925 matches
-
Trebuie amintit că proteinele, peptidele, reactivii folosiți la extracții, sărurile și nucleotidele libere pot contamina probele de ADN, conducând la alterarea spectrelor de absorbție a acestuia. Deși proteinele prezintă o mică absorbție la 260 nm, atât proteinele, cât și acizii nucleici absorb puternic la 280 nm. Astfel, dacă o probă conține acizi nucleici și proteine, va apărea o suprapunere spectrală la 280 nm, datorată prezenței acizilor nucleici și proteinelor în soluție. Sunt prezentate spectrele de absorbție a ADN-ului și a
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
libere pot contamina probele de ADN, conducând la alterarea spectrelor de absorbție a acestuia. Deși proteinele prezintă o mică absorbție la 260 nm, atât proteinele, cât și acizii nucleici absorb puternic la 280 nm. Astfel, dacă o probă conține acizi nucleici și proteine, va apărea o suprapunere spectrală la 280 nm, datorată prezenței acizilor nucleici și proteinelor în soluție. Sunt prezentate spectrele de absorbție a ADN-ului și a albuminei serice bovine (BSA). Sunt prezentate lungimile de undă relevante pentru măsurarea
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
Deși proteinele prezintă o mică absorbție la 260 nm, atât proteinele, cât și acizii nucleici absorb puternic la 280 nm. Astfel, dacă o probă conține acizi nucleici și proteine, va apărea o suprapunere spectrală la 280 nm, datorată prezenței acizilor nucleici și proteinelor în soluție. Sunt prezentate spectrele de absorbție a ADN-ului și a albuminei serice bovine (BSA). Sunt prezentate lungimile de undă relevante pentru măsurarea absorbției acizilor nucleici și proteinelor, din domeniul UV. Determinarea concentrației acizilor nucleici și a
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
va apărea o suprapunere spectrală la 280 nm, datorată prezenței acizilor nucleici și proteinelor în soluție. Sunt prezentate spectrele de absorbție a ADN-ului și a albuminei serice bovine (BSA). Sunt prezentate lungimile de undă relevante pentru măsurarea absorbției acizilor nucleici și proteinelor, din domeniul UV. Determinarea concentrației acizilor nucleici și a proteinelor dintr-o soluție Determinarea concentrației acizilor nucleici și a proteinelor se face pe baza legii Lambert - Beer, utilizând soluții diluate și cunoscând coeficientul molar de extincție, ε, la
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
prezenței acizilor nucleici și proteinelor în soluție. Sunt prezentate spectrele de absorbție a ADN-ului și a albuminei serice bovine (BSA). Sunt prezentate lungimile de undă relevante pentru măsurarea absorbției acizilor nucleici și proteinelor, din domeniul UV. Determinarea concentrației acizilor nucleici și a proteinelor dintr-o soluție Determinarea concentrației acizilor nucleici și a proteinelor se face pe baza legii Lambert - Beer, utilizând soluții diluate și cunoscând coeficientul molar de extincție, ε, la lungimile de undă de 260 nm și 280 nm
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
de absorbție a ADN-ului și a albuminei serice bovine (BSA). Sunt prezentate lungimile de undă relevante pentru măsurarea absorbției acizilor nucleici și proteinelor, din domeniul UV. Determinarea concentrației acizilor nucleici și a proteinelor dintr-o soluție Determinarea concentrației acizilor nucleici și a proteinelor se face pe baza legii Lambert - Beer, utilizând soluții diluate și cunoscând coeficientul molar de extincție, ε, la lungimile de undă de 260 nm și 280 nm: coeficientul molar de extincție al unei proteine, măsurat la 280
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
