5,916 matches
-
referință. Interpretare: Rezultatele testului de neutralizare și titrul virusului utilizat în test sunt înregistrate după trei până la șase zile de incubație la 37°C. Titrurile de ser sunt considerate negative dacă nu există neutralizare la o diluție de 1/2 (ser nediluat). Febră Aftoasa A. Prelevarea și testarea de probe din esofag/faringe vor fi efectuate în conformitate cu următorul protocol: Reactivi: Anterior recoltării de probe, este preparat mediul de transport. Sunt repartizate volume de căte 2 ml astfel încât numărul de containere să
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
să conțină material celular vizibil. Trebuie să se evite mișcările brutale ce provoacă sângerări. Probe de la anumite animale pot fi puternic contaminate cu conținut ruminal. Asemenea probe trebuie să fie eliminate și gură animalului spălata cu apă, sau preferabil cu ser fiziologic înainte de a repeta eșantionarea. Tratare de probe: Fiecare proba colectată în cupă probang-ului este examinată calitativ și se adaugă 2 ml într-un volum egal de mediu de transport, într-un container ce rezista congelării. Containerele sunt închise etanș
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
aceste condiții și titrul variază puțin pe o perioadă de luni de zile. Procedeu: Testul este efectuat în plăci de microtitrare cu fund plat destinate pentru culturi tisulare, utilizând celule susceptibile de tipul IB-RS-2, BHK-21 sau celule renale de vițel. Serurile pentru test sunt diluate 'bc în mediul pentru culturi celulare fără ser cu adăugarea a 100 UI/ ml neomicina sau alt antibiotic corespunzător. Serurile sunt inactivate la 56°C timp de 30 de minute și sunt utilizate cantități de 0
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
zile. Procedeu: Testul este efectuat în plăci de microtitrare cu fund plat destinate pentru culturi tisulare, utilizând celule susceptibile de tipul IB-RS-2, BHK-21 sau celule renale de vițel. Serurile pentru test sunt diluate 'bc în mediul pentru culturi celulare fără ser cu adăugarea a 100 UI/ ml neomicina sau alt antibiotic corespunzător. Serurile sunt inactivate la 56°C timp de 30 de minute și sunt utilizate cantități de 0,05 ml pentru a prepara diluții binare (duble) în serie pe plăci
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
destinate pentru culturi tisulare, utilizând celule susceptibile de tipul IB-RS-2, BHK-21 sau celule renale de vițel. Serurile pentru test sunt diluate 'bc în mediul pentru culturi celulare fără ser cu adăugarea a 100 UI/ ml neomicina sau alt antibiotic corespunzător. Serurile sunt inactivate la 56°C timp de 30 de minute și sunt utilizate cantități de 0,05 ml pentru a prepara diluții binare (duble) în serie pe plăci de microtitrare utilizând anse de diluție de 0,05 ml. De asemenea
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
sunt utilizate cantități de 0,05 ml pentru a prepara diluții binare (duble) în serie pe plăci de microtitrare utilizând anse de diluție de 0,05 ml. De asemenea, virusul titrat în prealabil se diluează în mediul de cultură fără ser conținând 100 TCID 50/0,05 ml, apoi se adaugă în fiecare godeu. Urmează incubarea timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu de cultură celulară ce conține ser fără anticorpi față de virusul febrei aftoase și apoi placă se închide ermetic. Plăcile sunt incubate la 37°C; monostratul este complet în 24 de ore. Efectul citopatic este, în mod obișnuit, suficient dezvoltat la 48 de ore pentru o citire
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
fi fixate și colorate pentru citire macroscopica, utilizând spre exemplu 10% formol salin și 0,05% albastru de metilen. Martori: Martorii pentru fiecare test includ antiser omolog cu titrul cunoscut, o cultură de celule martor, un martor de toxicitate a serului, un martor de mediu și o titrare de virus din care este calculată cantitatea actuala de virus utilizată în testare. Interpretare: Godeurile cu efect citopatic prezent sunt considerate că infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate că și corespunzătoare diluției
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de mediu și o titrare de virus din care este calculată cantitatea actuala de virus utilizată în testare. Interpretare: Godeurile cu efect citopatic prezent sunt considerate că infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate că și corespunzătoare diluției finale de ser prezenta în amestecurile ser/virus la punct final 50% estimat în conformitate cu metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle Pathologic und Pharmokologic, 162, 480). Testele sunt considerate a fi valide când cantitatea actuala de virus utilizată per godeu în testare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
titrare de virus din care este calculată cantitatea actuala de virus utilizată în testare. Interpretare: Godeurile cu efect citopatic prezent sunt considerate că infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate că și corespunzătoare diluției finale de ser prezenta în amestecurile ser/virus la punct final 50% estimat în conformitate cu metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle Pathologic und Pharmokologic, 162, 480). Testele sunt considerate a fi valide când cantitatea actuala de virus utilizată per godeu în testare este între 101,5
