900 matches
-
după care lungimea lor este conservată, astfel încât în semnalizarea punctelor de joncțiune funcționează un spațiator de 12 perechi de nucleotide în cooperare cu un spațiator de 23 perechi de nucleotide, evitându-se utilizarea a doi spațiatori de 12 perechi de nucleotide sau a doi spațiatori de 23 perechi de nucleotide, care ar fi neproductivă. La șoarece, în organizarea informației ereditare pentru imunoglobuline între segmentele genice pentru regiunea constantă se interpun și secvențe S (fig. 3.11). Simbolul S derivă de la cuvântul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
punctelor de joncțiune funcționează un spațiator de 12 perechi de nucleotide în cooperare cu un spațiator de 23 perechi de nucleotide, evitându-se utilizarea a doi spațiatori de 12 perechi de nucleotide sau a doi spațiatori de 23 perechi de nucleotide, care ar fi neproductivă. La șoarece, în organizarea informației ereditare pentru imunoglobuline între segmentele genice pentru regiunea constantă se interpun și secvențe S (fig. 3.11). Simbolul S derivă de la cuvântul „switch” (comutare în limba engleză) și înseamnă regiune de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
și înseamnă regiune de comutare. Rearanjamentul de segmente genice, prin utilizarea acestor secvențe de recunoaștere și de semnalizare conduce la formarea unei bucle a dublului helix ADN între segmentele genice D și JH care cuprinde spațiatorul de 12 perechi de nucleotide sau spațiatorul de 23 perechi de nucleotide,joncționată, fie la o secvență Cµ, fie la o secvență Cδ (după Alberts și colab., 1994). Excizia buclei va aduce segment genic D în nemijlocita vecinătate a segmentului genic JH și acestea vor
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
segmente genice, prin utilizarea acestor secvențe de recunoaștere și de semnalizare conduce la formarea unei bucle a dublului helix ADN între segmentele genice D și JH care cuprinde spațiatorul de 12 perechi de nucleotide sau spațiatorul de 23 perechi de nucleotide,joncționată, fie la o secvență Cµ, fie la o secvență Cδ (după Alberts și colab., 1994). Excizia buclei va aduce segment genic D în nemijlocita vecinătate a segmentului genic JH și acestea vor fi reunite covalent prin activitatea ligazică. Prin
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
rezulta suprasegmentul recombinat VH-D-JH. Într-o manieră similară se realizează și recombinarea de segmente genice pentru receptorii de antigene din celulele T (TCR). În joncțiunile D-JH și VH-D-JH apar variații de secvență prin deleții și inserții (adiții) de noi nucleotide, precum și prin substituții. În sectorul desemnat N al regiunii variabile a catenei H, apar inserții prin activitatea enzimei terminal-deoxinucleotid-transferazei (TdT). Secvențele inserționate pot codifica până la 10 aminoacizi. Astfel, variații remarcabile în secvența de nucleotide de la nivelul terminalului 5’ și al
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
deleții și inserții (adiții) de noi nucleotide, precum și prin substituții. În sectorul desemnat N al regiunii variabile a catenei H, apar inserții prin activitatea enzimei terminal-deoxinucleotid-transferazei (TdT). Secvențele inserționate pot codifica până la 10 aminoacizi. Astfel, variații remarcabile în secvența de nucleotide de la nivelul terminalului 5’ și al terminalului 3’ din acest sector D al genei active pentru imunoglobulină (fig. 3.12) amplifică de sute de ori potențialul de variație al secvenței de aminoacizi din catenele grele ale imunoglobulinelor, de unde și simbolul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
în limba engleză. Sectorul N al catenei imunoglobulinice H se află la nivelul joncțiunii dintre VH și suprasegmentul D-JH. Aici se află o secvență scurtă, dar înalt variabilă de aminoacizi, ca rezultat al activității enzimei TdT care adaugă randomic nucleotide la nivelul terminalului 3’ al segmentului VH, în cursul procesului de asamblare a genei funcționale pentru catena grea a imunoglobulinelor. Enzima TdT devine activă în etapa de maturație a celulei B, adăugând deoxiribonucleotide trifosfat libere la capătul 3’ al ADN
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
a fi deletat sectorul interpus între segmentul VH și suprasegmentul D-JH. Enzima TdT adaugă deoxiribonucleotide libere la acest capăt 3’-OH, fără a fi dependentă de o matriță, de unde și denumirea ei de terminal deoxiribonucleotid transferază. Substituțiile unice de nucleotide de la nivelul segmentului genic V generează milioane de variante ale regiunii variabile a catenelor imunoglobulinice, fenomen redat prin sintagma hipermutația domeniilor variabile. Acest fenomen este activ mai ales în condițiile unei imunizări intense, fiind asociat cu creșterea afinității anticorpilor pentru
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
variabile a catenelor imunoglobulinice, fenomen redat prin sintagma hipermutația domeniilor variabile. Acest fenomen este activ mai ales în condițiile unei imunizări intense, fiind asociat cu creșterea afinității anticorpilor pentru epitopul antigenului stimulator. Adiții de 1, 2 sau alt număr de nucleotide, indivizibil cu 3, conduc la modificarea întregului cadru de citire, în aval de punctul în care s-a produs evenimentul mutațional. Asemenea evenimente conduc la realizarea unui rearanjament neproductiv de segmente genice în limfocit și, în condiții normale, mecanismele de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
