4,023 matches
-
substituții de un singur aminoacid în catenele polipeptidice colineare. Asemenea gene supuse mutației sunt invizibile pentru detecția convențională, astfel că identificarea lor a devenit total dependentă de selecția unor probabili / posibili candidați sau pe baza unor trăsături morfologice asociate fenotipului transformat. Identificarea genelor implicate în cancer se va putea realiza pe baza lungirii listei candidaților genici plauzibili prin analiza variantelor paraloge ale genelor tumorale recesive care sunt gene supresoare de tumori. Dar autorii au întâmpinat dificultăți în identificarea de noi gene
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
și pentru rearanjări cromozomale, ambele evenimente promovând exprimarea lui c-myc, fie la nivel înalt, fie într-un moment nepotrivit al activității celulare. Transferul genei c-myc printr-un vector de expresie într-o celulă normală, convertește eficient această celulă într-una transformată. Acolo unde funcțiile lor sunt identificate, proteinele codificate de protooncogene apar a fi asociate cu căile de semnalizare prin care celulele primesc și execută instrucțiuni referitoare la procesele de proliferare celulară. Mutațiile care activează aceste gene sunt fie mutații structurale
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
proliferarea celulelor țintă în cultură. Se înțelege de la sine că producția anormală a unui factor de creștere, realizată ca urmare a unei dereglări celulare induce stimularea continuă a proliferării celulare, culminând cu transformarea malignă. Multe celule Imunogenetică și Oncogenetică 333 transformate produc factori de creștere, susținând ipoteza lui G. Todaro, enunțată în anul 1977, potrivit căreia stimularea autocrină a creșterii celulare poate conduce la transformare malignă a celulei. Celulele infectate cu un retrovirus de la maimuță, purtător al oncogenei sis, se transformă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
cu greutate moleculară mai mare și care se acumulează pe suprafața celulei și pot participa în semnalizarea intercelulară. Formele solubile ale acestor factori sunt eliberate prin clivajul proteolitic al proteinelor precursoare. TGF-α a fost identificat în diferite tipuri de celule transformate. Supraexpresia TGF-α induce tumori în șoarecii transgenici. El este exprimat frecvent în carcinoame umane care exprimă totodată nivele înalte de receptor pentru EGF, ceea ce sugerează importanța funcțională a acestei căi autocrine, în oncogeneză, la om. TGF-β este considerat atât ca
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
a oncogenei celulare corespunzătoare. Diferența dintre acestea constă în substituția unui singur aminoacid în proteina RAS, în poziția 12: în proteina sintetizată sub direcția protooncogenei normale în această poziție se află glicina, iar în proteina oncogenei H-ras, din linia celulară transformată EJ, se află valina. Studiile ulterioare asupra oncogenelor ras din diferite tumori au evidențiat faptul că mutațiile punctiforme care conduc la substituția unui singur aminoacid reprezintă o caracteristică universală a activării ras. Multe substituții ale aminoacidului glicina din poziția 12
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
au caracter policlonal, deoarece se dezvoltă dintr-un număr mare de celule care au suferit evenimente independente de transformare. Neoplaziile induse de virusurile netransductoare (ALV), cele induse chimic și neoplasmele umane se dezvoltă prin expansiunea clonală a unei singure celule transformate. Inițial, caracterul mono-, respectiv policlonal al neoplaziilor a fost determinat prin analiza situsurilor de integrare a provirusului în limfoamele induse de ALV. Analiza ADN din celulele leucemice arată că provirusul ALV are situs unic de integrare în ADN al fiecărei
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
limfoamele induse de ALV. Analiza ADN din celulele leucemice arată că provirusul ALV are situs unic de integrare în ADN al fiecărei neoplazii. Situsul unic de integrare a ADN proviral în celulele leucemice și ale limfoamelor arată că toate celulele transformate au apărut din celule singulare infectate, adică au origine monoclonală, ceea ce indică frecvența foarte scăzută a evenimentelor de transformare. Specificitatea situsului de integrare a generat ipoteza că neoplazia a fost indusă de integrarea ADN proviral la un locus țintă particular
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
una sau mai multe gene care acționează ca reglatori negativi ai fenotipului neoplazic. Acestea au fost denumite gene supresoare de tumori (GST). Mulți dintre hibrizii rezultați prin fuziunea celulelor normale cu cele transformate pot prezenta încă unele dintre proprietățile celulei transformate, cum ar fi pierderea inhibiției de creștere dependentă de densitatea celulelor, sau pierderea dependenței de ancorare, ceea ce se poate explica prin realizarea doar parțială a supresiei fenotipului tumorigenic al hibrizilor, nefiind o reversie completă a transformării celulare spre fenotipul normal
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
