6,940 matches
-
substanțe naturale prin extracții fizice și/sau chimice pentru extragerea selectivă a pigmenților în raport cu elementele componente nutritive sau aromatice. (3) Totuși, nu se consideră coloranți în sensul prezentei directive substanțele enumerate în continuare: - produsele alimentare, fie deshidrate, fie în formă concentrată și aromele încorporate în procesul de fabricare a produselor alimentare compuse, datorită proprietățior aromatice, savuroase sau nutritive ale acestora coroborate cu un efect secundar de colorare, cum sunt ardeiul iute, șofranul de India și șofranul, - coloranții care se utilizează pentru
jrc2490as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87644_a_88431]
-
sulfit de amoniu Bere E 150a Caramel simplu quantum satis Cidru bouché E 150b Caramel de sulfit caustic E 150c Caramel de amoniu E 150d Caramel de sulfit de amoniu Unt (inclusiv unt cu conținut redus de grăsime și unt concentrat) E 160a Caroteni quantum satis Margarină, minarină, alte emulsii grase și grăsimi, în principal, fără apă E 160a Caroteni quantum satis E 100 Curcumină quantum satis E 160b Annatto, bixină, norbixină 10 mg/kg Brânză Sage Derby E 140 Clorofile
jrc2490as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87644_a_88431]
-
centrifughează maceratul decantat sau supranatantul din prima etapă de centrifugare la 7 000 g timp de 15 minute sau la 10 000 g timp de 10 minute la o temperatură sub 10°C. Se îndepărtează supranatantul fără a deranja extractul concentrat. (ii) Se filtrează maceratul printr-un sistem de filtrare cu mărimea porilor de 40 - 100 μm. Se accelerează filtrarea utilizând o pompă de vid. Se colectează filtratul într-un tub de centrifugare. Se spală filtrul cu tamponul de macerare. Se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Se spală filtrul cu tamponul de macerare. Se centrifughează filtratul la 7 000 g timp de 15 minute sau la 10 000 g timp de 10 minute la o temperatură sub 10°C. Se îndepărtează supranatantul fără a deranja extractul concentrat. 1.5 Se face o nouă suspensie a extractului concentrat în 1 ml de tampon de concentrare (apendicele 2). Se împarte în două părți egale și se transferă fiecare parte într-o microfiolă. Una dintre microfiole se folosește pentru testare
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
test se prepară printr-una dintre următoarele proceduri: (i) pentru extracte concentrate cu relativ puțin amidon: Se pipetează un volum standard (15 μl este adecvat unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre mai mari) din extractul concentrat resuspendat într-un șir de ferestre. Șirul rămas poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, după cum se prezintă în figura 1. (ii) pentru alte extracte concentrate: Se pregătesc diluții zecimale de 1/10, 1/100 și
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
diametru - volumul se mărește pentru ferestre mai mari) din extractul concentrat resuspendat într-un șir de ferestre. Șirul rămas poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, după cum se prezintă în figura 1. (ii) pentru alte extracte concentrate: Se pregătesc diluții zecimale de 1/10, 1/100 și 1/1 000 din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard (15 μl corespund unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
ferestre. Șirul rămas poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, după cum se prezintă în figura 1. (ii) pentru alte extracte concentrate: Se pregătesc diluții zecimale de 1/10, 1/100 și 1/1 000 din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard (15 μl corespund unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre mai mari) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un șir de ferestre. Șirul rămas
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de 1/10, 1/100 și 1/1 000 din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard (15 μl corespund unei ferestre de 6 mm diametru - volumul se mărește pentru ferestre mai mari) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un șir de ferestre. Șirul rămas poate fi folosit ca duplicat sau pentru un al doilea eșantion, după cum se prezintă în figura 2. 2.2. Se lasă picăturile să se usuce. Celulele bacteriene se fixează
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
antiserului în tampon IF. Diluția de lucru este diluția antiserului cu specificitate optimă și este de obicei jumătate din titru. Figura 1 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (i) și 2.3 pct. (i) Diluție standard a extractului concentrat resuspendat T = titru FITC T/4 T/2 T 2T => diluțiile duble ale antiserului Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 Figura 2 Pregătirea lamei de test în conformitate cu
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 Figura 2 Pregătirea lamei de test în conformitate cu 2.1 pct. (ii) și 2.3 pct. (ii) FITC Diluție standard a antiserului pur pur 1/10 !/100 1/1000 => Diluțiile decimale ale extractului concentrat resuspendat Eșantionul 1 ●1 ●2 ●3 ●4 ●5 Duplicatul eșantionului 1 sau al eșantionului 2 ●6 ●7 ●8 ●9 ●10 2.3.1. Se aranjează lamele pe hârtie absorbantă Se acoperă ferestrele de test cu diluția sau diluțiile antiserului. În
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
intens fluorescente cu morfologie caracteristică, atunci testul IF este negativ. (ii) Dacă sunt descoperite celule intens fluorescente cu morfologie caracteristică, se determină numărul mediu de celule pe câmp microscopic și se calculează numărul de celule (N) pe ml de extract concentrat resuspendat (apendicele 4). O populație de aproximativ 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat este considerată a fi limita de sensibilitate pentru testul IF, - pentru eșantioane cu N > 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat, testul IF este
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
celule intens fluorescente cu morfologie caracteristică, se determină numărul mediu de celule pe câmp microscopic și se calculează numărul de celule (N) pe ml de extract concentrat resuspendat (apendicele 4). O populație de aproximativ 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat este considerată a fi limita de sensibilitate pentru testul IF, - pentru eșantioane cu N > 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat, testul IF este considerat pozitiv, - pentru eșantioane cu N < 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
