6,925 matches
-
tehnice. Trebuie înregistrată valoarea curentă obținută și tipul pneurilor și suprafeței. 11 Vezi nota de subsol de la pct. 5.1.1.2. 12 Prin "forță maximă" se înțelege forța maximă prevăzută în anexa II pentru categoria vehiculului; dacă este necesară activarea dispozitivului antiblocare poate fi utilizată o forță mai mare. 13 K1 este coeficientul suprafeței cu aderență mare. K2 este coeficientul suprafeței cu aderență mică. K1 și K2 sunt măsurate conform apendicelui 1 la prezenta anexă. 14 În studiu. Până la determinarea
jrc1002as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86141_a_86928]
-
și inhalatorii. 4.3. Alte efecte 4.3.1. Mutageneza (inclusiv testul cancerigen de preselecție) 4.3.2. Substanța ar trebui examinată în timpul unei serii de două teste, dintre care unul ar trebui să fie cel bacteriologic, cu sau fără activare metabolică, și unul nebacteriologic. 5. STUDII ECOTOXICOLOGICE 5.1. Efecte asupra organismelor 5.1.1. Toxicitatea acută pentru pești LC90 ........................................ (ppm) Durata de expunere este determinată în conformitate cu anexa V (C) Specii selectate (una sau mai multe) ..................................... 5.1.2. Toxicitatea
jrc539as1979 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85677_a_86464]
-
termen scurt destinat evidențierii aberațiilor cromozomiale structurale în culturile de celule ale mamiferelor. Se pot folosi culturi de linii celulare stabilite, precum și culturi de celule primare. După expunerea la substanțele de testare în prezența și în absența unui amestec de activare a enzimelor hepatice (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), culturile celulare se tratează cu un inhibitor al fusului mitotic, precum colcinina în vederea acumulării celulelor în stadiu de tip metafază al mitozei (c-metafază). Celulele se recoltează la momente adecvate și se
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
hamsteri chinezești și limfocite umane. 1.6.2. Condiții experimentale Număr de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesc cel puțin două culturi. Folosirea martorilor negativi și pozitivi Solventul (când solventul nu este mediul de cultură sau apa), amestecul de activare a enzimelor hepatice, amestecul de activare a enzimelor hepatice cu solventul, precum și martorii netratați se folosesc ca martori negativi. Se include un martor pozitiv în fiecare experiență; când amestecul de activare a enzimelor hepatice se folosește pentru a activa substanța
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
6.2. Condiții experimentale Număr de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesc cel puțin două culturi. Folosirea martorilor negativi și pozitivi Solventul (când solventul nu este mediul de cultură sau apa), amestecul de activare a enzimelor hepatice, amestecul de activare a enzimelor hepatice cu solventul, precum și martorii netratați se folosesc ca martori negativi. Se include un martor pozitiv în fiecare experiență; când amestecul de activare a enzimelor hepatice se folosește pentru a activa substanța de testare, se folosește ca martor
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
nu este mediul de cultură sau apa), amestecul de activare a enzimelor hepatice, amestecul de activare a enzimelor hepatice cu solventul, precum și martorii netratați se folosesc ca martori negativi. Se include un martor pozitiv în fiecare experiență; când amestecul de activare a enzimelor hepatice se folosește pentru a activa substanța de testare, se folosește ca martor pozitiv o substanță care necesită o activare metabolică. Se folosesc cel puțin trei doze din substanța de testare pe un interval de cel puțin un
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
martorii netratați se folosesc ca martori negativi. Se include un martor pozitiv în fiecare experiență; când amestecul de activare a enzimelor hepatice se folosește pentru a activa substanța de testare, se folosește ca martor pozitiv o substanță care necesită o activare metabolică. Se folosesc cel puțin trei doze din substanța de testare pe un interval de cel puțin un logaritm, doza cea mai ridicată reducând activitatea mitotică cu cca. 50 %. Condiții de cultură Se folosesc un mediu de cultură și condiții
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
Limfocite umane: se adaugă sânge heparinat la mediul de cultură, conținând fitohemaglutinină, ser de făt de vițel, precum și antibiotice, și se incubează la 37 șC. 1.6.3.2. Tratarea culturilor cu substanța de testare (i) Tratament fără amestec de activare a enzimelor hepatice Toate tratamentele trebuie să acopere timpul unui ciclu celular complet și schemele de fixare trebuie să garanteze analiza primelor mitoze posterioare la tratamentul celulelor tratate în diferite stadii ale ciclului acestora. Dacă tratamentul nu coincide cu lungimea