specii: La Sancta Natura Fara da Se! Deosebit de semnificativă a fost constatarea că hibrizii celulari netumorigeni redobândesc fenotipul deplin tumorigenic, dacă linia celulară normală participantă la formarea acestora pierde anumiți cromozomi. Astfel, hibrizii celulari dintre celule HeLa (linie celulară umană transformată, derivată dintr-un carcinom de col uterin și prelevată de la pacienta Helen Lauren) și fibroblastele umane normale, prezintă fenotip netumorigen. Dacă însă, din hibrizi este pierdut cromozomul 11 aportat de fibroblastele normale, hibrizii redobândesc fenotipul tumorigen deplin. De aici s-
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
care codifică pentru această proteină a fost considerată ca o genă cu efect preponderent transformant, adică o protooncogenă mutantă, de unde și prefixul t. În celulele normale, nivelul cantitativ foarte scăzut al acestei proteine a generat dificultatea identificării sale. În celulele transformate, ca și în celulele supuse iradierii, cantitatea proteinei P53 crește substanțial, ceea ce a permis izolarea, purificarea și caracterizarea sa. Proteina P53, cu localizare nucleară are 393 aminoacizi și este esențială pentru supraviețuirea celulelor normale. Ea reprezintă un factor de transcriere
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
o asemenea afirmație rămâne doar o simplă speculație (Stanbridge, 1990). Este însă bine cunoscut faptul că cele mai multe celule hibride netumorigenice păstrează proprietățile lor transformate în culturi in vitro. De aici autorul trage concluzia că activarea oncogenelor implicate în conferirea fenotipului transformat contribuie și este de fapt necesară pentru procesul de transformare, dar rămâne insuficientă pentru progresia acestuia spre starea de malignizare. Analiza țesuturilor care reprezintă stadii preneoplastice în cancerele umane în modele experimentale de carcinogeneză a pielii, precum și modelul șoarecelui transgenic
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
malignizării să poată restabili toate mecanismele de control normal. Defectele genetice care au stat la baza genezei malignizării pot fi depășite și efectele lor anulate prin inducerea diferențierii care stopează multiplicarea celulară. Experiențele de fuziune a celulelor normale cu celule transformate, prin care s-a arătat că fenotipul transformant poate fi adeseori corectat prin fuziunea in vitro a celor două tipuri de celule, au reprezentat dovada că tumorigeneza implică nu numai oncogenele dominant activate ci și mutațiile recesive, de pierdere a
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
Ștefănescu și Călin, 1996). Constatarea heterogenității celulare a tumorilor a generat conceptul liniei stem tumorale care explică o asemenea heterogenitate prin labilitatea genetică a celulelor maligne, precum și prin mecanismele selective care acționează asupra populațiilor celulare derivate dintr-o singură celulă transformată. Cariotipul celor mai multe celule maligne suferă schimbări gradate, evoluând cu o anumită rată. Cercetările lui Gebhart și colaboratorii săi (1986), efectuate pe linia celulară ERBT 34, derivată dintr-o neoplazie mamară, au arătat că aceasta are un cariotip extrem de stabil, dar
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
un rol important în tumorigeneză. În plus, demonstrarea faptului că într-o anumită tumoră toate celulele neoplazice prezintă adesea o aceeași modificare cariotipică sau modificări înrudite a stat la baza enunțării concluziei că majoritatea tumorilor derivă dintr-o singură celulă transformată malign, căreia modificarea genetică specifică somatică i-a conferit avantajul selectiv de a se extinde ca o clonă celulară cu origine unicelulară. În plus, demonstrarea faptului că, în general, anomaliile cariotipice sunt mult mai extinse în tumorile mai avansate decât
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
tumoral a fost prima alterare raportată în cancerele umane (Feinberg și Vogelstein, 1983). Un studiu recent a utilizat tehnica de imunocaptare urmată de analiza „DNA microarrays” pentru identificarea profilului de metilare al cromozomilor umani. La nivelul genomului celulelor primare și transformate s-a identificat o hipometilare genomică extensivă a regiunilor sărace în gene (Weber și colab., 2005). În timpul dezvoltării neoplazice au fost raportate trei grade de hipometilare ale ADN genomic, care cresc direct proporțional cu progresia leziunilor canceroase, de la proliferarea benignă
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
celulare, cu celule normale, telomerele cromozomilor își reduc progresiv lungimea, pe măsură ce au loc mai multe transferuri pe mediul de cultură și, atunci când ating o lungime minimă critică, celula încetează a se mai divide și moare. Dimpotrivă, celulele canceroase sau potențial transformate malign sunt „imortalizate” și pot crește indefinit, dacă sunt transferate periodic pe mediu nou de cultură. O trăsătură comună, deși nu universală, a celulelor imortalizate este aceea că ele au activitate telomerazică, dacă nu foarte evidentă, cel puțin detectabilă. Foarte
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
regiunea T-ADN a plasmidului Ti este prezentă în genomul celulelor din tumorile de colet, iar acest T-ADN este de fapt, TIP-ul. În anul 1980, Guyon și colaboratorii dezvoltă conceptul opinei, potrivit căruia sinteza opinelor de către celulele vegetale transformate creează o nișă ecologică pentru tulpina infectantă de Agrobacterium. În anul 1983, Zambryski și colaboratorii obțin prima plantă transformată genetic, utilizând pentru transferul genei de interes un vector plasmidic derivat din plasmidul Ti de A. tumefaciens. După anul 1986, prin
