6,336 matches
-
volum de 1:10 și patru culturi cu un raport de 1:1000. Acestea se incubează apoi la 15°C timp de 20 - 30 de ore. După incubare, se clătesc de două ori culturile în mediu Eagle's MEM fără ser, se fixează cu o soluție de acetonă înghețată de 80% și se efectuează reacția IF. Primul strat de reactiv se compune din anticorpi poli- sau monoclonali de referință de calitate. Al doilea reactiv este un antiser combinat cu fluorcrom preparat
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
soluție de acetonă înghețată de 80% și se efectuează reacția IF. Primul strat de reactiv se compune din anticorpi poli- sau monoclonali de referință de calitate. Al doilea reactiv este un antiser combinat cu fluorcrom preparat împotriva imunoglobulinelor din primul ser. Pentru fiecare dintre antiserurile testate, se folosesc cel puțin o cultură inoculată în doză ridicată și o cultură inoculată în doză slabă. Se includ în test martori negativi și pozitivi corespunzători. Se recomandă tipuri de fluorcrom precum FITC sau TRITC
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
cu privire la culturile celulare, la fixare și anticorpii de referință de calitate) dacă s-a dovedit eficacitatea acestora. 4. ELISA Se acoperă cupulele din plăcile de microtitrare timp de o noapte cu diluțiile recomandate din fracțiuni de imunoglobuline purificate provenind din seruri de referință de calitate. Se clătesc cupulele cu un tampon PBS-Tween-20, se adaugă virusul ce urmează să fie identificat, diluat din doi în doi sau din patru în patru, și se lasă să reacționeze cu anticorpul captator timp de 60
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
se vedea partea I III 3. III.4. Microscopie Se inspectează în fiecare zi culturile celulare inoculate pentru a se distinge apariția unui ECP la o mărire de 40-150 de ori. Dacă formarea unui ECP este inhibată de unul din serurile folosite, virusul poate fi considerat ca identificat în consecință. Dacă apariția unui ECP nu este inhibată de unul din seruri, trebuie să se pună în aplicare procedurile de identificare a virusului în conformitate cu partea I IV. III.5. Sub-cultură Dacă nu
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
distinge apariția unui ECP la o mărire de 40-150 de ori. Dacă formarea unui ECP este inhibată de unul din serurile folosite, virusul poate fi considerat ca identificat în consecință. Dacă apariția unui ECP nu este inhibată de unul din seruri, trebuie să se pună în aplicare procedurile de identificare a virusului în conformitate cu partea I IV. III.5. Sub-cultură Dacă nu se produce nici un ECP după șapte până la zece zile, trebuie pusă în aplicare o sub-cultură din culturile inoculate cu lichidul
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
reprezentare în culturi celulare se cultivă în flacoane de culturi celulare pe celule BF-2 sau RTG-2 pentru virusul SHV șu pe celule EPC pentru virusul NHI. Trebuie să se folosească un mediu de cultură celulară adiționat cu cel puțin 10% ser. Se folosește o multiplicare slabă a infecției (MOI) pentru inoculare (< 1). Atunci când ECP este total, virusul este colectat prin centrifugare din lichidul de suprafață de la culturile celulare la 2000 x g timp de cincisprezece minute, sterilizat prin filtrare cu o
jrc4925as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90093_a_90880]
-
minimă de insolubilitate), se recomandă să se încerce mai multe concentrații până la apariția precipitării. Ar putea fi utilă evaluarea solubilității la începutul și la sfârșitul tratamentului, deoarece solubilitatea poate să varieze în timpul expunerii în sistemul experimental datorită prezenței celulelor, S9, serului etc. Insolubilitatea se poate constata cu ochiul liber. Ar trebui ca precipitarea să nu interfereze cu determinarea rezultatelor. 1.4.2.3. Martorii negativi și pozitivi La fiecare experiment, ar trebui să se includă simultan martorii pozitivi și negativi (solvent
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
pusă în evidență în mediul final de tratament în care se expun celulele. Ar putea fi utilă evaluarea solubilității la începutul și la sfârșitul tratamentului, deoarece solubilitatea poate să varieze în timpul expunerii în sistemul de testare datorită prezenței celulelor, S9, serului etc. Insolubilitatea se poate constata cu ochiul liber. Ar trebui ca precipitarea să nu interfereze cu determinarea rezultatelor. 1.4.2.3 Martorii În fiecare experiment, ar trebui să se includă simultan martorii pozitivi și negativi (solvent și vehicul), atât
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
testului, iar pentru fiecare lot trebuie efectuată cel puțin examinarea menționată în alin. (2) lit. (c). 2. Standardizarea, sensibilitatea și specificitatea testului. (a) Sensibilitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate pozitive pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
lot trebuie efectuată cel puțin examinarea menționată în alin. (2) lit. (c). 2. Standardizarea, sensibilitatea și specificitatea testului. (a) Sensibilitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate pozitive pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
2. Standardizarea, sensibilitatea și specificitatea testului. (a) Sensibilitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate pozitive pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
a) Sensibilitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate pozitive pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
la un nivel care să permită obținerea de rezultate pozitive pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
obținerea de rezultate pozitive pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
referință comunitară ADV 1 cu o diluție de 1:8, - Ser de referință comunitară ADV-gE A, - Ser de referință comunitară ADV-gE B, - Ser de referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
referință comunitară ADV-gE C, - Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
Ser de referință comunitară ADV-gE D, - Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
Ser de referință comunitară ADV-gE E, - Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
Ser de referință comunitară ADV-gE F. (b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE O, - Ser de referință comunitară ADV-gE
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
b) Specificitatea testului trebuie să fie la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE O, - Ser de referință comunitară ADV-gE P, - Ser de referință comunitară ADV-gE
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
la un nivel care să permită obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE O, - Ser de referință comunitară ADV-gE P, - Ser de referință comunitară ADV-gE Q. (c) Pentru controlul lotului, serul
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
obținerea de rezultate negative pentru următoarele seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE O, - Ser de referință comunitară ADV-gE P, - Ser de referință comunitară ADV-gE Q. (c) Pentru controlul lotului, serul de referință comunitară ADV 1 trebuie
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
seruri de referință comunitară: - Ser de referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE O, - Ser de referință comunitară ADV-gE P, - Ser de referință comunitară ADV-gE Q. (c) Pentru controlul lotului, serul de referință comunitară ADV 1 trebuie să dea rezultat pozitiv la o
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]
-
referință comunitară ADV-gE G, - Ser de referință comunitară ADV-gE H, - Ser de referință comunitară ADV-gE J, - Ser de referință comunitară ADV-gE K, - Ser de referință comunitară ADV-gE L, - Ser de referință comunitară ADV-gE M, - Ser de referință comunitară ADV-gE N, - Ser de referință comunitară ADV-gE O, - Ser de referință comunitară ADV-gE P, - Ser de referință comunitară ADV-gE Q. (c) Pentru controlul lotului, serul de referință comunitară ADV 1 trebuie să dea rezultat pozitiv la o diluție de 1:8 și unul
jrc5009as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90177_a_90964]