extincție, ε, la lungimile de undă de 260 nm și 280 nm: coeficientul molar de extincție al unei proteine, măsurat la 280 nm, depine de numărul și tipul aminoacizilor aromatici prezenți în lanțul proteic; coeficientul molar de extincție al acizilor nucleici depine de componența în baze purinice și pirimidinice, dar și de tipul lanțului (simplu sau dublu). De obicei, pentru a estima concentrația de acizi nucleici sau de proteină dintr-o probă, se folosește o valoare medie a coeficientului molar de
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
numărul și tipul aminoacizilor aromatici prezenți în lanțul proteic; coeficientul molar de extincție al acizilor nucleici depine de componența în baze purinice și pirimidinice, dar și de tipul lanțului (simplu sau dublu). De obicei, pentru a estima concentrația de acizi nucleici sau de proteină dintr-o probă, se folosește o valoare medie a coeficientului molar de extincție. Astfel: dacă o probă conține un lanț dublu de ADN pur, iar extincția, la 260 nm, este 1, atunci proba conține ~ 50 μg/mL
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
conține ~ 1 mg/mL proteină. De exemplu, o soluție de 1 mg/mL de BSA prezintă o extincție, la 280 nm, de 0,7. Această regulă este, însă, empirică, neținând cont de numărul și tipul aminoacizilor aromatici. Estimarea purității acizilor nucleici Spectrofotometria de absorbție, în domeniul spectral UV, poate furniza informații despre puritatea soluțiilor de acizi nucleici. Astfel, se măsoară absorbția probelor la lungimile de undă de 260 nm și 280 nm, după care se calculează raportul A260/A280. pentru ARN
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
o extincție, la 280 nm, de 0,7. Această regulă este, însă, empirică, neținând cont de numărul și tipul aminoacizilor aromatici. Estimarea purității acizilor nucleici Spectrofotometria de absorbție, în domeniul spectral UV, poate furniza informații despre puritatea soluțiilor de acizi nucleici. Astfel, se măsoară absorbția probelor la lungimile de undă de 260 nm și 280 nm, după care se calculează raportul A260/A280. pentru ARN pur, A260/A280 = 2,0 pentru ADN pur, A260/A280 = 1,8 pentru proteină pură, A260
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
se calculează raportul A260/A280. pentru ARN pur, A260/A280 = 2,0 pentru ADN pur, A260/A280 = 1,8 pentru proteină pură, A260/A280 ~ 0,6. Agitația termică sporește absorbția probei, conducând la determinări incorecte. Deoarece nici proteinele, nici acizii nucleici nu absorb la 320 nm, aici se va face o corectare a liniei de bază. Astfel, dacă o probă absoarbe la 320 nm, aceasta se datorează agitației termice și poate fi substrasă din citirile efectuate la 260 nm și 280
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
liniei de bază. Astfel, dacă o probă absoarbe la 320 nm, aceasta se datorează agitației termice și poate fi substrasă din citirile efectuate la 260 nm și 280 nm. Prin această metodă nu se face distincția între cei doi acizi nucleici, ADN și ARN. De asemenea, un raport A260/A280 < 1,7 indică o contaminare a soluției de acizi nucleici cu proteine sau cu fenol. 1. Modul de lucru Pentru prepararea probelor, sunt puse la dispoziție diferite substanțe. Pentru măsurătorile de
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
substrasă din citirile efectuate la 260 nm și 280 nm. Prin această metodă nu se face distincția între cei doi acizi nucleici, ADN și ARN. De asemenea, un raport A260/A280 < 1,7 indică o contaminare a soluției de acizi nucleici cu proteine sau cu fenol. 1. Modul de lucru Pentru prepararea probelor, sunt puse la dispoziție diferite substanțe. Pentru măsurătorile de absorbție, în domeniul spectral UV, se vor folosi cuve de cuarț (care nu absorb în domeniul UV). Acestea trebuie
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
spectrali, folosind spectrofotometrul de absorbție Perkin Elmer Lambda 2, pentru înregistrarea unui spectru de absorbție în domeniul spectral, 220 nm 330 nm; 2) Se vor măsuara A260 nm și A280 nm pentru fiecare probă (ADN, ARN, proteină, amestec de acizi nucleici și proteină). 2. Obținerea și interpretarea rezultatelor 1) Se va calcula raportul A260/A280 în fiecare caz. 2) Se va calcula concentrația probelor de ADN, ARN și de proteine, folosind A260/A280. 3) Rezultatele vor fi prezentate astfel: a. A260
