62,260 matches
-
care trebuie degajată și dimensiunile suprafeței care trebuie tratată, se ia în calcul greutatea animalului. Dacă testul vizează substanțele solide care, dacă este cazul, se pot pulveriza, substanța de testare trebuie umezită cu ajutorul apei sau, la nevoie, al unui excipient adecvat, astfel încât să se poată obține un bun contact cu pielea. Substanțele lichide se folosesc în general în stare nediluată. Se efectuează o aplicare zilnică timp de 5 până la 7 zile pe săptămână. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
unul al celei renale: alanin aminotransferaza (cunoscută anterior ca transaminaza serică glutamo-piruvică), aspartat aminotransferaza (cunoscută anterior ca transaminaza serică glutamo-oxaloacetică), ureea, albumina, creatinina sanguină, bilirubina totală și proteinele totale. Alte determinări casre se pot dovedi necesare pentru o evaluare toxicologică adecvată cuprind: calciu, fosfor, clor, sodiu, potasiu, glucoza à jeun, analiza lipidelor și a hormonilor, echilibrul acidobazic, methemoglobina și activitatea colinesterazică. Se pot efectua, dacă este necesar, și alte determinări biochimice clinice pentru a extinde investigațiile asupra efectelor observate. 1.6
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
2. DATE Datele se sistematizează într-un tabel care indică, pentru fiecare lot de experiență, numărul de animale la începutul testului și numărul de animale care prezintă fiecare tip de leziune. Toate rezultatele observate se evaluează cu ajutorul unei metode statistice adecvate. Se poate folosi orice metodă statistică recunoscută. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul testului cuprinde, dacă este posibil, următoarele informații: - specia, linia, originea, condițiile ambiante, regimul alimentar etc., - condițiile experimentale, - dozele (după caz, doza de excipient) și concentrațiile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
amestec de activare a enzimelor hepatice (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), culturile celulare se tratează cu un inhibitor al fusului mitotic, precum colchinina în vederea acumulării celulelor în stadiu de tip metafază al mitozei (c-metafază). Celulele se recoltează la momente adecvate și se realizează preparate cromozomiale. Preparatele se colorează și celulele în metafază se analizează pentrua se evidenția anomaliile cromozomiale. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri 1.6.1.1. Celule
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
se testează până la limita superioară a solubilității sau până la o concentrație maximă de 5 mg/ml. Condiții de cultură: Se folosesc medii de cultură și condiții de incubare (de exemplu, temperatura, vasele de cultură utilizate, concentrațiile de CO2 și umiditatea) adecvate. 1.6.3. Mod de operare 1.6.3.1. Prepararea culturilor Linii celulare stabilite: celulele se obțin pornind de la culturile mamă (de exemplu prin tripsinizare sau detașare selectivă prin agitare viguroasă), însămânțate în recipiente de cultură cu densitate adecvată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
adecvate. 1.6.3. Mod de operare 1.6.3.1. Prepararea culturilor Linii celulare stabilite: celulele se obțin pornind de la culturile mamă (de exemplu prin tripsinizare sau detașare selectivă prin agitare viguroasă), însămânțate în recipiente de cultură cu densitate adecvată și se incubează la 37oC. Limfocite umane: se adaugă sânge heparinizat la mediul de cultură, conținând fitohemaglutinină, ser fetal bovin și antibiotice se adaugă sânge integral heparinizat, incubat la 37°C. 1.6.3.2. Tratarea culturilor cu compusul de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
reciproce), aberațiile de tip cromozomic (lacune, fisuri, cromozomi minut, inele, dicentrice, policentrice) și numărul de metafaze anormale (lacune incluse și excluse) se înregistrează pentru toate tipurile de culturi tratate, ca și pentru culturile martor. Datele se evaluează prin metode statistice adecvate. Rezultatele evaluate prin metode statistice corespunzătoare. Rezultatele se compară cu cele obținute de la martorii negativi preparați simultan. Se efectuează cel puțin două experimente independente. Totuși, dacă există argumente științifice, poate fi suficient un singur experiment. Nu este obligatorie efectuarea celui
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
termen scurt destinat evidențierii aberațiilor cromozomiale structurale. Acestea sunt evaluate, în general, pe parcursul primei mitoze consecutive a tratamentului. Cu mutagenele chimice, majoritatea aberațiilor induse sunt de tip cromatidian. În această metodă se folosește măduva osoasă a mamiferelor expuse, prin metode adecvate, la substanțele de testare și sacrificate la intervale succesive. Înainte de a fi sacrificate, animalele sunt tratate cu ajutorul unor substanțe precum: colchinina, care împiedică formarea fusului în vederea acumulării celulelor în stadiul de tip metafază al mitozei (c-metafază). Se realizează preparate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătirea testului Se dizolvă substanțele de testare într-o soluție fiziologică. Dacă sunt substanțe insolubile, acestea se dizolvă sau se pun în suspensie în excipienți adecvați. Se folosesc soluții ale substanței de testare proaspăt preparate. Dacă se folosește un excipient, acesta nu trebuie nici să interfereze cu substanța de testare, nici să producă efecte toxice. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1. Animale de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
