6,210 matches
-
acidul lipoic și coenzima A. -*-aminoaciddecarboxilazele au o mare specificitate și se găsesc localizate în special în ficat. Coenzima acestor liaze este piridoxal-5 fosfatul. În urma decarboxilării aminoacizilor, în organism se formează amine biogene: -aldehidliazele scindează resturi de aldehidă din molecula substratului. O liază importantă"cheie" întâlnită în transformările catabolice ale glucozei (glicoliză) este fructozo-1,6-difosfat liaza sau aldolaza care catalizează scindarea fructozo-1,6-difosfatului în două molecule de fosfați de trioză: 6.6.4.2. C-O Liaze-catalizează scindarea legăturii carbon-oxigen în
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
enzimele care catalizează reacțiile de izomerizare. După tipul de izomerie, aceste enzime formează mai multe subclase: epimeraze, izomeraze cis-trans, oxidoreductaze intramoleculare, transferaze intramoleculare (mutaze). 6.6.5.1. Racemazele sunt izomerazele care catalizează interconversia formelor L și D ale unui substrat, cel mai adesea un aminoacid: D alanina L alanina alanin racemaza Aceste racemizări sunt necesare în cazul când organismul e nevoit să transforme anumite substanțe nenaturale ingerate în forme racemice asimilabile, pentru care dispune de enzimele respective. Epimerazele catalizează reacțiile
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
lor. De exemplu, UDP glucozo-4epimeraza catalizează interconversia UDP-glucozei în UDP-galactoză: UDP Glucoza UDP-Galactoza 4 epimeraza Enzima ribulozofosfat -3-epimeraza catalizează reacția de izomerizare a D-ribulozo-5 fosfatului în D-xilulozo-5-fosfat: 6.6.5.2. Izomeraze cis-trans catalizează reacțiile de izomerie cistrans a unui substrat. De exemplu, enzima maleat cis-transizomeraza catalizează conversia acidului maleic (izomer cis) în acid fumaric (izomer trans): 6.6.5.3. Oxidoreductaze intramoleculare această subclasă cuprinde izomerazele care catalizează interconversia grupărilor aldehidă și cetonă din molecula unui substrat; astfel de interconversii
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
cistrans a unui substrat. De exemplu, enzima maleat cis-transizomeraza catalizează conversia acidului maleic (izomer cis) în acid fumaric (izomer trans): 6.6.5.3. Oxidoreductaze intramoleculare această subclasă cuprinde izomerazele care catalizează interconversia grupărilor aldehidă și cetonă din molecula unui substrat; astfel de interconversii au loc între aldoze și cetoze, când gruparea aldehidă se reduce la gruparea alcool primar, iar gruparea alcool secundar se oxidează la gruparea cetonă: 6.6.5.4.Transferaze intramoleculare (mutaze) sunt izo meraze care catalizează transferul
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
ligaze (carboxilaze) catalizează formarea legăturilor C-C, conform reacției generale Reacțiile de carboxilare sunt importante în fotosinteză, în biosinteză și în ciclul Krebs. Carboxilazele au drept coenzimă biotina care activează CO2 și-l transportă, sub forma unui complex Biotin-enzimă-COOpe un substrat activat de acil-coenzima A, pe care-l carboxilează. Acetil-coenzima A carboxilaza, catalizează reacția de formare a malonil-CoA: Acestă reacție inițieză biosinteza acizilor grași pe cale citoplasmatică. Toate reacțiile de biosinteză în care se crează legături covalente au loc pe seama energiei furnizate
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
reacție inițieză biosinteza acizilor grași pe cale citoplasmatică. Toate reacțiile de biosinteză în care se crează legături covalente au loc pe seama energiei furnizate de ATP. 6.7. Exprimarea activității enzimatice Determinarea activității enzimatice are la bază ca principiu dozarea cantității de substrat transformată în unitatea de timp sub acțiunea unui produs biologic cu activitate enzimatică sau a unei enzime în stare pură. Cantitatea de substrat transformată se apreciază mai ales după cantitatea de produși finali formați în urma reacției enzimatice, dar sunt situații
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
ATP. 6.7. Exprimarea activității enzimatice Determinarea activității enzimatice are la bază ca principiu dozarea cantității de substrat transformată în unitatea de timp sub acțiunea unui produs biologic cu activitate enzimatică sau a unei enzime în stare pură. Cantitatea de substrat transformată se apreciază mai ales după cantitatea de produși finali formați în urma reacției enzimatice, dar sunt situații când acesta se poate face prin determinarea cantității netransformate de substrat. Metodele fizico-chimice folosite în aceste cazuri pentru dozarea compușilor respectivi sunt metode
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
cu activitate enzimatică sau a unei enzime în stare pură. Cantitatea de substrat transformată se apreciază mai ales după cantitatea de produși finali formați în urma reacției enzimatice, dar sunt situații când acesta se poate face prin determinarea cantității netransformate de substrat. Metodele fizico-chimice folosite în aceste cazuri pentru dozarea compușilor respectivi sunt metode spectrofotometrice în VIZ, UV, IR mai puțin cele titrimetrice sau gravimetrice. Activitatea unei enzime se exprimă în unități enzimatice notate cu "U", adică prin cantitatea de enzimă care
