1,634 matches
-
v), soluție mama saturata; 4. Aparatură. 4.1. Rasnita-mixer 4.2. Se scutură aparatul sau se agită magnetic 4.3. Hârtie de filtru canelata, Schleicher și Schull nr. 588 sau echivalent, diametru: 24 cm 4.4. Tub de sticlă pentru cromatografie (diametru intern: 22 mm, lungime: 300 mm), cu un robinet PTFE și un rezervor de 250 ml. 4.5. Evaporator rotativ în vacuum, cu un balon cu fund rotund de 500 ml 4.6. balon conic de 500 ml, cu
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
aparatul (4.2.) și se filtrează printr-o hârtie de filtru canelata (4.3.). Se înlătura primii 10 ml din filtrat și apoi se colectează 50 ml. 5.3. Curățarea coloanei Se inserează în capătul inferior al unui tub de cromatografie (4.4.) un dop de vata de bumbac sau de sticlă (3.9.), se umple două treimi din tub cu cloroform (3.2.) și se adaugă 5 g de sulfat de sodiu (3.10.). Se verifică dacă suprafață superioară a
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
un tub gradat de 10 ml (4.10.). Se concentrează soluția sub un jet de gaz inert (3.11.) și apoi se ajustează volumul până la 2 ml cu cloroform (3.2.) sau amestec de benzen/acetonitril (3.6.). 5.4. Cromatografie în strat subțire Se efectuează un spot pe o placă pentru cromatografie în strat subțire (4.8.), 2 cm de la marginea inferioară și la distanțe de 2 cm, cu volume indicate mai jos din soluția standard și din extract: - 10
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
un jet de gaz inert (3.11.) și apoi se ajustează volumul până la 2 ml cu cloroform (3.2.) sau amestec de benzen/acetonitril (3.6.). 5.4. Cromatografie în strat subțire Se efectuează un spot pe o placă pentru cromatografie în strat subțire (4.8.), 2 cm de la marginea inferioară și la distanțe de 2 cm, cu volume indicate mai jos din soluția standard și din extract: - 10, 15, 20, 30 și 40 æl din soluția standard de aflatoxina B
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
æl de extras este mai mare decât cea de 40 æl din soluția standard, se diluează extractul de 10 sau 100 de ori cu cloroform (3.2.) sau amestec de benzen/acetonitril (3.6.) înainte să fie supus din nou cromatografiei în strat subțire. 5.5.2. Măsurări prin fluorodensitometrie Se măsoară intensitatea fluorescentei spoturilor de aflatoxina B(1) cu fluorodensitometru (4.12.) la o excitație a lungimii de unda de 365 nm și o emisie a lungimii de unda de
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
indicate mai jos. 5.6.1. Tratare cu acid sulfuric Se pulverizează acid sulfuric (3.13.) pe cromatograma obținută la 5.4. Fluorescenta spoturilor de aflatoxina B(1) trebuie să devină, sub iradierea UV din albastră, galbenă. 5.6.2. Cromatografie bidimensionala implicând formarea de aflatoxina B(1)-hemiacetat (aflatoxina B(2)a) NB: Operațiunile descrise mai jos trebuie să fie efectuate urmând cu atenție diagramă din figură 3. NOTĂ(CTCE) Figură 3, se găsește în Monitorul Oficial al Românie, Partea
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
a determinării este 0,01 mg/kg (10 ppb). Metodă nu este aplicabilă furajelor ce conțin pulpa de fructe citrice. 2. Principiu Proba este supusă extracției cu cloroform. Extractul este filtrat și o porțiune alicota este prelevata și purificata prin cromatografie în coloana pe silicagel. Eluatul este evaporat și reziduul redizolvat într-un volum specific de cloroform sau într-un amestec de benzen cu acetonitril. O porțiune alicota din această soluție este supusă cromatografiei bidimensionale în strat subțire (CSS). Cantitatea de
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
porțiune alicota este prelevata și purificata prin cromatografie în coloana pe silicagel. Eluatul este evaporat și reziduul redizolvat într-un volum specific de cloroform sau într-un amestec de benzen cu acetonitril. O porțiune alicota din această soluție este supusă cromatografiei bidimensionale în strat subțire (CSS). Cantitatea de aflatoxina B(1) este determinată în baza iradierii cu radiație UV a cromatogramei, fie vizual fie prin fluorodensitometrie, prin comparare cu cantități cunoscute de aflatoxina standard B(1). Identitatea aflatoxinei B(1) extrasa
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
4. Metanol 3.5. Eter etilic anhidru, liber de peroxidaze 3.6. Amestec de benzen și acetonitril: 98/2 (v/v) 3.7. Amestec de cloroform (3.2.) și metanol (3.4.): 97/3 (v/v) 3.8. Silicagel pentru cromatografie în coloana, particule de mărime 0,705 până la 0,720 mm. 3.9. Vata de bumbac absorbanta, anterior degresata cu cloroform, sau vata de sticlă 3.10. Sulfat de sodiu, anhidru, granular 3.11. Gaz inert, de ex. azot 3