li se injectează intraperitoneal o doză adecvată de inhibitor de fus mitotic în vederea obținerii unui număr de celule adecvate în metafază. Măduva osoasă se prelevează prin clătire cu ajutorul unei soluții izotonice, din femurul animalelor proaspăt sacrificate. După un tratament hipotonic adecvat, celulele se fixează, apoi se întind pe lame. După uscarea la aer, lamele se colorează. Analiză Lamele se codează înainte de a fi folosite la microscop. Se analizează cel puțin 50 de metafaze bine etalate, incluzând numărul complet de centromeri pe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
indexurile mitotice (când se stabilesc) se înregistrează separat pentru toate animalele tratate, ca și pentru animalele martor. Se înregistrează și mediile și diferențele tip obținute pentru fiecare lot tratat, precum și pentru fiecare lot martor. Datele se evaluează prin metode statistice adecvate. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul de test conține, dacă este posibil, următoarele informații: - specia, linia și vârsta animalelor utilizate, - numărul animalelor de fiecare sex din loturile tratat și martor, - condițiile experimentale: descrierea detaliată a schemei de tratament
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Când eritroblaștii se transformă în eritrocite, nucleul principal este expulzat, în timp ce micronucleul poate fi conservat în citoplasmă. Pentru acest test se folosesc eritrocite policromatice tinere care provin din măduva osoasă a mamiferelor de laborator care au fost expuse, pe căi adecvate, la substanța de testare. După extragerea măduvei osoase, se pregătesc și se colorează frotiuri. Se numără la microscop numărul de micronuclee prezente în eritrocitele policromatice și se stabilește raportul între eritrocitele policromatice și normocromatice. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
și normocromatice. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri Se dizolvă substanțele de testare într-o soluție izotonică. Dacă sunt insolubile, acestea se dizolvă sau se pun în suspensie în excipienți adecvați. Dacă se folosește un excipient, acesta nu trebuie nici să interfereze cu substanța de testare, nici să producă efecte toxice. În general, se folosesc soluții ale substanței de testare proaspăt preparate. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
este un test microbian care permite măsurarea reversiei trp-→trp+ datorată unor substanțe chimice responsabile de substituția de bază la nivelul genomului uman. Se expun bacteriile la substanțele de testare cu sau fără activare metabolică. După o perioadă de incubație adecvată minimă pe mediul în cauză, se numără coloniile derivate prin reversie și se compară numărul obținut cu cel al revertanților spontani observați într-o cultură martor netratată și / sau în prezența solventului. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
faza staționară precoce a creșterii. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie de 108 - 109 celule/ml. 1.6.1.2. Activare metabolică Bacteriile tratate cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem de activare metabolică adecvat. Cel mai frecvent folosit sistem este o fracțiune postmitocondrială completată cu un cofactor, preparată din ficat de rozătoare tratate cu inductori enzimatici. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1. Linii de experiment Se folosesc trei linii, respectiv WP2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
în care s-au produs reversii pe fiecare cutie. Pentru substanța de testare și pentru martori se prezintă rezultatele pentru fiecare cutie, numărul mediu per cutie al coloniilor derivate prin reversie și deviația standard. Rezultatele se evaluează prin metode statistice adecvate. Se efectuează cel puțin două experimente independente. Nu este obligatoriu ca al doilea experiment să se desfășoare în mod identic cu experimentul inițial. Anumite condiții de testare pot fi modificate pentru a obține mai multe rezultate utile. 3. RAPORT 3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
pentru substituția de bază sau a mutațiilor care deplasează cadrul de citire în genomul organismului. Se expun bacteriile la substanța de testare cu sau fără activare metabolică și se varsă la suprafața unui mediu minim. După o perioadă de incubație adecvată, se numără coloniile derivate prin reversie și se compară numărul obținut cu cel al revertanților spontani observați într-o cultură martor netratată și/sau în prezența solventului. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