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
pentru dozarea compușilor respectivi sunt metode spectrofotometrice în VIZ, UV, IR mai puțin cele titrimetrice sau gravimetrice. Activitatea unei enzime se exprimă în unități enzimatice notate cu "U", adică prin cantitatea de enzimă care catalizează transformarea unui micromol(μmol de substrat în timp de un minut. Determinările de activitate enzimatică se efectuează în condiții standard, adică la 250 C, în intervalul optim de pH și la starea de substrat. Puritatea unei enzime se poate afla prin determinarea activității specifice a acesteia
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
adică prin cantitatea de enzimă care catalizează transformarea unui micromol(μmol de substrat în timp de un minut. Determinările de activitate enzimatică se efectuează în condiții standard, adică la 250 C, în intervalul optim de pH și la starea de substrat. Puritatea unei enzime se poate afla prin determinarea activității specifice a acesteia, redată prin numărul de unități enzimatice corespunzător unui mg sau kg de proteină. Activitatea moleculară se exprimă prin numărul de moli de substrat transformat într-un minut de către
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
pH și la starea de substrat. Puritatea unei enzime se poate afla prin determinarea activității specifice a acesteia, redată prin numărul de unități enzimatice corespunzător unui mg sau kg de proteină. Activitatea moleculară se exprimă prin numărul de moli de substrat transformat într-un minut de către un mol de enzimă, la o concentrație optimă de substrat. Activitatea unei enzime în soluție este redată prin unități de activitate corespunzătoare unității de volum: U/l, mU/ml. Activitatea enzimatică se mai poate exprima
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
specifice a acesteia, redată prin numărul de unități enzimatice corespunzător unui mg sau kg de proteină. Activitatea moleculară se exprimă prin numărul de moli de substrat transformat într-un minut de către un mol de enzimă, la o concentrație optimă de substrat. Activitatea unei enzime în soluție este redată prin unități de activitate corespunzătoare unității de volum: U/l, mU/ml. Activitatea enzimatică se mai poate exprima și prin unități catalitice (kat) care redau cantitatea de enzimă ce catalizează transformarea unui mol
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
unei enzime în soluție este redată prin unități de activitate corespunzătoare unității de volum: U/l, mU/ml. Activitatea enzimatică se mai poate exprima și prin unități catalitice (kat) care redau cantitatea de enzimă ce catalizează transformarea unui mol de substrat în timp de un minut. 6.8. APLICAȚIE PRACTICĂ 6.8.1. Reacții de evidențiere a activității enzimelor 6.8.1.1. Evidențierea activitații peroxidazei Peroxidazele sunt enzime care fac parte din clasa oxidoreductaze. Sunt distribuite în diferite țesuturi și
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
de sânge proaspăt recoltat cu aproximativ 5 cm3 de apă distilată. Mod de lucru: Se introduc într-o eprubetă câteva cristale de benzidină.Se adaugă 1 - 2 cm3 acid acetic glacial. După dizolvarea benzidinei se adaugă 7-8 picături de H2O2 (substrat). Ulterior, se adaugă 4 - 5 picături de sânge diluat. Se agită. Se procedează în mod identic, folosind însă ca sursă de peroxidază laptele proaspăt. Rezultate și interpretare Se constată aparițiua unei colorații albastre, fapt care indică activitatea peroxidazei din sînge
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
lor moleculară, determină, în prezența iodului, apariția unor colorații caracteristice: albastră-violetă (pentru amilodextrine), roșie (pentru eritrodextrine) și galbenă (pentru flavodextrine). Acrodextrinele având o masă moleculară mai mică nu se colorează în prezența iodului. Principiul metodei O soluție de amidon ca substrat se incubează cu amilază salivară la temperatura de 370C. Hidroliza enzimatică a amidonului se evidențiază prin reacția cu iodul, iar apariția maltozei, ca produs final al acțiunii amilazei, prin reacția Fehling. Prezența maltozei în mediul de reacție indică hidroliza completă
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
masa lor moleculară, se colorează diferit cu iodul. 6.8.2. Factorii care influențează activitatea enzimatică Enzimele își manifestă activitatea catalitică în condiții riguros determinate. Reacțiile enzimatice, respectiv cinetica acestor reacții este dependentă de o serie de factori ca: concentrația substratului, concentrația enzimei, temperatura, pH-ul, efectorii enzimatici. 6.8.2. 1. Influența temperaturii Activitatea enzimatică este influențată de temperatură, factor care poate modifica în anumite condiții stabilitatea enzimei și, implicit, afinitatea enzimei pentru substrat. Există o valoare de temperatură - denumită
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