rearanjament neproductiv de segmente genice în limfocit și, în condiții normale, mecanismele de reglarea celulară vor direcționa o astfel de celulă B spre un program de apoptoză (moarte celulară programată genetic). La toate asemenea surse de variabilitate a secvențelor de nucleotide în procesul asamblării de segmente genice imunoglobulinice se adaugă asocierea întâmplătoare posttranslațională de catene L și de catene H, ajungându-se la o variație enormă a moleculelor imunoglobulinice de ordinul 109. Un rearanjament fructuos de segmente genice imunoglobulinice poate fi
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
unite covalent spre a realiza o sudură codificatoare între segmentele genice V și J. Dacă, la rândul lor, cele două capete semnalizatoare sunt unite, va rezulta o moleculă circulară care este excizată. Reacția de joncțiune produce schimbări în secvența de nucleotide dintre V și J, pentru catenele ușoare, sau între joncțiunile V-D și D-J, în catenele grele, ceea ce va determina modificări în secvența de aminoacizi a catenelor imunoglobulinice, la nivele corespunzătoare. Se produc deleții sau inserții de nucleotide în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de nucleotide dintre V și J, pentru catenele ușoare, sau între joncțiunile V-D și D-J, în catenele grele, ceea ce va determina modificări în secvența de aminoacizi a catenelor imunoglobulinice, la nivele corespunzătoare. Se produc deleții sau inserții de nucleotide în ADN, respectiv, de aminoacizi în catenele L și H (fig. 3.15). Clonarea și analiza segmentului ADN izolat din limfocitele B de la om care conține genele codificatoare pentru enzimele implicate în rearanjarea segmentelor genice imunoglobulinice au dat posibilitatea identificării
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
reacție de neîmperechere de la capăt generează o protruzie (o pătrundere) monocatenară. Creșterea hairpin-ului este realizată de RAG1 și RAG2. Sinteza unei catene complementare față de monocatena expusă convertește apoi capătul codificator într-un duplex extins. Această reacție explică introducerea (inserția) de nucleotide P la capetele codificatoare (fig. 3.16), dar nu se cunoaște care sunt enzimele implicate într-un asemenea proces. Unele nucleotide suplimentare pot fi inserționate, realizându-se secvențe întâmplătoare între capetele codificatoare. Acestea se numesc nucleotide N. Inserția lor se
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
catene complementare față de monocatena expusă convertește apoi capătul codificator într-un duplex extins. Această reacție explică introducerea (inserția) de nucleotide P la capetele codificatoare (fig. 3.16), dar nu se cunoaște care sunt enzimele implicate într-un asemenea proces. Unele nucleotide suplimentare pot fi inserționate, realizându-se secvențe întâmplătoare între capetele codificatoare. Acestea se numesc nucleotide N. Inserția lor se realizează sub acțiunea enzimei deoxinucleotidtransferază care este un component molecular activ al limfocitelor, la nivelul capetelor codificatoare 3’, generate în cursul
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
explică introducerea (inserția) de nucleotide P la capetele codificatoare (fig. 3.16), dar nu se cunoaște care sunt enzimele implicate într-un asemenea proces. Unele nucleotide suplimentare pot fi inserționate, realizându-se secvențe întâmplătoare între capetele codificatoare. Acestea se numesc nucleotide N. Inserția lor se realizează sub acțiunea enzimei deoxinucleotidtransferază care este un component molecular activ al limfocitelor, la nivelul capetelor codificatoare 3’, generate în cursul procesului de reunire de segmente genice imunoglobulinice. Toate aceste mecanisme asigură ca un punct de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de reparare a ADN. În consecință, pacienții umani cu defecte în sistemul de reparare a ADN și care prezintă sensibilitate crescută la radiații vor prezenta mutații în genele pentru proteinele Ku, XRCCA sau ADN ligaza IV. Schimbări în secvența de nucleotide apărute la nivelul joncțiunilor dintre secvențele genice în cursul asamblării genelor active pentru imunoglobuline generează o variabilitate corespunzătoare în secvența de aminoacizi, în poziții corespondente. Această regiune de joncțiune constituie parte a situsului de legare a antigenului și totodată de
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
regiune de joncțiune constituie parte a situsului de legare a antigenului și totodată de realizare a contactelor dintre catena ușoară și catena grea. De aici rezultă diversitatea maximă generată la situsul care contactează antigenul țintă. Schimbarea numărului de perechi de nucleotide, de la nivelul joncțiunii codificatoare afectează cadrul de citire. Procesul de joncțiune apare a fi întâmplător, în ceea ce privește cadrul de citire, astfel că doar 1/3 din secvențele reunite păstrează cadrul de citire corect, în cursul realizării joncțiunilor. Dacă regiunea V-J
