pentru umezirea tampoanelor. Suprafața de eșantionare pentru tamponare ar trebui să acopere cel puțin 100 cm2 pentru fiecare zonă de eșantionare. Tamponul trebuie umezit timp de cel puțin 5 secunde în diluant și frecat, mai întâi vertical, apoi orizontal, apoi în diagonală, timp
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
tampoanele trebuie umezite înainte de colectarea eșantioanelor. Ar trebui utilizat un diluant 0,1% peptonă + 0,85% NaCl ca soluție pentru umezirea tampoanelor. Suprafața de eșantionare pentru tamponare ar trebui să acopere cel puțin 100 cm2 pentru fiecare zonă de eșantionare. Tamponul trebuie umezit timp de cel puțin 5 secunde în diluant și frecat, mai întâi vertical, apoi orizontal, apoi în diagonală, timp de cel puțin de 20 de secunde, pe întreaga suprafață a cărnii, delimitată de un șablon. Ar trebui aplicată
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
în diluant și frecat, mai întâi vertical, apoi orizontal, apoi în diagonală, timp de cel puțin de 20 de secunde, pe întreaga suprafață a cărnii, delimitată de un șablon. Ar trebui aplicată o presiune cât mai mare posibil. După utilizarea tamponului umezit, trebuie repetată aceeași procedură de eșantionare cu un tampon uscat. Pentru a obține rezultate comparabile, tehnica trebuie aplicată cu consecvență și meticulozitate pentru diferitele eșantioane, carcase și zile de eșantionare. ZONE DE EȘANTIONARE PENTRU TESTAREA CARCASELOR (vezi figurile) Următoarele
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
în diagonală, timp de cel puțin de 20 de secunde, pe întreaga suprafață a cărnii, delimitată de un șablon. Ar trebui aplicată o presiune cât mai mare posibil. După utilizarea tamponului umezit, trebuie repetată aceeași procedură de eșantionare cu un tampon uscat. Pentru a obține rezultate comparabile, tehnica trebuie aplicată cu consecvență și meticulozitate pentru diferitele eșantioane, carcase și zile de eșantionare. ZONE DE EȘANTIONARE PENTRU TESTAREA CARCASELOR (vezi figurile) Următoarele zone sunt în general potrivite pentru controlul procesului: Bovine: ceafă
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
inacceptabile și acțiunile de corectare nu conduc la o igienă mai bună, următoarele eșantioane nu ar mai trebui grupate până când problemele de preparare nu vor fi fost rezolvate. METODA MICROBIOLOGICĂ DE EXAMINARE A EȘANTIOANELOR Eșantioanele prelevate prin metoda distructivă sau tampoanele utilizate la metoda nedistructivă ar trebui refrigerate la 4 oC până la examinare. Eșantioanele ar trebui omogenizate într-o pungă de plastic pentru diluție timp de cel puțin două minute în 100 ml de mediu de diluție (ex. soluție tamponată de
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
ex. soluție tamponată de apă cu peptonă la 0,1%, soluție de clorură de sodiu la 0,9%) la aproximativ 250 de cicluri ale unui aparat Stomacher peristaltic sau omogenizate cu un mixer rotativ (omogenizator). O altă posibilitate este ca tampoanele eșantion să fie scuturate viguros în mediul de diluție. Eșantioanele ar trebui examinate în termen de 24 de ore de la prelevare. Diluția înainte de pregătirea plăcilor ar trebui efectuată în etape de câte zece pași, în 0,1% peptonă + 0,85
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
viguros în mediul de diluție. Eșantioanele ar trebui examinate în termen de 24 de ore de la prelevare. Diluția înainte de pregătirea plăcilor ar trebui efectuată în etape de câte zece pași, în 0,1% peptonă + 0,85% NaCl. Suspensia obținută de pe tampoane și suspensia de carne omogenizată din recipientul dispozitivului Stomacher nu sunt o diluție și trebuie luate în considerare când se calculează o diluție la 10o. Analiza trebuie efectuată pentru totalul numărărilor viabile și enterobacteriaceae. Totuși, după aprobarea de către autoritatea competentă
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
metoda distructivă. Pentru a realiza o standardizare în industrie și pentru a facilita constituirea unei baze de date de referință valabile, este imperativ să se utilizeze cea mai fiabilă metodă disponibilă. În consecință, este important de reamintit că eșantionarea cu tampoane îndepărtează doar o parte (deseori 20% sau mai puțin) din întreaga floră prezentă pe suprafața cărnii. Constituie deci doar un indicator al igienei suprafeței. Când se utilizează alte metode decât metoda distructivă, criteriile microbiologice de performanță trebuie stabilite individual pentru
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
asemenea o verificare utilă pentru posibile contaminări pe perioada preparării: plăcile cu colonii vizibile trebuie eliminate. Plăcile au o durată de viață la depozitare de o săptămână la temperatura de 2-4 oC, dacă sunt sigilate în pungi de plastic. TEHNICA TAMPOANELOR Eșantioanele trebuie prelevate cu tampoane de bumbac umezite cu 1 ml de soluție de NaCl peptonă 0,1% (8,5 g NaCl, 1 g caseină - peptonă tripsină, 0,1% geloză și 1 000 ml apă distilată) de pe o suprafață preferabil
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
posibile contaminări pe perioada preparării: plăcile cu colonii vizibile trebuie eliminate. Plăcile au o durată de viață la depozitare de o săptămână la temperatura de 2-4 oC, dacă sunt sigilate în pungi de plastic. TEHNICA TAMPOANELOR Eșantioanele trebuie prelevate cu tampoane de bumbac umezite cu 1 ml de soluție de NaCl peptonă 0,1% (8,5 g NaCl, 1 g caseină - peptonă tripsină, 0,1% geloză și 1 000 ml apă distilată) de pe o suprafață preferabil de 20 cm2 marcată cu
