7,394 matches
-
și se agită conținutul balonului de colectare din când în când. Dacă lichidul devine galben, se adaugă imediat un volum măsurat exact de acid sulfuric 0,1 N (3.5.) sau 0,5 N (3.6.). 5.3. Titrarea În balonul de colectare se titrează excesul de acid sulfuric cu o soluție de hidroxid de sodiu 0,1 N (3.9.) sau 0,25 N (3.10.), în funcție de starea obișnuită a acidului sulfuric folosit, până când culoarea devine galben deschis. 5.4
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
digestie și distilare pot fi folosite. Dacă astfel de aparate sunt folosite, transferul trebuie să fie efectuat fără pierderi. 7.2. Pentru produse cu un conținut scăzut de azot, volumul de acid sulfuric 0,1 N care trebuie plasat în balonul de colectare poate fi redus, dacă este necesar, până la 10 sau 15 ml și completat cu 25 ml de apă. 7.3. Dacă balonul aparatului de distilare nu are pâlnie de picurare, se adaugă hidroxidul de sodiu imediat înaintea conectării
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
un conținut scăzut de azot, volumul de acid sulfuric 0,1 N care trebuie plasat în balonul de colectare poate fi redus, dacă este necesar, până la 10 sau 15 ml și completat cu 25 ml de apă. 7.3. Dacă balonul aparatului de distilare nu are pâlnie de picurare, se adaugă hidroxidul de sodiu imediat înaintea conectării balonului la condensator, turnând încet lichidul pe marginile condensatorului astfel încât să nu se amestece cu soluția acidă. 3. DETERMINAREA PROTEINELOR BRUTE DIZOLVATE DE PEPSINĂ
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de colectare poate fi redus, dacă este necesar, până la 10 sau 15 ml și completat cu 25 ml de apă. 7.3. Dacă balonul aparatului de distilare nu are pâlnie de picurare, se adaugă hidroxidul de sodiu imediat înaintea conectării balonului la condensator, turnând încet lichidul pe marginile condensatorului astfel încât să nu se amestece cu soluția acidă. 3. DETERMINAREA PROTEINELOR BRUTE DIZOLVATE DE PEPSINĂ ȘI ACID CLORHIDRIC 1. Obiectiv și domeniu de aplicare Această metodă face posibilă determinarea fracțiunii de proteine
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
sau incubator, fixat la 40ș C ± 1ș C. 4.2. Aparat de digestie și distilare Kjeldahl. 5. Procedură 5.1. Prepararea soluției (vezi observația 7.2.) Se cântăresc 2 g din probă rotunjite la mg și se așează într-un balon gradat de 500 ml. Se adaugă 450 ml de soluție de clorhidrat de pepsină (3.4.) încălzită în prealabil la 40ș C și se agită pentru a preveni formarea aglomeratelor. Se verifică ca pH-ul suspensiei să fie mai mic
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
adaugă 450 ml de soluție de clorhidrat de pepsină (3.4.) încălzită în prealabil la 40ș C și se agită pentru a preveni formarea aglomeratelor. Se verifică ca pH-ul suspensiei să fie mai mic de 1,7. Se așează balonul în baia de apă sau în incubator (4.1.) și se lasă acolo timp de 48 de ore. Se agită după 8, 24 și 32 de ore. După 48 de ore, se adaugă 15 ml de acid clorhidric (3.1
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
ore. După 48 de ore, se adaugă 15 ml de acid clorhidric (3.1.), se răcește la 20ș C, se completează volumul cu apă și se filtrează. 5.2. Digestia Se iau 250 ml din filtrat și se așează în balonul aparatului de distilare (4.2.). Se adaugă reactivii necesari pentru digestia indicată la pct. 5.1. cea de-a doua propoziție din metoda determinării proteinei brute. Se omogenizează și se fierbe. Dacă se formează orice fel de spumă, se adaugă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
tricloroacetic. 3.5. Soluție de hidroxid de sodiu 0,5 N. 3.6. Reactivul Folin-Ciocalteu. Se plasează 100 g de wolframat de sodiu (Na2WO4·2H2O), 25 g de molibdat de sodiu (Na2MoO4·2H2O) și 700 ml de apă într-un balon de 2 litri cu fundul rotund prevăzut cu o îmbinare cu sticlă șlefuită standard. Se adaugă 50 ml de acid fosforic (d: 1,71) și 100 ml de acid clorhidric concentrat (d: 1,19), se conectează un condensator cu reflux
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
2 litri cu fundul rotund prevăzut cu o îmbinare cu sticlă șlefuită standard. Se adaugă 50 ml de acid fosforic (d: 1,71) și 100 ml de acid clorhidric concentrat (d: 1,19), se conectează un condensator cu reflux la balon, se aduce la punctul de fierbere și se păstrează soluția fierbând încet timp de 10 ore. Se lasă să se răcească, se detașează condensatorul cu reflux, se adaugă 175 g de sulfat de litiu (Li2SO4·2H2O), 50 ml de apă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