staționară precoce a creșterii. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie 108 - 109 celule pe mililitru. 1.6.1.2. Activare metabolică Bacteriile se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem de activare metabolică adecvat. Sistemul cel mai frecvent folosit este o fracțiune postmitocondrială la care se adaugă un cofactor preparat din ficat de rozătoare tratate cu inductori enzimatici. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1. Linii de experiență Se folosesc cel puțin
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
sensibilitatea lor la radiația ultravioletă și la cristal violet, rezistența la ampicilină. Liniile trebuie să producă revertanți spontani în intervalul de frecvență preconizat. 1.6.2.2. Mediu Se utilizează un mediu de cultură selectiv corespunzător, cu agar-agar de acoperire adecvat. 1.6.2.3.Folosirea martorilor negativi și pozitivi Se folosesc simultan culturi martor netratate și culturi martor tratate cu solvent. Martorii pozitivi se folosesc în două scopuri: (i) pentru confirmarea sensibilității liniilor bacteriene; Pentru testele fără activare metabolică se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
atât pentru seriile martor cât și pentru cele tratate. Pentru substanța de testare și pentru martori sunt prezentate rezultatele pentru fiecare cutie, numărul mediu per cutie al coloniilor derivate prin reversie și deviația standard. Rezultatele se evaluează prin metode statistice adecvate. Trebuie realizate cel puțin două experimente independente. Nu este obligatoriu ca al doilea experiment să se desfășoare în mod identic cu experimentul inițial. Anumite condiții de testare pot fi modificate pentru a obține mai multe rezultate utile. 3. DATE Numărul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
atât pentru seriile martor cât și pentru cele tratate. Pentru substanța de testare și pentru martori sunt prezentate rezultatele pentru fiecare cutie, numărul mediu per cutie al coloniilor derivate prin reversie și deviația standard. Rezultatele se evaluează prin metode statistice adecvate. Trebuie realizate cel puțin două experimente independente. Nu este obligatoriu ca al doilea experiment să se desfășoare în mod identic cu experimentul inițial. Anumite condiții de testare pot fi modificate pentru a obține mai multe rezultate utile. 3. RAPORT 3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
ce urmează să fie folosite. Pe lângă testarea propriu-zisă, se efectuează un test martor fără substanță de testare și, dacă are semnificație, încă un test martor pentru substanța auxiliară. În funcție de proprietățile fizice și chimice ale substanței de testare, se alege metoda adecvată statică, semistatică sau dinamică, pentru a îndeplini criteriile de calitate. Peștii sunt expuși substanței conform celor descrise mai jos: - durata: 96 ore, - numărul de organisme testate: cel puțin 7 pe concentrație, - vase: de capacitate adecvată în funcție de greutatea recomandată a lotului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
Testing and Materials, ASTM STP 634, 1977, 65-84. (20) Stephan, C.E., Busch, K.A., Smith, R., Burke, J. and Andrews, R.W. A computer program for calculating an LC50. US EPA. Apendicele 1 Apă reconstituită Exemplu de apă de diluție adecvată Toate substanțele chimice sunt de puritate analitică. Apa este apă distilată de calitate bună sau apă deionizată cu o conductibilitate mai mică de 5 µScm-1. Aparatura pentru distilarea apei trebuie să nu conțină nici o piesă din cupru. Soluțiile mamă CaCl2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
adăugată în apă într-o gamă de concentrații, timp de 48 de ore. Dacă se folosește un test mai scurt, acest lucru trebuie justificat în protocol. În condiții de testare identice din toate celelalte puncte de vedere și un interval adecvat de concentrații ale substanței de testare, concentrațiile diferite exercită în grade diferite efecte asupra capacității de înot a Daphniei. Concentrațiile diferite conduc la diferite procente de organisme Daphina care nu mai sunt capabile să înoate la sfârșitul testului. Concentrațiile care
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
ca apa de test. 1.6.2. Aparatură Se folosesc aparatură și echipamente normale de laborator. În mod ideal, echipamentele care vin în contact cu soluțiile de testare sunt confecționate în întregime din sticlă: - oxigenometru (cu microelectrod sau alt echipament adecvat pentru măsurarea oxigenului dizolvat în probele cu volum mic), - aparatură adecvată pentru controlul temperaturii, - pH metru, - echipament pentru determinarea durității apei. 1.6.3. Organisme de experiență Specia preferată este Daphnia magna deși este permisă și Daphnia pulex. Organismele testate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]