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
1 g caseină - peptonă tripsină, 0,1% geloză și 1 000 ml apă distilată) de pe o suprafață preferabil de 20 cm2 marcată cu șablon steril. Dacă eșantionarea se face după curățare și dezinfectare, trebuie adăugată la soluția de umezire a tampoanelor o cantitate de 30g/l de Tween 80 și 3g/l de lecitină (sau alte produse cu efect similar). Pentru zonele ude tampoanele uscate de bumbac pot fi suficiente. Tampoanele trebuie ținute cu un forceps steril și suprafața eșantionată trebuie
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
șablon steril. Dacă eșantionarea se face după curățare și dezinfectare, trebuie adăugată la soluția de umezire a tampoanelor o cantitate de 30g/l de Tween 80 și 3g/l de lecitină (sau alte produse cu efect similar). Pentru zonele ude tampoanele uscate de bumbac pot fi suficiente. Tampoanele trebuie ținute cu un forceps steril și suprafața eșantionată trebuie tamponată de 10 ori de sus în jos apăsând puternic pe suprafață. Tampoanele trebuie colectate într-un flacon conținând 40 ml de peptonă
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
curățare și dezinfectare, trebuie adăugată la soluția de umezire a tampoanelor o cantitate de 30g/l de Tween 80 și 3g/l de lecitină (sau alte produse cu efect similar). Pentru zonele ude tampoanele uscate de bumbac pot fi suficiente. Tampoanele trebuie ținute cu un forceps steril și suprafața eșantionată trebuie tamponată de 10 ori de sus în jos apăsând puternic pe suprafață. Tampoanele trebuie colectate într-un flacon conținând 40 ml de peptonă tamponată cu soluție salină de geloză 0
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
lecitină (sau alte produse cu efect similar). Pentru zonele ude tampoanele uscate de bumbac pot fi suficiente. Tampoanele trebuie ținute cu un forceps steril și suprafața eșantionată trebuie tamponată de 10 ori de sus în jos apăsând puternic pe suprafață. Tampoanele trebuie colectate într-un flacon conținând 40 ml de peptonă tamponată cu soluție salină de geloză 0,1%. Tampoanele eșantion trebuie refrigerate la 4 oC până la procesări ulterioare. Flaconul trebuie scuturat viguros înainte de diluția în etape de câte 10 pași
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
ținute cu un forceps steril și suprafața eșantionată trebuie tamponată de 10 ori de sus în jos apăsând puternic pe suprafață. Tampoanele trebuie colectate într-un flacon conținând 40 ml de peptonă tamponată cu soluție salină de geloză 0,1%. Tampoanele eșantion trebuie refrigerate la 4 oC până la procesări ulterioare. Flaconul trebuie scuturat viguros înainte de diluția în etape de câte 10 pași în 40 ml de soluție NaCl peptonă 0,1%, urmată de examinarea microbiologică (ex. tehnica de expunere a picăturii
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
suprafețele care ar trebui eșantionate în anumite zile. Rezultatele trebuie înregistrate și trebuie întocmite în mod regulat grafice de bare care să arate evoluția în timp. TRANSPORTUL Plăcile de contact utilizate nu trebuie refrigerate pe perioada transportului sau înainte de incubare. Tampoanele eșantion trebuie refrigerate la 4 oC până la procesări ulterioare. PROCEDURI BACTERIOLOGICE În plus față de descrierea făcută, pot fi utilizate metode ISO. Numărările bacteriologice ar trebui raportate în funcție de numărul de organisme pe cm2 de suprafață. Plăcile de geloză de numărare inoculate
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
trecere, tobogane pentru organe de uz alimentar, părți din lanț atinse frecvent de carcase, structuri aeriene de pe care poate picura umezeală etc. CALCULAREA REZULTATELOR Pentru plăcile de geloză de contact, pentru TNV și pentru numărările de enterobacterii din testele cu tampoane, rezultatele trebuie menționate într-un formular de înregistrare. În scopul verificărilor desfășurării proceselor de curățare și dezinfecție au fost stabilite doar două categorii pentru TNV și enterobacterii: acceptabil și inacceptabil. Valorile acceptabile pentru numărul de colonii de pe o placă de
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
și dezinfecție au fost stabilite doar două categorii pentru TNV și enterobacterii: acceptabil și inacceptabil. Valorile acceptabile pentru numărul de colonii de pe o placă de geloză de contact și numărul de colonii pentru TNC și enterobacterii (rezultate din teste pe tampoane) sunt menționate în tabelul 2. Tabelul 2: Valorile medii pentru numărul de colonii pentru testarea suprafețelor Valori acceptabile Inacceptabile Total numărări viabile (TNV) 0-10/cm2 > 10/ cm2 Enterobacterii 0-1/cm2 > 1/cm2 FEEDBACK Rezultatele testelor trebuie comunicate personalului responsabil cât
jrc4974as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90142_a_90929]
-
provine carnea: (a) nu a fost vaccinat cu vaccinuri preparate din tulpini principale ale virusului bolii de Newcastle care prezintă o putere patogenă mai mare decât tulpinile lentogene ale virusului; (b) a fost supus, pe baza unei eșantionări aleatoare de tampoane cloacale prelevate de la cel puțin 60 de păsări din fiecare lot în cauză, la un test de izolare a virusului bolii Newcastle, realizat într-un laborator oficial, în care nu au fost găsiți paramixoviruși cu un indice patogen intracerebral (IPIC
jrc5004as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90172_a_90959]