pe ml de extract concentrat resuspendat (apendicele 4). O populație de aproximativ 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat este considerată a fi limita de sensibilitate pentru testul IF, - pentru eșantioane cu N > 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat, testul IF este considerat pozitiv, - pentru eșantioane cu N < 10³ celule pe ml de extract concentrat resuspendat testul IF poate fi considerat pozitiv, (iii) dacă se observă un număr mare (>105 celule pe ml) de celule incomplet sau slab
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
sau slab fluorescente în titrul antiserului, trebuie efectuat un al doilea test: - un test bazat pe un principiu biologic diferit sau - o repetare a testului IF, cu un al doilea antiser sau cu o diluție de zece ori a extractului concentrat. 3. Testul ELISA În baza Robinson - Smith et al., 1995 Se folosește antiser pentru Ralstonia solanacearum, preferabil rasa 3/biovar 2. Se determină titrul suspensiei de 106 celule pe ml din sușa omologă de Ralstonia solanacearum. Se recomandă folosirea plăcilor
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
ml dintr-o sușă corespunzătoare de rasă/biovar de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează în mod identic cu eșantionul sau eșantioanele, dar separat de eșantioanele de pe placa de microtitru. 3.1. Se pipetează 100 - 200 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă. Se încălzește timp de 4 minute la 100 șC. Se pune microfiola la gheață. 3.2. Se adaugă un volum egal de tampon de acoperire din carbonat dublu concentrat (apendicele 5). Se centrifughează. 3.3. Se
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
Se pipetează 100 - 200 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă. Se încălzește timp de 4 minute la 100 șC. Se pune microfiola la gheață. 3.2. Se adaugă un volum egal de tampon de acoperire din carbonat dublu concentrat (apendicele 5). Se centrifughează. 3.3. Se aplică 100 μl alicote fiecăreia dintre minim ultimele două puțuri ale plăcii de microtitrare. Se incubează o oră la 37 șC sau peste noapte la 4 șC. 3.4. Se scot extractele din
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
prepară o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă din rasa 3 / biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează într-un mod identic cu eșantionul sau eșantioanele. 4.1. Se pipetează 100 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă. În mod alternativ, se tranferă 90 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă conținând 10 μl de 0,5M de NaOH. Se amestecă întorcând în mod repetat microfiola. 4.2. Se încălzește timp de 4
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
biovar 2 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv. Se testează într-un mod identic cu eșantionul sau eșantioanele. 4.1. Se pipetează 100 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă. În mod alternativ, se tranferă 90 μl din extractul concentrat resuspendat într-o microfiolă conținând 10 μl de 0,5M de NaOH. Se amestecă întorcând în mod repetat microfiola. 4.2. Se încălzește timp de 4 minute la 100 șC. Se pune imediat microfiola la gheață. 4.3. Se prepară
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
et al., 1996 5.1 Testul se efectuează printr-o tehnică corespunzătoare de diluare galvano-plastică, cum ar fi: (i) Se prepară cel puțin două diluții zecimale, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un mediu selectiv SMSA modificat (apendicele 7) și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
fi: (i) Se prepară cel puțin două diluții zecimale, 1/10 și 1/100 sau mai multe, dacă se consideră util, din extractul concentrat resuspendat în tamponul de concentrare. Se pipetează un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un mediu selectiv SMSA modificat (apendicele 7) și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului. Dacă se consideră util, se face o striere a diluției de 10 μl din extractul concentrat
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
concentrat resuspendat și fiecare diluție într-un mediu selectiv SMSA modificat (apendicele 7) și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului. Dacă se consideră util, se face o striere a diluției de 10 μl din extractul concentrat resuspendat. Bucla se trece prin flacără între striații. (ii) (ii) se transferă un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat în mediul selectiv SMSA modificat și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
toată suprafața mediului. Dacă se consideră util, se face o striere a diluției de 10 μl din extractul concentrat resuspendat. Bucla se trece prin flacără între striații. (ii) (ii) se transferă un volum standard măsurat (50 - 100 μl) din extractul concentrat resuspendat în mediul selectiv SMSA modificat și se împrăștie cu o baghetă de sticlă pe toată suprafața mediului. Bagheta se întinde pe cel puțin alte două plăci cu mediu SMSA modificat fără a se trece prin flacără. 5.2 Prin
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
plante test de răsad de tomată sau de vinete în stadiul celei de a treia frunze adevărate pentru fiecare eșantion. Plantele de test nu se udă cu 24 de ore înaintea inoculării. 6.2 Se distribuie 100 μl de extract concentrat resuspendat între plantele de test. Se inoculează în tulpină între cotiledoane și în unul sau mai multe alte locuri. 6.3 Prin aceeași tehnică se inoculează 10 răsaduri cu o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
solanacearum să fie detectată în controalele pozitive. Testul de probă biologică este pozitiv dacă plantele de test sunt infectate cu Ralstonia solanacearum. 7. Teste de îmbogățire În baza Elphinstone et al., 1996 7.1 Se transferă 100 μl de extract concentrat resuspendat în trei ml de mediu nutritiv SMSA modificat (apendicele 7). 7.2 Se incubează timp de 48 de ore și în nici un caz mai mult de 72 de ore la temperatura de 28°C, fără a închide ermetic dopul
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
obiectivului de 100x, 40x etc. din (2) din (3) Se calculează numărul de celule fluorescente tipice pe câmp (c). Se calculează numărul de celule fluorescente tipice pe fereastră (C). Se calculează numărul de celule fluorescente tipice pe ml de extract concentrat (N). unde y = volumul de extract concentrat pe fereastră, F = factorul de diluție al extractului concentrat. Apendicele 5 Materiale pentru testul ELISA Tampon de acoperire din carbonat dublu concentrat, pH 9,6 Na2CO3 6,36 g NaHCO3 11,72 g
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]