800 matches
-
sunt extrași la pH 10 cu etanol 96% din vopselele în formă de cremă sau lichid și identificați prin cromatografie în strat subțire, uni- sau bidimensională. Pentru determinarea semicantitativă a acestor substanțe, cromatograma probelor este comparată folosind patru sisteme de developare cu substanțele de referință produse în același timp și în condiții pe cât posibil similare. 3. REACTIVI Toți reactivi trebuie să fie de puritate analitică. 3.1. Etanol anhidru 3.2. Acetonă 3.3. Etanol, 96% v/v 3.4. Soluție
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
păstrate o săptămână într-un loc rece și ferit de lumină. În anumite cazuri, după adăugarea acidului ascorbic și a amoniacului, se poate forma un precipitat. În acest caz trebuie lăsat să se sedimenteze înainte de lucru. 3.22. Solvenți de developare 3.22.1. Acetonă - cloroform - toluen 3.22.2. Acetonă - cloroform - etanol absolut - amoniac 25% (80:10:10:1 raport volumetric) 3.22.3. Benzen - 2-butanol - apă (50:25:25 raport volumetric). Se agită bine și se folosește faza superioară
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
raport volumetric). Se separă cu grijă la temperatura camerei (20...25 oC) și se folosește faza inferioară. Prepararea reactivului M Soluție amoniacală 25% (v/v): 24 volume, Acid hipofosforos 50% (3.13): 1 volum, Apă: 75 volume. Notă: Solvenții de developare conținând amoniac trebuie bine agitați imediat înainte de folosire. 3.23. Spray-uri indicatoare 3.23.1. Reactiv diazo Se prepară o soluție apoasă 0,5% (m/v) din reactiv ales (3.14). Această soluție trebuie să fie proaspăt preparată, chiar
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
2,5-dimetilfenolclorură ferică hexahidrată Soluție 1 : se dizolvă 1 g dimetilfenol (3.17) în 100 ml etanol 96% (3.3) Soluție 2 : se dizolvă 4 g clorură ferică hexahidratată (3.18) în 100 ml etanol 96% (3.3) Pentru developare, aceste soluții sunt pulverizate separat, întâi soluția 1 apoi soluția 2. 3.23.4. Azotat de argint amoniacal Peste o soluție apoasă de azotat de argint 5% (3.15) se adaugă soluție de amoniac 25% (3.4), până la dizolvarea precipitatului
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
MPD MTD αn În plus, la punctele 10 și 11 se aplică câte 2 μl din soluția de probă obținută conform secțiunii 5.1. Se menține placa sub azot (3.8) până în momentul în care este cromatografiată. 5.2.2. Developare Se pune placa într-un tanc în prealabil suflat cu azot (3.8), saturat cu unul dintre cei patru solvenți (3.22), și se lasă la developat la temperatura camerei (20...25 OC), în întuneric, până când frontul de solvent migrează
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
de referință. În cazul în care concentrația uneia sau mai multor substanțe găsite în probă este excesivă, se diluează extractul de probă și se repetă măsurarea. TABELUL I Valori Rf și culorile obținute imediat după pulverizare Substanțe de Solvenți de developare Spray-uri indicatoare referință Valori Rf Culori rezultate (3.20) (3.22.1) (3.22.2) (3.22.3) (3.22.4) Diazo (3.23.1) Ehrlich (3.23.2) Dimetilfenol (3.23.3) AgNO (3.23.4) OPD 0
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
portocaliu (*) violet pal maro foarte pal maro pal Observații 1. OPD este indicat numai slab; solventul (3.22.3) trebuie să fie folosit pentru a-l separa clar de OTD. 2. (*) Indică cea mai bună apariție a culorii. 2. (*) Indică developarea celei mai bune culori. 6. EXAMINARE PRIN CROMATOGRAFIE BIDIMENSIONALĂ ÎN STRAT SUBȚIRE Acest procedeu bidimensional de cromatografie în strat subțire necesită folosirea unor standarde și reactivi suplimentari. 6.1. Substanțe și soluții de referință suplimentare 6.1.1. β-naftol (β-N
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
4. 4-aminofenol (PAP) 6.1.5. 2-nitro-1,4-fenilendiamină (2-NPPD) 6.1.6. 4-nitro-1,2-fenilendiamină (4-NOPD) Se prepară câte o soluție 0,5% (m/v) din fiecare substanță de referință suplimentară, conform descrierii de la pct. 3.21. 6.2. Solvent de developare suplimentar 6.2.1. Acetat de etil - ciclohexan - soluție de amoniac 25% (raport volumetric 65:30:0,5) 6.3. Sistem de indicație suplimentar Se pune un vas de sticlă într-un tanc de developare pentru cromatografie în strat subțire
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
