942 matches
-
timp de 5 minute în trei reprize cu TFS 0,01 M și pH 7,2, schimbându-se de fiecare dată soluția de spălare. 5.2.7. Se elimină cu grijă excesul de umezeală. 5.2.8. Se acoperă fiecare godeu cu conjugat ITCF în aceeași diluție utilizată pentru determinarea titrului și se incubează într-o cameră umedă întunecoasă, la temperatura ambiantă, timp de 30 de minute. 5.2.9. Se clătește și se spală ca mai înainte. 5.2.10
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
ITCF în aceeași diluție utilizată pentru determinarea titrului și se incubează într-o cameră umedă întunecoasă, la temperatura ambiantă, timp de 30 de minute. 5.2.9. Se clătește și se spală ca mai înainte. 5.2.10. În fiecare godeu, se pun 5 până la 10 мl de glicerină tamponată cu fosfat 0.1 M, cu pH 7,6 (sau o valoare similară cu un pH de minimum 7,6) și se acoperă cu o lamelă (apendice 2). 5.2.11
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
lamelă (apendice 2). 5.2.11. Se examinează cu un microscop prevăzut cu o sursă de lumină epifluorescentă și filtre adecvate pentru ITCF. Se recomandă folosirea unui obiectiv cu o putere de mărire de 400x până la 1000x. Se scanează fiecare godeu replicat de-a lungul a două diametre perpendiculare și de-a lungul perimetrului acestuia. Se observă celulele fluorescente din controalele pozitive și se determină titrul acestora. Se observă celulele fluorescente din godeul de control ITCF/TFS și, dacă acestea sunt
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
mărire de 400x până la 1000x. Se scanează fiecare godeu replicat de-a lungul a două diametre perpendiculare și de-a lungul perimetrului acestuia. Se observă celulele fluorescente din controalele pozitive și se determină titrul acestora. Se observă celulele fluorescente din godeul de control ITCF/TFS și, dacă acestea sunt absente, atunci se continuă cu godeurile de test. Se determină, în minimum 10 câmpuri microscopice, numărul mediu de celule fluorescente tipice morfologic per câmp și se calculează populația de celule pe mililitru
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
două diametre perpendiculare și de-a lungul perimetrului acestuia. Se observă celulele fluorescente din controalele pozitive și se determină titrul acestora. Se observă celulele fluorescente din godeul de control ITCF/TFS și, dacă acestea sunt absente, atunci se continuă cu godeurile de test. Se determină, în minimum 10 câmpuri microscopice, numărul mediu de celule fluorescente tipice morfologic per câmp și se calculează populația de celule pe mililitru de depozit nediluat (apendice 4). În timpul testului de imunofluorescență, pot apărea mai multe probleme
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
secunde. 9. Se spală cu apă de la robinet și se usucă cu un absorbant. Colorația bacteriilor Gram pozitive este violet-albastră; bacteriile Gram negative au o colorație roz-roșie. Apendicele 4 DETERMINAREA POPULAȚIEI DE CELULE POZITIVE LA TESTUL IF piD² Aria (S) godeului lamelei multispot = ──── (1) 4 Unde D = diametrul ferestrei. pid² Aria (s) câmpului obiectivului = ──── (2) 4 unde d = diametrul crmpului. Se calculează d prin măsurare directă sau prin formulele următoare: pi●i² s = (3) G²K²x4 unde i = coeficientul crmpului (depinde de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
40 x, etc.) a obiectivului ┌───── din (2), se obține d = │4s/pi \│ ┌───────── │ pi●i² ─ │4x ────── \ │ G²K²x4 i din (3), se obține d = \ │────���──── = ── (4) \│ pi GK Se numără celulele fluorescente tipice pe câmp (c). Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe godeu (C). S C = c ● ─ s Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe ml de depozit (N). 1000 N = Cx ──── x F y unde y = volumul depozitului pe godeu, unde F = factorul de diluție a depozitului. Apendicele 5 CULTURA VINETELOR Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
fluorescente tipice pe câmp (c). Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe godeu (C). S C = c ● ─ s Se calculează numărul celulelor fluorescente tipice pe ml de depozit (N). 1000 N = Cx ──── x F y unde y = volumul depozitului pe godeu, unde F = factorul de diluție a depozitului. Apendicele 5 CULTURA VINETELOR Se însămânțează semințe de vânătă (Solanum melongena cv. Black Beauty) într-un compost pasteurizat pentru semințe. Se plantează plantulele cu cotiledoane complet dezvoltate (10-14 zile) într-un compost pasteurizat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/152220_a_153549]
-
acest gel 15 ml trebuie plasat într-o placă Petri cu diametrul de 85 mm, încât să rezulte o grosime de 2,6 mm a agarului. 5. Modelul după care se realizează testul constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
Petri cu diametrul de 85 mm, încât să rezulte o grosime de 2,6 mm a agarului. 5. Modelul după care se realizează testul constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
85 mm, încât să rezulte o grosime de 2,6 mm a agarului. 5. Modelul după care se realizează testul constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
grosime de 2,6 mm a agarului. 5. Modelul după care se realizează testul constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