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle Pathologic und Pharmokologic, 162, 480). Testele sunt considerate a fi valide când cantitatea actuala de virus utilizată per godeu în testare este între 101,5 și 102,5 TCID50 și când titrul serului de referință este binar în raport cu titrul așteptat, estimat din manieră titrărilor anterioare. Cand valorile martorilor depășesc aceste limite, testările se repetă. La un titru final de 1/11 sau mai putin sunt considerate negative. C. Determinarea și cuantificarea de anticorpi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
FMDV) utilizat la o concentrație optimă predeterminata în tampon carbonat/bicarbonat, pH 9,6. Antigenele sunt preparate din tulpini selectate de virus multiplicat pe monostraturi de celule BHK-21. Supernatantul nepurificat este utilizat și pretitrat în conformitate cu protocolul, dar fără adăugare de ser, pentru a da o diluție care după adăugarea unui volum egal de PBST (tampon fosfat salin conținând 0,05% Tween -20 și indicator roșu fenol) ce va da o densitate optică între 1,2 și 1,5. Virușii pot fi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
1,5. Virușii pot fi utilizați inactivați. PBST este utilizat că diluant. Antiserul de porc de Guineea este preparat prin inocularea porcilor de Guineea cu antigen 146S al fiecărui serotip. O concentrație optimă predeterminata este preparată în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Serurile de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
utilizați inactivați. PBST este utilizat că diluant. Antiserul de porc de Guineea este preparat prin inocularea porcilor de Guineea cu antigen 146S al fiecărui serotip. O concentrație optimă predeterminata este preparată în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Serurile de testat sunt diluate în PBST
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
O concentrație optimă predeterminata este preparată în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Serurile de testat sunt diluate în PBST. Procedeu: 1. Plăcile ELISA sunt căptușite cu 50 μl de seruri antivirale de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
preparată în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Serurile de testat sunt diluate în PBST. Procedeu: 1. Plăcile ELISA sunt căptușite cu 50 μl de seruri antivirale de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2. Cincizeci de microlitri din fiecare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Serurile de testat sunt diluate în PBST. Procedeu: 1. Plăcile ELISA sunt căptușite cu 50 μl de seruri antivirale de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2. Cincizeci de microlitri din fiecare ser de testat în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
cu peroxidaza din hrean este utilizată la o concentrație optimă în PBST conținând 10% ser bovin normal și 5% ser de iepure normal. Serurile de testat sunt diluate în PBST. Procedeu: 1. Plăcile ELISA sunt căptușite cu 50 μl de seruri antivirale de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2. Cincizeci de microlitri din fiecare ser de testat în diluții serice în baza 2, în duplicat, pornind de la 1/4 sunt preparați în plăci de microtitrare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de iepure normal. Serurile de testat sunt diluate în PBST. Procedeu: 1. Plăcile ELISA sunt căptușite cu 50 μl de seruri antivirale de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2. Cincizeci de microlitri din fiecare ser de testat în diluții serice în baza 2, în duplicat, pornind de la 1/4 sunt preparați în plăci de microtitrare cu godeuri multiple cu fund sub forma literei "U" (plăci carrier). Sunt adăugați cincizeci de microlitri dintr-o doză constantă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
godeuri multiple cu fund sub forma literei "U" (plăci carrier). Sunt adăugați cincizeci de microlitri dintr-o doză constantă de antigen în fiecare godeu și amestecul este lăsat peste noapte la 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
antigen în fiecare godeu și amestecul este lăsat peste noapte la 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor ELISA legat la un microcomputer. Martori: Pentru fiecare antigen se utilizează 40 de godeuri ce nu conțin ser dar conțin antigen diluat în PBST; o diluție binara în serie, dublă de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție finală a serului de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
un microcomputer. Martori: Pentru fiecare antigen se utilizează 40 de godeuri ce nu conțin ser dar conțin antigen diluat în PBST; o diluție binara în serie, dublă de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție finală a serului de testat ce dă 50% din valoarea medie a densităților optice înregistrată în godeurile de control al virusului unde serul de testat este absent. Titrurile superioare valorii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
conțin ser dar conțin antigen diluat în PBST; o diluție binara în serie, dublă de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție finală a serului de testat ce dă 50% din valoarea medie a densităților optice înregistrată în godeurile de control al virusului unde serul de testat este absent. Titrurile superioare valorii de 1/40 sunt considerate pozitive. Referințe: Hamblin C., Barnett ITR și Hedger
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]