6,858 matches
-
4.4.3. Test-martor Într-un pahar Erlenmeyer de 5,0 ml se pun: - 5,00 ml reactiv pentan-2,4-dionă ( 4.2.12); - apă demineralizată până la un volum final de 30 ml. 4.4.4. Determinare 4.4.1. Se agită amestecurile de la 4.4.1, 4.4.2 și 4.4.3. Se introduc paharele Erlenmeyer într-o baie de apă la 60°C pentru exact 10 minute. Se lasă la răcit într-o baie de apă cu gheață timp
jrc1595as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86736_a_87523]
-
o baie de apă cu gheață timp de două minute. 4.4.2. Se transferă în pâlnii de separare de 50 ml conținând 10 ml de butanol (4.2.4). Se clătește fiecare pahar cu 3...5 ml apă. Se agită puternic amestecul exact 30 secunde. Se lasă să se separe. 4.4.3. Se filtrează faza de 1-butanol în cuvele de măsurare (4.3.2) printr-un filtru pentru separarea fazelor. De asemenea, se poate folosi centrifugarea (3000 gn timp
jrc1595as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86736_a_87523]
-
Acesta se utilizează de preferință fără modificări ulterioare, dar poate fi inactivat cu beta-propiolactonă. Inactivarea se poate realiza prin adăugarea a 0,1 ml de soluție 3% de beta-propiolactonă în apă distilată la fiecare 0,9 ml de antigen și agitând amestecul timp de trei ore la temperatura camerei într-o încăpere aerisită și timp de 18 ore la 4oC. Se poate utiliza și metoda Casals (Casals J. (1949): Pro Soc Exptl Bici Med, 70.339). În absența unui ser standard
jrc1612as1990 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86754_a_87541]
-
Se cântărește proba în balonul conică (1.3.2). 1.4.3. Determinarea Se dizolvă proba (4.5.2) într-o cantitate de 50 - 150 ml de amestec de oxid dietilic/etanol (1.2.1), neutralizat în prealabil. Se titrează, agitând, cu soluția de hidroxid de potasiu de 0,1 mol la litru (1.2.2) (vezi nota 2) până la schimbarea direcției indicatorului (colorarea în roz a fenolftaleinei durând cel puțin zece secunde). Nota 1: Soluția etanolică titrată de hidroxid de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
adaugă 10 ml de cloroform (6.1). Se dizolvă rapid proba prin agitare. Se adaugă 15 ml de acid acetic (6.2), apoi 1 ml de soluție de iodură de potasiu (6.3). Se pune rapid dopul la loc, se agită timp de un minut și se lasă în repaus exact 5 minute, la adăpost de lumină și la o temperatură de la 15-25°C. Se adaugă aproximativ 75 ml de apă distilată. Se titrează iodul eliberat cu soluție de tiosulfat de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
30°C. 5.1.3. Se transvazează cantitativ conținutul balonului într-o pâlnie de decantare de 500 ml, adăugând apă distilată de mai multe ori, folosind în total aproximativ 50 ml. Se adaugă aproximativ 80 ml de eter etilic, se agită energic timp de aproximativ 30 de secunde și se lasă să se facă separarea (nota 1). Se separă faza apoasă inferioară preluând-o în altă pâlnie de decantare. Se fac încă două extracții pe fază apoasă, procedând identic, utilizând de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
nota 6). Nota 5: În comerț există soluții gata preparate: în plus, alți reactivi silanizanți, precum, de exemplu, bi-trimetilsililtrifluorescentamida + 1 % trimetilclorosilan care trebuie să se dilueze cu un volum egal de piridină anhidră. 5.3.2. Se închide eprubeta, se agită cu grijă (fără a o răsturna) până la solubilizarea completă a alcoolilor alifatici. Se lasă în repaus minimum 15 minute la temperatura camerei, apoi se centrifughează timp de câteva minute: soluția limpede este gata pentru analiza prin cromatografie în faza gazoasă
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
30°C. 5.1.3. Se transvazează cantitativ conținutul balonului, într-o pâlnie de decantare de 500 ml, adăugând apă distilată de mai multe ori, folosind în total aproximativ 50 ml. Se adaugă aproximativ 80 ml de eter etilic, se agită energic timp de aproximativ 30 de secunde și se lasă să se facă separarea (nota 1). Se separă faza apoasă inferioară colectând-o în altă pâlnie de decantare. Se fac încă două extracții pe fază apoasă, după aceleași modalități, utilizând
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