a agarului. 5. Modelul după care se realizează testul constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
se realizează testul constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3, 5 și 6 cu serurile de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
constă în tăierea în agar a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3, 5 și 6 cu serurile de testat. Godeurile trebuie
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
a 7 godeuri uscate, până la fundul plăcii; modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3, 5 și 6 cu serurile de testat. Godeurile trebuie umplute până când dispare meniscul. 7
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
modelul constă într-un godeu central și 6 godeuri plasate circular în jurul acestuia. Diametrul godeului central: 4 mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3, 5 și 6 cu serurile de testat. Godeurile trebuie umplute până când dispare meniscul. 7. Această rezultă în următoarele cantități care au
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
mm. Diametrul godeurilor periferice: 6 mm. Distanță dintre godeul central și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3, 5 și 6 cu serurile de testat. Godeurile trebuie umplute până când dispare meniscul. 7. Această rezultă în următoarele cantități care au fost obținute: Antigen: 32 f2æl; ser pozitiv: 73 æl (ser de control); ser de testat: 73 æl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
și godeurile periferice: 3 mm. 6. Godeul central trebuie umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 1 și 4 (vezi schemă de mai jos) sunt umplute cu ser pozitiv cunoscut, iar godeurile 2, 3, 5 și 6 cu serurile de testat. Godeurile trebuie umplute până când dispare meniscul. 7. Această rezultă în următoarele cantități care au fost obținute: Antigen: 32 f2æl; ser pozitiv: 73 æl (ser de control); ser de testat: 73 æl (ser care este suspect). 8. Incubația trebuie să dureze 72
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
testat este negativ dacă nu formează o linie specifică de precipitare cu antigenul virusului LEB și dacă nu curbează linia produsă de serul de control; (c) reacția nu poate fi considerată concludenta dacă: (i) curbează linia serului de control spre godeul cu antigenul virusului LEB, fără a forma o linie de precipitare vizibilă cu antigenul; sau (îi) dacă nu poate fi citită că negativă sau pozitivă; În cazul reacțiilor neconcludente, testul poate fi repetat folosind un ser concentrat. 10. Orice altă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
15 ml ser contra leucozei enzootice bovine (1:10), scuturând rapid și turnând 15 ml în fiecare din cele 2 plăci Petri. Se repetă această procedură cu serul contra LEB diluat 1:5. Cand agarul s-a întărit, se practică godeurile după cum urmează: Adăugarea antigenelor (i) Plăcile Petri 1 și 3: godeul A - antigen de referință nediluat; godeul B - antigen de referință diluat 1:2; godeul C și E - antigen de referință; godeul D - antigen de testat nediluat; (îi) Plăcile Petri
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
și turnând 15 ml în fiecare din cele 2 plăci Petri. Se repetă această procedură cu serul contra LEB diluat 1:5. Cand agarul s-a întărit, se practică godeurile după cum urmează: Adăugarea antigenelor (i) Plăcile Petri 1 și 3: godeul A - antigen de referință nediluat; godeul B - antigen de referință diluat 1:2; godeul C și E - antigen de referință; godeul D - antigen de testat nediluat; (îi) Plăcile Petri 2 și 4: godeul A - antigenul de testat nediluat; godeul B
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
din cele 2 plăci Petri. Se repetă această procedură cu serul contra LEB diluat 1:5. Cand agarul s-a întărit, se practică godeurile după cum urmează: Adăugarea antigenelor (i) Plăcile Petri 1 și 3: godeul A - antigen de referință nediluat; godeul B - antigen de referință diluat 1:2; godeul C și E - antigen de referință; godeul D - antigen de testat nediluat; (îi) Plăcile Petri 2 și 4: godeul A - antigenul de testat nediluat; godeul B - antigenul de testat diluat 1:2
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
procedură cu serul contra LEB diluat 1:5. Cand agarul s-a întărit, se practică godeurile după cum urmează: Adăugarea antigenelor (i) Plăcile Petri 1 și 3: godeul A - antigen de referință nediluat; godeul B - antigen de referință diluat 1:2; godeul C și E - antigen de referință; godeul D - antigen de testat nediluat; (îi) Plăcile Petri 2 și 4: godeul A - antigenul de testat nediluat; godeul B - antigenul de testat diluat 1:2; godeul C - antigenul de testat diluat 1:4
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]
-
5. Cand agarul s-a întărit, se practică godeurile după cum urmează: Adăugarea antigenelor (i) Plăcile Petri 1 și 3: godeul A - antigen de referință nediluat; godeul B - antigen de referință diluat 1:2; godeul C și E - antigen de referință; godeul D - antigen de testat nediluat; (îi) Plăcile Petri 2 și 4: godeul A - antigenul de testat nediluat; godeul B - antigenul de testat diluat 1:2; godeul C - antigenul de testat diluat 1:4; godeul D - antigenul de testat diluat 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/177320_a_178649]