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
este de fapt, TIP-ul. În anul 1980, Guyon și colaboratorii dezvoltă conceptul opinei, potrivit căruia sinteza opinelor de către celulele vegetale transformate creează o nișă ecologică pentru tulpina infectantă de Agrobacterium. În anul 1983, Zambryski și colaboratorii obțin prima plantă transformată genetic, utilizând pentru transferul genei de interes un vector plasmidic derivat din plasmidul Ti de A. tumefaciens. După anul 1986, prin cercetările efectuate de Zupan și colaboratorii (2000), Gelvin (2000) și Tzfira și Citovsky (2002) se realizează elucidarea procesului de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
află gene implicate în sinteza enzimelor pentru preluarea și catabolizarea opinelor corespunzătoare unor anumite tipuri de tulpini de Agrobacterium a căror sinteză este controlată de T-ADN pe care aceste tulpini îl conțin. Astfel, producția de opine în celulele vegetale transformate creează o nișă ecologică distinctă pentru tulpina de Agrobacterium care infectează planta (Guyon și colab., 1980). Tipul de opine produse în țesuturile infectate a reprezentat criteriul de clasificare a tulpinii infectante de Agrobacterium în octopină, nopalină și agropină, dar acestea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
oncogenelor reprezintă o altă strategie în rezistența mediată prin silențiere genică posterioară transferului T-ADN (PTGS) care interferă cu dezvoltarea tumorilor de colet, urmare a integrării T-ADN în genomul plantei. Expresia bacteriooncogenelor iaaM, iaaH și ipt în celulele plantelor transformate se asociază cu sinteza rapidă a auxinei și citokininei care inițiază și asigură progresia tumorigenezei. Aceste oncogene prezintă un înalt conservatorism de secvență (~90%) la toate sușele de A. tumefaciens care au fost caracterizate (Escobar și colab., 2001). Plantele transformate
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de laborator. Transformanții de Arabidopsis au fost inoculați in vitro la nivelul rădăcinilor cu A. tumefaciens A 208, pe când la tomate s-a realizat inoculare la nivelul tulpinii cu sușa A. tumefaciens 20W-5A. Trei dintre cele șase plante de Arabidopsis transformate au prezentat abolirea completă a tumorigenezei (fig. 33.8). Multe plante transformate au prezentat un fenotip de silențiere caracteristic exprimării ARN autocomplementar. De remarcat că două ținte ARN diferite au fost silențiate simultan cu o mare eficiență (Chuang și Meyerowitz
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
rădăcinilor cu A. tumefaciens A 208, pe când la tomate s-a realizat inoculare la nivelul tulpinii cu sușa A. tumefaciens 20W-5A. Trei dintre cele șase plante de Arabidopsis transformate au prezentat abolirea completă a tumorigenezei (fig. 33.8). Multe plante transformate au prezentat un fenotip de silențiere caracteristic exprimării ARN autocomplementar. De remarcat că două ținte ARN diferite au fost silențiate simultan cu o mare eficiență (Chuang și Meyerowitz, 2000; Smith și colab., 2000; Waterhouse și colab., 1998). Nu au fost
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
generat tumori și doar două linii transgenice au generat între 0,0 și 1,5% tumori. Același demers experimental s-a realizat și la tomate, constatându-se apariția de tumori nediferențiate la toate plantulele de tip sălbatic inoculate, în timp ce linia transformată 01/6 a fost complet rezistentă la toate sușele de A. tumefaciens testate, cu anularea completă a tumorigenezei. Această linie a prezentat totodată o cosegregare perfectă (100%) între activitatea GUS și manifestarea condiției patologice, pe de o parte, și absența
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
de Agrobacterium să cauzeze sinteza în celulele tumorale de colet a unor opine utile pentru supraviețuirea patogenului. Opinele pot fi utilizate ca unică sursă de carbon și/sau azot pentru perpetuarea tulpinii de Agrobacterium. Principiul este că o celulă vegetală transformată sintetizează acele opine pe care le poate utiliza bacteria. 33.12. Bacteria nu pătrunde în celula vegetală, ci doar transferă o parte a plasmidului Ti în aceasta, parte care ajunge în nucleul celulei-gazdă. Această porțiune a plasmidului Ti care pătrunde
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]
-
diferențierii în alte țesuturi. În afara regiunii T sunt dispuse genele implicate în inițierea oncogenezei dintre care unele sunt legate de transferul ADN-T. Tot în afara regiunii T se află gene ai căror produși asigură catabolismul opinei produsă de celula vegetală transformată. Este surprinzător să constatăm că, în fapt, celula vegetală transformată malign capătă multe proprietăți pe care le întâlnim în celula animală transformată malign: dediferențierea, redobândirea capacității de proliferare pe care o au celulele embrionare și meristematice, numai că, în cazul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de oncogenetică și oncogenomică. Partea II by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91988_a_92483]