21. 6.2. Solvent de developare suplimentar 6.2.1. Acetat de etil - ciclohexan - soluție de amoniac 25% (raport volumetric 65:30:0,5) 6.3. Sistem de indicație suplimentar Se pune un vas de sticlă într-un tanc de developare pentru cromatografie în strat subțire, se adaugă aproximativ 2 g iod cristalizat și se acoperă vasul cu un capac potrivit. 6.4. Cromatografie 6.4.1. Se desenează două linii, așa cum se arată în figura 1, pe suprafața absorbantă a
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
păstrează placa sub atmosferă de azot până în momentul în care este cromatografiată (distanța între puncte 1,5 cm). 6.4.5. Se suflă cu azot (3.8) tancul cromatografic și se pune în acesta o cantitate adecvată de solvent de developare 3.22.2. Se pune placa (6.4.4) în tanc și se developează în prima direcție de eluție (figura 1), la întuneric. Se eluează până când frontul de solvent atinge linia marcată pe placă (aproximativ 13 cm). 6.4.6
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
valorile culorilor pentru substanțele de referință cromatografiate în același timp (tabelul II este un ghid al valorilor Rf și al culorilor). Notă Pentru a obține colorare maximă a petelor se lasă cromatograma expusă în atmosferă timp de 30 minute după developare. 6.4.9. Prezența coloranților de oxidare găsiți la 6.4.8 poate fi confirmată definitiv prin repetarea operațiilor descrise de la 6.4.1 la 6.4.8 și adăugând la punctul de bază 1 în vârful cantității de extract
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
μl din substanțele de referință identificate la 6.4.8. Dacă nu se găsește nici un alt punct în comparație cu cromatograma obținută la 6.4.8, interpretarea cromatogramei 6.4.8 este corectă. TABEL II Culoarea substanțelor de referință după cromatografiere și developare cu vapori de iod Substanțe de referință Culoare după developare cu vapori de iod R bej P maro α-N violet β-N maro pal H maro-violet MPD maro gălbui PPD maro-violet MTD maro închis PTD maro gălbui DAP maro închis OAP
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
Dacă nu se găsește nici un alt punct în comparație cu cromatograma obținută la 6.4.8, interpretarea cromatogramei 6.4.8 este corectă. TABEL II Culoarea substanțelor de referință după cromatografiere și developare cu vapori de iod Substanțe de referință Culoare după developare cu vapori de iod R bej P maro α-N violet β-N maro pal H maro-violet MPD maro gălbui PPD maro-violet MTD maro închis PTD maro gălbui DAP maro închis OAP portocaliu MAP maro gălbui PAP maro-violet 2-NPPD maro 4-NOPD portocaliu
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
se glazurează. Se lasă plăcile pulverizate să se usuce în aer la temperatura camerei pentru una până la trei ore. Notă: Dacă plăcile nu sunt dezactivate se pot produce pierderi de rezorcinol prin adsorbția ireversibilă pe silice. 4.5. Solvent de developare; acetonă - cloroform - acid acetic (raport volumetric 20:75:5) 4.6. Soluție standard de rezorcinol; se dizolvă 400 mg rezorcinol în 100 ml etanol 96% (4.3) (1 ml corespunde la 4000 μg rezorcinol). 4.7. Soluția standard intern: se
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
pe aceeași placă și în același mod (6.1.3). 6.1.5. Se picură pe două puncte de pe linia de pornire câte 5 μl din fiecare dintre soluțiile 4.6 și 4.7 pentru a ajuta la localizare după developarea plăcii. 6.1.6. Se developează placa într-un tanc necăptușit (nesaturat) umplut cu solvent de developare 4.5 până când frontul de solvent atinge 12 cm de la linia de pornire; de obicei aceasta durează 45 minute. Se usucă placa în
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
puncte de pe linia de pornire câte 5 μl din fiecare dintre soluțiile 4.6 și 4.7 pentru a ajuta la localizare după developarea plăcii. 6.1.6. Se developează placa într-un tanc necăptușit (nesaturat) umplut cu solvent de developare 4.5 până când frontul de solvent atinge 12 cm de la linia de pornire; de obicei aceasta durează 45 minute. Se usucă placa în aer și se localizează zona de rezorcinol/DHT sub lumină UV (254 nm). Cei doi componenți au
jrc753as1982 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85891_a_86678]
-