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
câteva aspecte, care trebuie să rămână, întotdeauna, valabile: fluorescența trebuie să fie măsurată numai pentru situl de legare a ligandului la molecula proteică; fluorescența depinde de condițiile de mediu; nu trebuie să fie afectate proprietățile macromoleculelor studiate. În studiul acizilor nucleici, marker-ii fluorofori utilizați sunt acridinele. În studiul proteinelor, fluoroforii extrinseci cei mai folosiți sunt: 1-anilinonaphthalene-8-sulfonate (ANS) și derivații săi, rodamina, fluoresceina și izomerii lor de poziție. Sunt prezentate caracteristicile de absorbție și de fluorescență ale ANSului și derivaților săi. Fluoroforul
BIOFIZICA ȘI BIOENERGETICA SISTEMELOR VII by Claudia Gabriela Chilom () [Corola-publishinghouse/Science/1580_a_2899]
-
deci de secvența bazelor azotate, ordinea sau secvența de baze azotate din catena ADN fiind caracteristică fiecărei specii și reprezentând informația ereditară codată biochiomic. Întreaga biologie moleculară, prin urmare și genetica moleculară, se bazează pe relația care există între acizii nucleici și proteine, mai exact pe mecanismul prin care informația genetică existentă în ADN dirijează secvența de aminoacizi din proteine, contribuind astfel la realizarea fenotipului pe baza informației conținute în genotip. Dogma centrală a biologiei moleculare se referă la fluxul informației
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
ajunge de la fragmente foarte mici de material genetic la amplificarea aproape exponențială a ADN-ului; secvențierea ADN, adică determinarea secvenței nucleotidice - informația genetică propriu-zisă - pentru a stabili structura genei și secvența de aminoacizi ai proteinei codificate de genă; hibridizarea acizilor nucleici - se bazează pe faptul că două molecule monocatenare de acizi nucleici pot forma o moleculă hibrid, în funcție de gradul de complementaritate al secvențelor lor nucleotidice (G-C, A-T, respectiv A-U în cazul ARN-ului). Analiza ADN-ului prin metoda de
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
exponențială a ADN-ului; secvențierea ADN, adică determinarea secvenței nucleotidice - informația genetică propriu-zisă - pentru a stabili structura genei și secvența de aminoacizi ai proteinei codificate de genă; hibridizarea acizilor nucleici - se bazează pe faptul că două molecule monocatenare de acizi nucleici pot forma o moleculă hibrid, în funcție de gradul de complementaritate al secvențelor lor nucleotidice (G-C, A-T, respectiv A-U în cazul ARN-ului). Analiza ADN-ului prin metoda de transfer Southern blot presupune stabilirea prezenței sau absenței unei secvențe de
[Corola-publishinghouse/Science/2124_a_3449]
-
de-a lungul frontalei ascendente; nu se însoțește de pierderea cunoștinței. EREDITATE (< fr. hérédité, cf. lat. hereditas, -atis - moștenire; engl. heredity, inheritance) - Transmiterea anumitor caractere („mesaje”) de la o generație la alta; mesajele sunt codate în forma codului genetic, în acizii nucleici (în special în cromozomi), fiind supuse combinărilor, erorilor de copiere, alterărilor (mutații). Ereditatea este strâns legată de problematica unității în diversitate a lumii vii, de conservarea în timp a tipului speciei, a individualității, a genezei noului în cursul evoluției (Popescu-Neveanu
[Corola-publishinghouse/Science/1932_a_3257]
-