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
imaginare drepte ce formează un unghi de aproximativ 100°C între ele ce trec pin spoturile B și respectiv C. Se determina cantitatea de aflatoxina B(1) din extractul proba așa cum s-a indicat la 5.5. 5.4.4. Cromatografie suplimentară Se trasează pe o placă nouă (4.8.) două linii drepte paralele cu cele două margini drepte, așa cum s-a indicat în diagramă din figură 1, si se aplică la punctul A (vezi figură 1) 20 æl de extract
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
de extract este mai mare decât cea obținută cu 40 æl de soluție standard, se diluează extractul de 10 sau 100 de ori cu cloroform (3.2.) sau amestec de benzen/acetonitril (3.6.) înainte să fie supus din nou cromatografiei în strat subțire. 5.5.2. Măsurări prin fluorodensitometru Se măsoară intensitatea fluorescentei spoturilor de aflatoxina B(1) cu fluorodensitometru (4.12.), utilizând o excitație a lungimii de unda de 365 nm și o emisiune a lungimii de unda de
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 privind metode naţionale de analiza pentru controlul oficial al furajelor cu referire la conţinutul în aflatoxina*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165869_a_167198]
-
hidroxianalogi. 2. Principiu 2.1. Aminoacizi liberi Aminoacizii liberi sunt extrași cu acid clorhidric diluat. Macromoleculele de azot coextrase sunt precipitate cu acid sulfosalicilic și îndepărtate prin filtrare. Soluția filtrată este adusă la pH 2,20. Aminoacizii sunt separați prin cromatografie prin schimb ionic și se determina prin reacția cu ninhidrina și detectare fotometrica la o lungime de undă de 570 nm. 2.2. Aminoacizi totali Procedura aleasă depinde de aminoacizii examinați. Cist(e)ina și metionina trebuie să fie oxidate
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
Excesul de reactiv de oxidare este descompus cu disulfit de sodiu. Proba oxidata sau neoxidata este hidrolizata cu acid clorhidric (c = 6 mol/ l) timp de 23 de ore. Hidrolizatul este adus la pH 2,20. Aminoacizii sunt separați prin cromatografie cu schimbători de ioni și determinați prin reacția cu ninhidrina utilizând detectarea fotometrica la lungimea de unda de 570 nm (440 nm pentru prolina). 3. Reactivi Trebuie să se utilizeze apă bidistilata sau apă de calitate echivalentă (conductivitate 3.1
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
tampon (3.24). Dacă este utilizat un standard intern, se adăuga 1,00 ml standardul intern (3.27.3) pentru fiecare 100 ml soluție finală și se aduce la semn cu soluție tampon (3.24). Se trece la etapa de cromatografie în conformitate cu punctul 5.4. Dacă extractele existente nu sunt examinate în aceeași zi, acestea trebuie să fie păstrate la o temperatură mai scăzută de 5°C. 5.3. Determinarea aminoacizilor totali 5.3.1. Oxidare Se cântărește cu o precizie
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
-ul la 2,20, la temperatura camerei, utilizandu-se soluție de hidroxid de sodiu (3.17) și în final soluție de hidroxid de sodiu (3.18). Se continuă la punctul 5.3.4. 5.3.4. Soluția din proba pentru cromatografie Se transferă gradual hidrolizatul adus la pH (5.3.3.1 sau 5.3.3.2) cu soluție tampon citrat (3.24) într-un balon gradat de 200 ml și se aduce la semn cu tampon (3.24). Dacă intern
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
3.24). Dacă intern nu a fost încă utilizat un standard se adaugă 2,00 ml standard intern (3.27.3) și se aduce la semn cu tampon citrat (3.24). Se amestecă în întregime. Se procedează la etapa de cromatografie (5.4). Dacă soluțiile probei existente nu sunt examinate în aceeași zi, acestea trebuie să fie păstrate la o temperatură mai scăzută de 5°C. 5.4. Cromatografie Înainte de cromatografie se aduce extractul (5.2) sau hidrolizatul (5.3.4
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
citrat (3.24). Se amestecă în întregime. Se procedează la etapa de cromatografie (5.4). Dacă soluțiile probei existente nu sunt examinate în aceeași zi, acestea trebuie să fie păstrate la o temperatură mai scăzută de 5°C. 5.4. Cromatografie Înainte de cromatografie se aduce extractul (5.2) sau hidrolizatul (5.3.4) la temperatura camerei. Se agită amestecul și se filtrează o cantitate potrivită printr-un filtru cu membrana de 0,2 æm (4.5). Soluția clară obținută este supusă
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