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
când acestea se găsesc în faza lor de creștere exponențială. Se tratează culturile de limfocite umane când sunt încă în stare semisincronă. Dacă substanța de testare modifică durata ciclului celular, se modifică, în consecință, intervalul de fixare. (ii) Amestecul de activare a enzimelor hepatice folosite pentru tratarea substanței de testare se menține cât de mult posibil, fără a exercita un efect toxic asupra celulelor. Dacă, din motive de toxicitate, acest tratament nu acoperă un ciclu celular complet, se aleg timpi de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - celulele folosite; - condițiile experimentale: compoziția mediului, concentrația de CO2, temperatura de incubație, durata de incubație, dozele, momentul tratamentului, durata tratamentului cu inhibitor de fus mitotic și concentrația acestuia, tipul de amestec de activare a enzimelor hepatice folosit, martorii pozitivi și negativi; - numărul de culturi celulare; - numărul de metafaze analizate (date indicate separat pentru fiecare cultură); - indexul mitotic; - tipul și numărul de aberații indicate separat pentru fiecare cultură tratată și martor, numărul modal de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
de reversie cu triptofan al E. coli (trp) este un test microbian care permite măsurarea reversiei trp-trp.·datorată unor substanțe chimice responsabile de substituția de bază la nivelul genomului uman. Se expun bacteriile la substanțele de testare cu sau fără activare metabolică. După o perioadă de incubație adecvată minimă pe mediu, se numără coloniile derivate prin reversiune și se compară numărul obținut cu cel al revertanților spontani observați într-o cultură martor netratată și / sau în prezența solventului. 1.5. Criterii
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
1. Pregătire 1.6.1.1. Bacterii Se cultivă bacteriile la 37 șC până la sfârșitul fazei exponențiale sau până la începutul fazei staționare de creștere. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie de 108 - 109 celule pe milimetru. 1.6.1.2. Activarea metabolică Bacteriile se expun pe suprafața de testare în prezența și în absența unui amestec adecvat de activare a enzimelor hepatice ale mamiferelor (fracțiune postmitocondrială suplinită cu cofactori) pregătit pornindu-se de la șoareci sau de la șobolani pretratați cu inductori enzimatici
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
până la începutul fazei staționare de creștere. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie de 108 - 109 celule pe milimetru. 1.6.1.2. Activarea metabolică Bacteriile se expun pe suprafața de testare în prezența și în absența unui amestec adecvat de activare a enzimelor hepatice ale mamiferelor (fracțiune postmitocondrială suplinită cu cofactori) pregătit pornindu-se de la șoareci sau de la șobolani pretratați cu inductori enzimatici. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1. Linii de experiment Se folosesc trei specii, respectiv WP2
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
cu martori netratați și martori în prezența solvenților. Se realizează și martori pozitivi în cele două scopuri enunțate în continuare: (i) confirmarea sensibilității speciilor bacteriene. Metilemetanul sulfonat, 4-nitrochinoleina oxid sau ethilnitrosoureea se pot folosi ca martori pozitivi pentru testele fără activare metabolică; (ii) garantarea activității sistemului metabolizant adecvat. 2-aminoantracenul constituie un martor pozitiv al activității sistemului metabolizant pentru toate speciile. Dacă este posibil, se recomandă folosirea unui martor pozitiv aparținând aceleiași clase chimice ca și substanța de testare. 1.6.2
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
considera substanța de testare ca negativă. 1.6.2.5. Condiții de incubație Cutiile se incubează timp de 48 până la 72 de ore la 37 șC. 3.6.2. Mod de operare În metoda de incorporare directă pe cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă la 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Pentru testele cu activare metabolică, se adaugă la agar-agar 0,5 mililitri de amestec de activare de enzime
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
3.6.2. Mod de operare În metoda de incorporare directă pe cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă la 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Pentru testele cu activare metabolică, se adaugă la agar-agar 0,5 mililitri de amestec de activare de enzime hepatice conținând o cantitate adecvată de fracțiune postmitocondrială, după adăugarea substanței de testare și a bacteriilor. Conținutul fiecărui tub se amestecă și se varsă la suprafața
