60,688 matches
-
la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce nu conțin anticorpi față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
de fenilmetilsulfonil este nociv (toxic) - a se manipula cu mare atenție). 6. Se distrug celulele timp de 60 de secunde, utilizând un ultrasonator, la o amplitudine de 30 de microni. 7. Se centrifughează la 10.000 rpm timp de 10 minute. 8. Se păstrează supernatantul la +4°C și se resuspendă celulele rămase conglomerate (aglutinate) în 10-20 ml de tampon de liza. 9. Se ultrasonează și se clarifica, păstrând supernatantul pentru fiecare stadiu, în total de trei ori. 10. Se comasează
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
în 10-20 ml de tampon de liza. 9. Se ultrasonează și se clarifica, păstrând supernatantul pentru fiecare stadiu, în total de trei ori. 10. Se comasează supernatanții și se centrifughează la 24.000 rpm (100.000 g) timp de 120 minute la +4°C pe o pernă de 5 ml zaharoza 40% (m/v în PBS) utilizând tuburi de centrifugare Beckmann de 30 ml și un rotor SW 28. 11. Se îndepărtează supernatantul, se scurge complet și se resuspendă în PBS
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ 0,8 DO după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii limbii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
examinată în raport cu un fond întunecat utilizând iluminare indirectă. Rino-traheita infecțioasă bovina (IBR)/Vulvo-vaginita pustuloasa bovina (IPV) Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Serul: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate la cald la 56°C, timp de 30 minute. Procedeu: Testul de seroneutralizare cu ser în diluție constantă și antigen în diluții diferite pe placă de microtitrare, utilizând MDBK sau alte celule susceptibile. Tulpina de virus Oxford, tulpina Colorado sau orice altă tulpina de referință este utilizată la un
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
BHK-21 sau celule renale de vițel. Serurile pentru test sunt diluate 'bc în mediul pentru culturi celulare fără ser cu adăugarea a 100 UI/ ml neomicina sau alt antibiotic corespunzător. Serurile sunt inactivate la 56°C timp de 30 de minute și sunt utilizate cantități de 0,05 ml pentru a prepara diluții binare (duble) în serie pe plăci de microtitrare utilizând anse de diluție de 0,05 ml. De asemenea, virusul titrat în prealabil se diluează în mediul de cultură
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de ortofenil-diamina conținând 0,05% H(2)O(2) (30%) m/v. 8. Reacția este stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor ELISA legat la un microcomputer. Martori: Pentru fiecare antigen se utilizează 40 de godeuri ce nu conțin ser dar conțin antigen
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
method of ELISA." Journal of Imunological Methods, 93, 115 până la 121.11. Boală Aujeszky A. Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Ser: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate prin căldură la 56°C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu cantitate constantă de virus și variind serul pe plăci de microtitrare utilizează VERO sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul bolii Aujeszky este utilizat la 100TCID50/0,025 ml; sunt amestecate probe de ser nediluat și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
B. Orice alt test recunoscut în conformitate cu prevederile Deciziei Comisiei 2001/618/CE. Gastroenterita transmisibila (GET) Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Serul: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate prin căldură la 56°C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu virus constant și variind antigenul (aceeași diluție de virus cu diluții diferite de ser) pe plăci de microtitrare folosește celule A72 (linie celulară tumorala de câine) sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul gastroenteritei transmisibile este
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
la 100TCID50 per 0,025 ml; probe de ser nediluat inactivat sunt amestecate cu un volum egal (0,025 ml) de suspensie virală. Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
dispersa virus agregat (dacă sonicatorul nu este disponibil se pipetează puternic) și se adaugă 50 μl pe toate godeurile plăcii ELISA. Se lovesc ușor lațurile plăcii pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile de trei ori prin umplerea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă prin scuturare (lovire puternică a plăcii cu fața în jos pe o hârtie de filtru) pe hârtie de filtru
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce nu conțin anticorpi față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
de fenilmetilsulfonil este nociv (toxic) - a se manipula cu mare atenție). 6. Se distrug celulele timp de 60 de secunde, utilizând un ultrasonator, la o amplitudine de 30 de microni. 7. Se centrifughează la 10.000 rpm timp de 10 minute. 8. Se păstrează supernatantul la +4°C și se resuspendă celulele rămase conglomerate (aglutinate) în 10-20 ml de tampon de liza. 9. Se ultrasonează și se clarifica, păstrând supernatantul pentru fiecare stadiu, în total de trei ori. 10. Se comasează
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
în 10-20 ml de tampon de liza. 9. Se ultrasonează și se clarifica, păstrând supernatantul pentru fiecare stadiu, în total de trei ori. 10. Se comasează supernatanții și se centrifughează la 24.000 rpm (100.000 g) timp de 120 minute la +4°C pe o pernă de 5 ml zaharoza 40% (m/v în PBS) utilizând tuburi de centrifugare Beckmann de 30 ml și un rotor SW 28. 11. Se îndepărtează supernatantul, se scurge complet și se resuspendă în PBS
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă de titrare (nu în regiunea în platou) care dă aproximativ 0,8 DO după 10 minute. B. Testul de imunodifuzie în gel de agar va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Antigen: Antigenul precipitat este preparat în orice sistem de cultivare a celulelor ce suporta multiplicarea rapidă a unei tulpini de referință de virus al bolii limbii
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
examinată în raport cu un fond întunecat utilizând iluminare indirectă. Rino-traheita infecțioasă bovina (IBR)/Vulvo-vaginita pustuloasa bovina (IPV) Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Serul: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate la cald la 56°C, timp de 30 minute. Procedeu: Testul de seroneutralizare cu ser în diluție constantă și antigen în diluții diferite pe placă de microtitrare, utilizând MDBK sau alte celule susceptibile. Tulpina de virus Oxford, tulpina Colorado sau orice altă tulpina de referință este utilizată la un
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
BHK-21 sau celule renale de vițel. Serurile pentru test sunt diluate 'bc în mediul pentru culturi celulare fără ser cu adăugarea a 100 UI/ ml neomicina sau alt antibiotic corespunzător. Serurile sunt inactivate la 56°C timp de 30 de minute și sunt utilizate cantități de 0,05 ml pentru a prepara diluții binare (duble) în serie pe plăci de microtitrare utilizând anse de diluție de 0,05 ml. De asemenea, virusul titrat în prealabil se diluează în mediul de cultură
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de ortofenil-diamina conținând 0,05% H(2)O(2) (30%) m/v. 8. Reacția este stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor ELISA legat la un microcomputer. Martori: Pentru fiecare antigen se utilizează 40 de godeuri ce nu conțin ser dar conțin antigen
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
method of ELISA." Journal of Imunological Methods, 93, 115 până la 121.11. Boală Aujeszky A. Testul de seroneutralizare va fi efectuat în conformitate cu următorul protocol: Ser: Toate serurile, înainte de utilizare, sunt inactivate prin căldură la 56°C timp de 30 de minute. Procedeu: Testul de neutralizare cu cantitate constantă de virus și variind serul pe plăci de microtitrare utilizează VERO sau alte sisteme celulare sensibile. Virusul bolii Aujeszky este utilizat la 100TCID50/0,025 ml; sunt amestecate probe de ser nediluat și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]