4.2. Soluție standard de 4-toluensulfonamidă: 50 mg 4-toluensulfonamidă în 100 ml etanol (4.5). 4.3. Acid clorhidric, 37% (m/m), d420 1,18 g/ml. 4.4. Dietileter. 4.5. Etanol, 96% (v/v). 4.6. Solvent de developare 4.6.1. 1-butanol / etanol (4.5) / apă (40:4:9; v/v/v), sau 4.6.2. cloroform / acetonă (6:4; v/v). 4.7. Plăci pentru cromatografie în strat subțire gata pregătite, silicagel 60, fără indicator fluorescent. 4
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
cromatografie în strat subțire (4.7). În același timp și în același mod, se picură 8, 12, 16 și 20 l de soluție standard de 4-toluensulfonamidă. 6.3.2. Se lasă să se developeze aproximativ 150 mm în solvent de developare (4.6.1 sau 4.6.2). 6.3.3. După evaporarea completă a solventului de developare, se pune placa pentru două sau trei minute într-o atmosferă de vapori de clor, produsă turnând 100 ml acid clorhidric (4.9
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
16 și 20 l de soluție standard de 4-toluensulfonamidă. 6.3.2. Se lasă să se developeze aproximativ 150 mm în solvent de developare (4.6.1 sau 4.6.2). 6.3.3. După evaporarea completă a solventului de developare, se pune placa pentru două sau trei minute într-o atmosferă de vapori de clor, produsă turnând 100 ml acid clorhidric (4.9) peste aproximativ 2 g permanganat de potasiu (4.8) într-un vas închis. Se îndepărtează excesul de
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
să fie de puritate analitică. 2.1. Acid sulfuric, 25% (v/v). 2.2. 1,5-difenil-3- tiocarbazonă: 0,8 mg în 100 ml tetraclorură de carbon (2.4). 2.3. Azot. 2.4. Tetraclorură de carbon. 2.5. Solvent de developare: hexan / acetonă, 90:10 (v/v). 2.6. Soluție standard, 0,001% în apă, de: 2-(etilmercuritio)benzoat de sodiu, clorură de etilmercur sau clorură de metilmercur, nitrat de fenilmercur sau acetat de fenilmercur, diclorură de mercur sau diacetat de
jrc843as1983 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85981_a_86768]
-
de amine primare libere prin formarea de unui colorant diazoic pe placă. 3. REACTIVI Toți reactivii trebuie să fie de puritate analitică. 3.1. Amestec solvent: ciclohexan / 2-propanol / diclormetan stabilizat, 48/64/9 (v/v/v). 3.2. Solvent de developare: eter de petrol (40-60) / benzen / acetonă / soluție de hidroxid de amoniu (NH3 minimum 25%): 35/35/35/1 (v/v/v/v). 3.3. Soluție de developare: 3.4. (a) azotit de sodiu: 1g în 100 ml acid clorhidric 1
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
2-propanol / diclormetan stabilizat, 48/64/9 (v/v/v). 3.2. Solvent de developare: eter de petrol (40-60) / benzen / acetonă / soluție de hidroxid de amoniu (NH3 minimum 25%): 35/35/35/1 (v/v/v/v). 3.3. Soluție de developare: 3.4. (a) azotit de sodiu: 1g în 100 ml acid clorhidric 1 m (preparat imediat înainte de folosire); (b) 2-naftol: 0,2 g în 100 ml hidroxid de potasiu 1 m. 3.4. Soluții standard: alfa-monogliceril 4-aminobenzoat: 0,05 în
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
și câte 10 ml din fiecare soluție standard (3.4). Se developează cromatograma până la o înălțime de 150 mm într-un tanc saturat în prealabil cu solvent 3.2. Se lasă placa să se usuce la temperatură ambiantă. 5.3. Developare 5.3.1. Se observă placa sub lumină UV la 254 nm. 5.3.2. Se pulverizează placa uscată complet cu soluție 3.3 (a). Se lasă să se usuce la temperatura camerei timp de 1 minut și imediat se
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
iar vaporii de amoniac determină apariția unei fluorescențe gălbui. 3. REACTIVI Toți reactivii trebuie să fie de puritate analitică. 3.1. Plăci cu silicagel, fără indicatori fluorescenți, 0,25 mm grosime, 200 mm x 200 mm. 3.2. Solvent de developare: toluen/dietileter/diclormetan/dietilamină 20/20/20/8 (v/v/v/v). 3.3. Metanol. 3.4. Acid sulfuric (96%; =1,84). 3.5. Dietileter. 3.6. Agent de developare: se adaugă cu grijă 5 acid sulfuric (3.4) la
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]
-
grosime, 200 mm x 200 mm. 3.2. Solvent de developare: toluen/dietileter/diclormetan/dietilamină 20/20/20/8 (v/v/v/v). 3.3. Metanol. 3.4. Acid sulfuric (96%; =1,84). 3.5. Dietileter. 3.6. Agent de developare: se adaugă cu grijă 5 acid sulfuric (3.4) la 95 ml dietileter (3.5) într-un recipient răcit. 3.7. Brom. 3.8. Soluție de hidroxid de amoniu (28%; = 0,90). 3.9. Chinină anhidră. 3.10. Soluție standard
jrc990as1985 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86129_a_86916]