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
este evaluată la 108-109 este realizată prin mai multe mecanisme:1. Diversitatea combinațiilor posibile, prin asamblarea randomică a segmentelor genice imunoglobulinice ce aparțin unei anumite categorii. Flexibilitatea joncțională a segmentelor genice imunoglobulinice datorată producerii de adiții, deleții și substituții de nucleotide la nivelul fiecărei joncțiuni, care modifică aproximativ trei aminoacizi la fiecare joncțiune, astfel că numărul variantelor biochimice de imunoglobulină crește de trei ori pentru catena L (1000 3 = 3 000) și de 9 ori, pentru catena H (12 000 9
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
aminoacizi la fiecare joncțiune, astfel că numărul variantelor biochimice de imunoglobulină crește de trei ori pentru catena L (1000 3 = 3 000) și de 9 ori, pentru catena H (12 000 9 ≈ 108 000). Adițiile sau delețiile unui număr de nucleotide indivizibil cu 3 (de exemplu 1 sau 2) determină ca secvența din aval să iasă din cadrul de citire, ca urmare a naturii triplete a codului genetic, ceea ce echivalează cu o rearanjare neproductivă (abortivă) de segmente genice. Dimpotrivă, adițiile sau delețiile
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
de exemplu 1 sau 2) determină ca secvența din aval să iasă din cadrul de citire, ca urmare a naturii triplete a codului genetic, ceea ce echivalează cu o rearanjare neproductivă (abortivă) de segmente genice. Dimpotrivă, adițiile sau delețiile unui număr de nucleotide divizibil cu 3 generează cadre de citire ce pot fi citite corect, dar care incorporează diversitate mai restrânsă sau mai extinsă. 3. Adiții de nucleotide în regiunea N care reprezintă cel mai variabil sector al regiunii determinatoare de complementaritate (CDR
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
cu o rearanjare neproductivă (abortivă) de segmente genice. Dimpotrivă, adițiile sau delețiile unui număr de nucleotide divizibil cu 3 generează cadre de citire ce pot fi citite corect, dar care incorporează diversitate mai restrânsă sau mai extinsă. 3. Adiții de nucleotide în regiunea N care reprezintă cel mai variabil sector al regiunii determinatoare de complementaritate (CDR) a moleculei de imunoglobulină de la nivelul aminoacizilor 86-91, unde se unesc segmentele genice VH și D - JH. Adițiile sunt catalizate de enzima terminal-deoxinucleotidil-transferază (TdT) care
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
mai ales post natal. Această enzimă acționează preponderent la nivelul segmentelor genice asamblate în gena pentru catena H, dar regiuni N au fost identificate și la joncțiunile V-J ale catenelor L. 4. Mutația somatică reprezentată de substituții unice de nucleotide în segmentele genice V, generează hipermutația somatică a domeniilor variabile ce are loc mai ales în condițiile unei imunizări intense, când are loc creșterea afinității anticorpilor pentru epitopul antigenului stimulator. Hipermutația somatică este considerată a reprezenta mecanismul esențial în generarea
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
asigură un repertoriu cât mai larg de imunoglobuline, capabil să acopere necesitățile de a contracara cei mai diverse antigene și a asigura supraviețuirea organismului și perpetuarea speciei. Mutația somatică reprezintă, la rândul său o sursă importantă a diversificării secvenței de nucleotide din segmentele genice imunoglobulinice și a diversității moleculare a imunoglobulinelor. Compararea secvențelor genelor imunoglobulinice exprimate și ale segmentelor genice din linia germinală permite constatarea că în genele imunoglobulinice exprimate apar noi secvențe de nucleotide. O anumită diversitate suplimentară apare ca
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
sursă importantă a diversificării secvenței de nucleotide din segmentele genice imunoglobulinice și a diversității moleculare a imunoglobulinelor. Compararea secvențelor genelor imunoglobulinice exprimate și ale segmentelor genice din linia germinală permite constatarea că în genele imunoglobulinice exprimate apar noi secvențe de nucleotide. O anumită diversitate suplimentară apare ca urmare a schimbărilor secvenței de la nivelul joncțiunilor V-J sau V-D-J. Dar, unele asemenea schimbări au loc în amonte de localizarea din domeniul variabil. Asemenea schimbări reprezintă mutații somatice induse în mod specific în
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]
-
asemenea secvențe genice diferite, dar înrudite au derivat dintr-un singur membru al familiei, și anume, din T15, prin mutație somatică. Schimbările secvenței se extind de-a lungul și dincolo de segmentul genic V. Ele presupun substituții ale perechilor individuale de nucleotide. Variația este diferită în fiecare caz în parte. Ea reprezintă aproximativ trei până la 15 substituții de nucleotide și un număr corespunzător de substituții de aminoacizi la nivelul proteinei. Dar, nu toate mutațiile afectează secvența de aminoacizi, deoarece unele dintre ele
Imunogenetică și oncogenetică. Principii de imunogenetică. Partea I by Lucian Gavrilă, Aurel Ardelean () [Corola-publishinghouse/Science/91987_a_92482]