umiditate (nota 5). Nota 4: În comerț există soluții gata pentru folosire: în plus, alți reactivi silanizanți, precum, de exemplu, bi-trimetilsililtrifluoracentamida + 1 % trimetilclorosilan care se diluează cu un volum egal de piridină anhidră. 5.3.2. Se închide eprubeta, se agită cu grijă (fără a o răsturna) până la solubilizarea completă a sterolilor. Se lasă în repaus minimum 15 minute la temperatura ambiantă, apoi se centrifughează timp de câteva minute: soluția limpede este gata pentru analiza prin cromatografie în faza gazoasă. Nota
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
ascuțit ușor în afara marginilor de fluorescență. 5.2.6. Cu o spatulă metalică, se curăță silicagelul cuprins în zonele delimitate. Se introduce materialul scos de pe placă într-un balon de 50 ml. Se adaugă 15 ml de cloroform cald, se agită bine și se filtrează într-un balon cu filtru poros transferând silicagelul pe filtru. Se spală de trei ori cu cloroform cald (aproximativ 10 ml de fiecare dată) și se colectează filtratul într-un balon de 100 ml. Se evaporă
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
hexan (5.1.), 50 ml de 2-propanol (5.2.), câteva picături de soluție de fenolftaleină (5.16.) și o cantitate de soluție de hidroxid de sodiu (5.11) corespunzătoare conținutului de acizi liberi ai uleiului, majorată cu 0,3 %. Se agită energic timp de un minut, se adaugă 50 ml, se agită din nou și se lasă în repaus. După separare, se elimină stratul inferior de săpun. Se elimină, de asemenea, toate straturile intermediare (mucilagii, materii insolubile). Se spală soluția de
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
de soluție de fenolftaleină (5.16.) și o cantitate de soluție de hidroxid de sodiu (5.11) corespunzătoare conținutului de acizi liberi ai uleiului, majorată cu 0,3 %. Se agită energic timp de un minut, se adaugă 50 ml, se agită din nou și se lasă în repaus. După separare, se elimină stratul inferior de săpun. Se elimină, de asemenea, toate straturile intermediare (mucilagii, materii insolubile). Se spală soluția de hexan și de ulei neutralizat cu mai multe doze de 25-30
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
sub vid) cu ajutorul unui curent de azot pur până la eliminarea hexanului. 6.2. Purificarea prin trecere pe alumină Se prepară o suspensie de 15 g de alumină activată (5.8) în 50 ml de hexan (5.1) și se toarnă, agitând încontinuu, pe coloana cromatografică (4.7). Se procedează la tasarea aluminei și se lasă să scadă nivelul solventului până la 1 sau 2 mm deasupra absorbantului. Se toarnă cu grijă pe coloană o soluție de 5 g de ulei în 25
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
etanol, eter, petrol și acetonă pentru a elimina toate urmele de materii grase. Într-un balon conic (4.4) se introduc 30 g de pudră de siliciu (5.9). Se adaugă 60 ml de apă distilată. Se astupă și se agită energic timp de un minut. Se transferă imediat suspensia în distribuitor (4.12) și se ung plăcile curate cu un strat de 0,25 mm grosime. Se usucă plăcile timp de 15 minute, la aer, apoi timp de o oră
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
4.8). Dacă este vorba de o substanță grasă solidă, se dizolvă în 0,2 ml de hexan încălzind ușor, dacă este necesar. Se adaugă 20 ml de lipază (5.10) și 2 ml de soluție tampon (5.15). Se agită convenabil, dar prudent, apoi se adaugă 0,5 ml de soluție de colat de sodiu (5.14) și 0,2 ml de soluție de clorură de calciu (5.13). Se închide eprubeta cu dopul din sticlă rodată, se agită cu
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
Se agită convenabil, dar prudent, apoi se adaugă 0,5 ml de soluție de colat de sodiu (5.14) și 0,2 ml de soluție de clorură de calciu (5.13). Se închide eprubeta cu dopul din sticlă rodată, se agită cu prudență (se va evita umezirea dopului) și se pune eprubeta imediat în termostat (4.17), menținut la 40 ± 0,5°C. Se agită cu mâna timp de exact 1 minut. Se scoate eprubeta din termostat și se agită energic
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
soluție de clorură de calciu (5.13). Se închide eprubeta cu dopul din sticlă rodată, se agită cu prudență (se va evita umezirea dopului) și se pune eprubeta imediat în termostat (4.17), menținut la 40 ± 0,5°C. Se agită cu mâna timp de exact 1 minut. Se scoate eprubeta din termostat și se agită energic cu ajutorul unui agitator electric (4.19) timp de exact 2 minute. Se răcește imediat cu apă curentă, se adaugă 1 ml de acid clorhidric