24). Se amestecă în întregime. Se procedează la etapa de cromatografie (5.4). Dacă soluțiile probei existente nu sunt examinate în aceeași zi, acestea trebuie să fie păstrate la o temperatură mai scăzută de 5°C. 5.4. Cromatografie Înainte de cromatografie se aduce extractul (5.2) sau hidrolizatul (5.3.4) la temperatura camerei. Se agită amestecul și se filtrează o cantitate potrivită printr-un filtru cu membrana de 0,2 æm (4.5). Soluția clară obținută este supusă cromatografiei cu
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
Înainte de cromatografie se aduce extractul (5.2) sau hidrolizatul (5.3.4) la temperatura camerei. Se agită amestecul și se filtrează o cantitate potrivită printr-un filtru cu membrana de 0,2 æm (4.5). Soluția clară obținută este supusă cromatografiei cu schimbători de ioni, utilizandu-se un analizor de aminoacizi (4.9). Injecția poate fi executată manual sau mecanic. Este important că aceeași cantitate de soluție ±0,5% să fie adăugată la coloană, pentru că analiza de standarde și probe, cu excepția
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
În general frecvență injecțiilor depinde de stabilitatea reactivului ninhidrina și a sistemului de analiză. Standardul sau proba este diluata cu tampon citrat (3.24) pentru a realiza o arie a picului standardului de 30-200% din aria picului probei de aminoacid. Cromatografia aminoacizilor se modifică ușor în conformitate cu tipul de analizor întrebuințat și rășina utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear la
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
30-200% din aria picului probei de aminoacid. Cromatografia aminoacizilor se modifică ușor în conformitate cu tipul de analizor întrebuințat și rășina utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear la schimbările privind cantitățile de aminoacizi adăugați la coloană. În timpul etapei de cromatografie raportul dintre partea superioară și partea inferioară a curbei menționate mai jos, se aplică atunci când este analizată o soluție echimolară (a
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
utilizată. Sistemul ales trebuie să permită separarea aminoacizilor unii de alții și din materiile pozitive la ninhidrina. În cursul operațiunii, sistemul cromatografie trebuie să dea un răspuns linear la schimbările privind cantitățile de aminoacizi adăugați la coloană. În timpul etapei de cromatografie raportul dintre partea superioară și partea inferioară a curbei menționate mai jos, se aplică atunci când este analizată o soluție echimolară (a aminoacizilor existenți determinați). Această soluție echimolară trebuie să conțină cel putin 30% din sarcina maximă a fiecărui aminoacid ce
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
vezi 5.3.4). Limitele răspunsului linear al aparatului trebuie verificate pentru toți aminoacizii. Soluția etalon este diluata cu tampon citrat, pentru a se realiza picul ariilor din mijlocul câmpului. 9.2. Atunci când este utilizat pentru analizarea hidrolizatelor, echipamentul de cromatografie lichidă de înaltă performanță, condițiile experimentale trebuie să fie optimizate în conformitate cu recomandările fabricantului. 9.3. Prin aplicarea metodei pentru furaje ce conțin mai mult de 1% clorura (concentrate, furaje minerale, furaje suplimentare) poate apare o subevaluare a metioninei și deci
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
1,N^4-dioxid) 1. Scop și aplicabilitate Această metodă are ca scop determinarea olaquindoxului din furaje. Limită minimă a determinării este de 5 mg/kg. 2. Principiu Proba este extrasa cu ajutorul amestecului de apa-metanol. Conținutul în olaquindox este determinat prin cromatografie lichidă de înaltă performanță în faza inversă (HPLC) ce utilizează un detector cu UV. Atunci cand uleiul sau grăsimea face obiectul unei testări calitative ulterioare se înlocuiesc fragmentele de piatră ponce cu bile de sticlă. 3. Reactivi 3.1. Metanol 3
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]
-
proaspăt preparate, în fiecare zi. 4. Aparatură 4.1. Baie de ultrasunete 4.2. Agitator mecanic 4.3. Echipament HPLC cu detector cu ultraviolete, cu lungimi de unda variabile sau detector cu sistem de diode 4.3.1. Coloana de cromatografie lichidă: 350 mm x 4 mm, C 18, 10 æm sau o coloană echivalentă. 4.4. Filtre cu membrana de 0,45 æm 5. Metodă de lucru Notă: Olaquindoxul este sensibil la lumină. Toate procedurile se efectuează sub lumina difuza
NORMĂ VETERINARA din 10 iunie 2004 ce stabileste metode naţionale de analiza pentru determinarea aminoacizilor, uleiurilor şi grasimilor brute şi a olaquindoxului din furaje*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/165871_a_167200]