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă la 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Pentru testele cu activare metabolică, se adaugă la agar-agar 0,5 mililitri de amestec de activare de enzime hepatice conținând o cantitate adecvată de fracțiune postmitocondrială, după adăugarea substanței de testare și a bacteriilor. Conținutul fiecărui tub se amestecă și se varsă la suprafața unei cutii de agar-agar selectiv. Agar-agarul de acoperire se solidifică, iar cutiile
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă și o cantitate adecvată de amestec de activare de enzime hepatice sau aceeași cantitate de soluție tampon, înainte de adăugarea a 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Restul modului de operare este identic cu cel folosit pentru metoda de incorporare directă pe cutie. Toate cutiile pregătite pentru cele
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
independente. Datele se evaluează prin metode statistice adecvate. 3. REZULTATE 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - bacteriile, linia folosită; - condițiile experimentale: dozele, toxicitatea, compoziția mediului, metodele de tratare (preincubare, incubare, amestec de activare de enzime hepatice, substanță de referință, martori negativi); - numărul pe cutie, numărul mediu de colonii derivate prin reversie pe cutie, diferența tip, relația doză / efect, dacă este posibil; - discutarea rezultatelor; - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
un test microbian care permite măsurarea reversiei his - his.* indusă de substanțe chimice responsabile pentru substituția de bază sau a mutațiilor care deplasează cadrul de citire la nivelul genomului organismului. Se expun bacteriile la substanța de testare cu sau fără activare metabolică și se varsă la suprafața unui mediu minim. După o perioadă de incubație adecvată, se numără coloniile derivate prin reversie și se compară numărul obținut cu cel al revertanților spontani observați într-o cultură martor netratată și/sau în
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
6.1.1. Bacterii Se cultivă culturi proaspete de bacterii la 37 șC până la sfârșitul fazei exponențiale sau până la începutul fazei staționare de creștere. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie de 108 - 109 celule pe milimetru. 1.6.1.2. Activarea metabolică Bacteriile se expun pe suprafața de testare în prezența și în absența unui amestec adecvat de activare a enzimelor hepatice ale mamiferelor (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), pregătit pornindu-se de la șoareci sau de la șobolani pretratați cu inductori enzimatici
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
până la începutul fazei staționare de creștere. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie de 108 - 109 celule pe milimetru. 1.6.1.2. Activarea metabolică Bacteriile se expun pe suprafața de testare în prezența și în absența unui amestec adecvat de activare a enzimelor hepatice ale mamiferelor (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), pregătit pornindu-se de la șoareci sau de la șobolani pretratați cu inductori enzimatici. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1. Linii de experiență Se folosesc cel puțin patru linii
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
și negativi Se folosesc în paralel martori netratați și martori în prezența solvenților. Se folosesc și martori pozitivi în cele două scopuri enunțate în continuare: (i) confirmarea sensibilității liniilor bacteriene Compușii menționați în continuare pot fi folosiți pentru testele fără activare metabolică: Cu Specii reversie TA 1535, TA 100 Azid de sodiu TA 1538, TA 98 2-nitrofluoren TA 1537 9-aminoacridină (ii) garantarea activității sistemului metabolizant adecvat. 2-aminoantracenul constituie un martor pozitiv al activității sistemului metabolizant pentru toate speciile. Dacă este posibil
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
testare să poată fi considerată negativă. 1.6.2.6. Condițiile de incubație Cutiile se incubează timp de 48 până la 72 de ore la 37 șC. 1.6.3. Mod de operare În metoda de incorporare directă pe cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă la 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Pentru testele cu activare metabolică, se adaugă la agar-agar 0,5 mililitri de amestec de activare de enzime
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
1.6.3. Mod de operare În metoda de incorporare directă pe cutie fără activare enzimatică, se adaugă substanța de testare și 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă la 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Pentru testele cu activare metabolică, se adaugă la agar-agar 0,5 mililitri de amestec de activare de enzime hepatice conținând o cantitate adecvată de fracțiune postmitocondrială, după adăugarea substanței de testare și a bacteriilor. Conținutul fiecărui tub se amestecă și se varsă la suprafața
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]