o serie de factori ca: concentrația substratului, concentrația enzimei, temperatura, pH-ul, efectorii enzimatici. 6.8.2. 1. Influența temperaturii Activitatea enzimatică este influențată de temperatură, factor care poate modifica în anumite condiții stabilitatea enzimei și, implicit, afinitatea enzimei pentru substrat. Există o valoare de temperatură - denumită temperatură optimă - pentru care activitatea enzimatică este maximă. In general temperatura optimă este cuprinsă între 350 și 400C. Fiind proteine, enzimele sunt termolabile. In consecință temperaturi mai mari de 50-600C diminuează sau inhibă activitatea
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
enzimatice se procedează identic, dar în condiții de inactivare termică a enzimei.Soluția de amilază salivară conținută într-o eprubetă se menține câteva minute pe o baie de apă la temperatura de 600C înainte de a fi pusă în contact cu substratul de reacție, și anume, cu soluția de amidon. Se efectuează reacția cu iodul și reacția Fehling. Rezultate și interpretare La temperatură ridicată (600C), amilaza suferă un proces de denaturare termică însoțit de inactivarea sa. Ca urmare, enzima pierde proprietatea catalitică
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
de o parte și de alta a valorii pH-ului optim. Variațiile moderate de pH influențează activitatea enzimatică, respectiv viteza de reacție, prin modificarea stării de ionizare a moleculelor de enzimă, modificare care se repercutează asupra afinității enzimelor atât pentru substratul de reacție (complexul enzimă-substrat), cât și pentru anumiți efectori enzimatici. Modificări mai mult sau mai puțin accentuate în raport cu valoarea pH-ului optim determină, de regulă, o diminuare sau chiar o inhibare a activității enzimatice. Principiul metodei Se determină la temperatura
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
accentuate în raport cu valoarea pH-ului optim determină, de regulă, o diminuare sau chiar o inhibare a activității enzimatice. Principiul metodei Se determină la temperatura optimă (370C) și la valori diferite de pH activitatea amilazei salivare, prin măsurarea timpului în care substratul (amidonul) este hidrolizat până la produși ce nu se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei salivare. Reactivi: * Soluție de amidon 1 % (substrat
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
substratul (amidonul) este hidrolizat până la produși ce nu se mai colorează cu iodul (punctul acromic). Se compară activitatea enzimatică cu valorile de pH corespunzătoare și se stabilește pH-ul optim de activitate al amilazei salivare. Reactivi: * Soluție de amidon 1 % (substrat). * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilază salivară (diluată 1/10). * Soluție de KH2PO4 6,6 · 10-2 m (9,080 g/l). * Soluție de 6,6 · 10-2 m (9,4790 g/l). Din ultimele două soluții se prepară: * Soluție
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
8.2.3.1. Influența activatorilor enzimatici Principiul metodei Se determină activitatea amilazei salivare în prezența și în absența ionului de Cl-. Activitatea enzimei este invers proporțională cu timpul în care se atinge nivelul acromic. Reactivi: * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de pH=6,8. * Soluție de NaCl 1 %. * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilaza salivară (diluată 1 /10). Mod de lucru Se realizează următoarea schemă experimentală: Soluții Probă (cm3) Martor (cm3) Amidon Tampon fosfați pH
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
comportă ca activatori ai amilazei salivare. 6.8.2.3.2. Influența inhibitorilor enzimatici Principiul metodei Se determină activitatea amilazei salivare în prezența și în absența cationului Pb2+; se măsoară timpul necesar atingerii punctului acromic. Reactivi * Soluție de amidon 1% (substrat). * Soluție tampon fosfați de pH=6,8. * Soluție de Pb(NO3)2 1 · 10-3 m * Soluție de iod în KI 0,3 %. *Amilaza salivară (diluată 1 /10). Mod de lucru Se realizează aceeși schemă experimentală ca în cazul determinării influenței
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
scăderea activității enzimatice (sau chiar inhibarea totală a acesteia la concentrații mai mari de Pb2+). 6.9. TESTE DE AUTOEVALUARE 1. Enzimele sunt: a). lipide; b). glucide; c). protide; d). polinucleotide. 3. Viteza de reacție este: a). proporțională cu concentrația substratului; b). independentă de concentrația enzimei; c). independentă de concentrația substratului; d). egală cu viteze maximă. 2. Enzimele se deosebesc de catalizatorii anorganici astfel: a). intervin doare în reacții posibile din punct de vedere termodinamic; b). au eficiență catalitică mai mare
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
concentrații mai mari de Pb2+). 6.9. TESTE DE AUTOEVALUARE 1. Enzimele sunt: a). lipide; b). glucide; c). protide; d). polinucleotide. 3. Viteza de reacție este: a). proporțională cu concentrația substratului; b). independentă de concentrația enzimei; c). independentă de concentrația substratului; d). egală cu viteze maximă. 2. Enzimele se deosebesc de catalizatorii anorganici astfel: a). intervin doare în reacții posibile din punct de vedere termodinamic; b). au eficiență catalitică mai mare; c). scad energia de activare a procesului chimic dat; d
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]