la o agresiune care poate fi o infecție, o substanță chimică sau un agent fizic. Se manifestă prin durere, căldură, înroșire, tumefiere și scăderea sau pierderea funcției zonei afectate. INGINERIE GENETICĂ (engl. genetics engineering) - Totalitatea tehnicilor care permit manipularea acizilor nucleici (ADN și ARN) în laborator. Domeniu al geneticii prin care se efectuează experiențe de introducere de gene de la o specie dată într-un organism aparținând aceleiași specii sau unei alte specii. INHIBIȚIE (< fr. inhibition, lat. inhibitio; engl. inhibition) - Încetinirea sau
[Corola-publishinghouse/Science/1932_a_3257]
-
o surpriză; m-a avertizat într-o zi, când l-am întâlnit la Academie; mi-a spus că ne va face o surpriza. Ne-a pus la punct cu tehnicile noi folosite în biologia celulară, care permiteau deslușirea structurii acizilor nucleici, cu o precizie care merge până la recunoașterea tuturor nucleotidelor în înșiruirea lor naturală. Având toate datele la îndemână, un genetician japonez a avut ideea să facă din partitura genelor o partitură muzicală. Având înșiruirea nucleotidelor dintr-o genă, asemenea înșiruirii
75 - VÂRSTA MĂRTURISIRII by Gheorghe Mustaţă () [Corola-publishinghouse/Memoirs/794_a_1652]
-
punct de vedere semiotic, celula este entitatea de bază în care se petrec fenomenele vitale. Prin structura sa, celula asigură suportul material pentru diferitele tipuri de semnale. Nu este vorba doar de semnalele incluse în patrimoniul ereditar reprezentat de acizii nucleici, ci și de structurile complexe ale organitelor și de funcțiunile intracitoplasmatice. Celula reprezintă sistemul semiotic care face distincția între interior - exterior (inside-outside), deschizând posibilitatea comunicării cu mediul prin fenomenele de membrană. Sistemul informațional dual, analogic-digital, apare în celulă ca un
75 - VÂRSTA MĂRTURISIRII by Gheorghe Mustaţă () [Corola-publishinghouse/Memoirs/794_a_1652]
-
reprezintă sistemul semiotic care face distincția între interior - exterior (inside-outside), deschizând posibilitatea comunicării cu mediul prin fenomenele de membrană. Sistemul informațional dual, analogic-digital, apare în celulă ca un sistem de autoreglare, bazat pe redescripția în codul digital al lanțului acizilor nucleici. Calitatea semiotică a vieții este grandioasa organizare și desfășurare a metabolismului celular. 4. Sistemele vii constau în suprafețe din interiorul altor suprafețe care transformă interiorul în exterior și exteriorul în interior. Importanța zonelor de graniță, de limită, între diferitele sisteme
75 - VÂRSTA MĂRTURISIRII by Gheorghe Mustaţă () [Corola-publishinghouse/Memoirs/794_a_1652]
-
metode de îmbogățire, care se bazează pe caracteristicile lor fizice și biologice: centrifugare în gradient de densitate, microfiltrare, tehnici imunomagnetice, utilizând anticorpi monoclonali, chip-uri microfluide, acestea fiind urmate de tehnici de identificare a originii și caracterizări moleculare:analiza acizilor nucleici (ADN sau mARN);analize citometrice;tehnici de citometrie fluorescenta și sisteme automate de analiză a imaginii;analize funcționale [129, 133]. Având în vedere că numai 35% dintre celulele CHC exprimă markeri epiteliali (EPCAM: molecule de adeziune epiteliala) cea mai răspândită
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Mircea Grigorescu, Mircea Dan Grigorescu () [Corola-publishinghouse/Science/92130_a_92625]
-
a capacității de a produce interleukina 12, ceea ce ar scădea capacitatea de stimulare a celulelor Ț naive. Această constatare ar sugera o direcție terapeutică nouă, prin administrarea exogena de ÎL-12, care ar restabilii funcția normală a celulelor dendritice [148]. ACIZII NUCLEICI LIBERI Acizii nucleici liberi își au sursă în tumoră primară, în urma proceselor de necroza și apoptoza sau printr-un proces de eliberare „spontană și activă” [149, 150]. ADN CIRCULANT LIBER (cf ADN) Cuprinde ADN-ul genomic, epigenomic, mitocondrial și viral
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Mircea Grigorescu, Mircea Dan Grigorescu () [Corola-publishinghouse/Science/92130_a_92625]