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
se agită cu prudență (se va evita umezirea dopului) și se pune eprubeta imediat în termostat (4.17), menținut la 40 ± 0,5°C. Se agită cu mâna timp de exact 1 minut. Se scoate eprubeta din termostat și se agită energic cu ajutorul unui agitator electric (4.19) timp de exact 2 minute. Se răcește imediat cu apă curentă, se adaugă 1 ml de acid clorhidric (5.12) și 1 ml de eter dietilic (5.4). Se închide și se agită
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
agită energic cu ajutorul unui agitator electric (4.19) timp de exact 2 minute. Se răcește imediat cu apă curentă, se adaugă 1 ml de acid clorhidric (5.12) și 1 ml de eter dietilic (5.4). Se închide și se agită energic cu ajutorul unui agitator electric. Se lasă să se liniștească și se elimină stratul organic cu ajutorul unei seringi (4.10), dacă este necesar după centrifugare. 8.2. Separarea monogliceridelor prin cromatografie în strat subțire Se aplică extractul pe placa cromatografică
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
gazoasă conform indicațiilor din anexa X "A". 9. EXPRIMAREA REZULTATELOR Se determină compoziția fracțiunii de acizi grași în poziția 2, exprimând rezultatul cu o zecimală (nota 3). 10. NOTE Nota 1: Controlul activității lipazei Se prepară o emulsie de ulei agitând într-un agitator adecvat un amestec compus din 165 ml de soluție de gumă arabică (5.21), din 15 g de gheață pisată și 20 ml dintr-un ulei neutralizat (5.18). Într-un pahar de laborator (4.5) se
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
dar pot fi, de asemenea, preparate după cum urmează: Se răcesc 5 kg de pancreas de porc proaspăt la 0°C; se elimină grăsimea solidă și țesutul conjunctiv prezente, apoi se triturează într-un malaxor până la obținerea unei paste fluide. Se agită această masă într-un agitator (4.25) cu 2,5 litri de acetonă anhidră timp de 4-6 ore, apoi se centrifughează. Se efectuează alte trei extracții pe reziduu cu același volum de acetonă, apoi două extracții cu un amestec 1
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
aluminei Într-un recipient care se închide ermetic se pune alumina uscată în prealabil în cuptor la 380-400°C timp de 3 ore, se adaugă apă distilată până la 5 ml pentru 100 g de alumină, se închide rapid recipientul, se agita de mai multe ori, apoi se lasă timp de cel puțin 12 ore înainte de folosire. A.1.2 Controlul activității aluminei Se prepară o coloană cromatografică cu 30 g de alumină. Se acționează conform descrierii de la alin. 5.4. Se
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
3. Se răcește și se toarnă amestecul de reacție într-o pâlnie de decantare de 250 ml, se adaugă 35-40 ml de eter etilic, 100 ml de apă și 5-6 ml de soluție de clorură de sodiu de 10 %. Se agită și se așteaptă separarea straturilor: faza apoasă este transferată într-o a doua pâlnie de decantare și se extrage din nou cu 25 ml de eter etilic. Se adaugă ansamblului de extrase eterate 50 ml de eter de petrol la
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
și filtrată. Se adaugă 0,3 g (aproximativ 0,4 mililitri) de soluție de metilat de sodiu și se închide balonul la flacără. 5.2. Se menține balonul timp de două ore într-o baie la 85-92°C și se agită din când în când; limpezimea conținutului balonului este cea care, după sedimentarea glicerinei și a reziduului de reactivi, indică esterificarea. 5.3. Se aduce la temperatura ambiantă. Se deschide balonul în momentul folosirii esterilor metilici. Aceștia nu necesită altă manipulare
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]
-
prealabil în sulfat de sodiu și filtrată, se adaugă 5 ml din soluția de hidroxid de potasiu și câteva granule de cuarț pentru regularizarea fierberii. Se adaptează condensatorul cu reflux și se încălzește la flacără slabă timp de 5 minute agitându-se: saponificarea este completă atunci când soluția este limpede. Se răcește cu apă curentă și se detașează condensatorul. 5.2. Se adaugă două picături de indicator și, cu ajutorul unei seringi, 1 ml de sulfat dimetilic, lent. Se închide ermetic eprubeta și
jrc1835as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86985_a_87772]