minute pentru a elibera excesul de brom. 3.7. Soluția de hemoglobină: Se cântărește o cantitate de hemoglobină (aprox. 2 g de substrat de proteine determinat conform Anson) care să corespundă la 354 mg azot1 și se așeazăă într-un balon de 200 ml prevăzut cu o îmbinare cu sticlă șlefuită standard. Se adaugă câțiva ml din acidul clorhidric (3.2.), se conectează balonul la pompa de vid și se agită până când hemoglobina s-a dizolvat complet. Se deconectează de la pompă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de proteine determinat conform Anson) care să corespundă la 354 mg azot1 și se așeazăă într-un balon de 200 ml prevăzut cu o îmbinare cu sticlă șlefuită standard. Se adaugă câțiva ml din acidul clorhidric (3.2.), se conectează balonul la pompa de vid și se agită până când hemoglobina s-a dizolvat complet. Se deconectează de la pompă și, în timpul agitării, se adaugă acid clorhidric (3.2.) pentru a completa până la 100 ml. Se prepară imediat înainte de folosire. 3.8. Soluția
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
4. Aparat de măsurat pH-ul. 5. Procedura 5.1. Prepararea soluției (vezi observația 7.1.) Se dizolvă 150 mg de pepsină în 100 ml de acid clorhidric (3.2.). Se pun cu pipeta 2 ml de soluție într-un balon gradat de 50 ml și se completează volumul cu acid clorhidric (3.3.). pH-ul, verificat cu aparatul respectiv, trebuie să fie 1,6 ± 0,1. Se scufundă balonul în baia de apă (4.1.). 5.2. Hidroliza Se pun
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
2.). Se pun cu pipeta 2 ml de soluție într-un balon gradat de 50 ml și se completează volumul cu acid clorhidric (3.3.). pH-ul, verificat cu aparatul respectiv, trebuie să fie 1,6 ± 0,1. Se scufundă balonul în baia de apă (4.1.). 5.2. Hidroliza Se pun cu pipeta 5,0 ml de soluție de hemoglobină (3.7.) într-un tub test, se încălzesc la 25ș C în baia de apă (4.1.), se adaugă 1
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
soluție de acid tricloroacetic (3.4.) încălzită în prealabil la 25ș C, se omogenizează și se filtrează printr-un filtru uscat. 5.3. Dezvoltarea colorației și măsurarea densității optice Se pune cu pipeta 5,0 ml de filtrat într-un balon Erlenmayer de 50 ml, se adaugă 10,0 ml de soluție de hidroxid de sodiu (3.5.), se agită constant, 3,0 ml de reactiv Folin-Ciocalteu diluat (3.6.). După 5 - 10 minute, se determină densitatea optică a soluției cu
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
așează 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 și 5,0 ml părți alicote ale soluției de tirozină standard (3.8.), corespunzând respectiv la 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 și 1,0 μmoli de tirozină în baloane Erlenmayer de 50 ml. Se completează seria cu o soluție de referință fără tirozină. Se completează volumele până la 5,0 ml cu acid clorhidric (3.1.). Se adaugă 10,0 ml de soluție de hidroxid de sodiu (3.5.) și
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
se măsoară la 440 nm. 3. Reactivi 3.1. Amestecul 2-propanol-hexan: se amestecă 60 părți de volum de amestec de 2-propanol A.R., cu 40 de părți de volum de n-hexan. 3.2. Solventul A: Se așează într-un balon gradat de 1 litru aproximativ 500 ml de amestec de 2-propanol hexan (3.1.), 2 ml de 3-amino 1 propanol, 8 ml de acid acetic concentrat și 50 ml de apă. Se completează volumul cu amestecul de 2-propanol hexan (3
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
completează volumul cu amestecul de 2-propanol hexan (3.1.). Acest reactiv este stabil timp de o săptămână. 3.3. Solventul B: Se pun cu pipeta 2 ml de 3-amino 1 propanol și 10 ml de acid acetic concentrat într-un balon gradat de 100 ml. Se răcește la temperatura camerei și se completează volumul cu N, N-dimetilformamidă. Acest reactiv este stabil timp de o săptămână. 3.4. Anilină A.R.: Dacă densitatea optică în proba martor depășește 0,022, se
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
de o săptămână. 3.4. Anilină A.R.: Dacă densitatea optică în proba martor depășește 0,022, se distilează anilina peste praful de zinc, îndepărtând primele și ultimele fracțiuni de 10 % de distilat. Răcit în frigider și stocat într-un balon din sticlă maro cu dop de plută, acest reactiv se păstrează timp de câteva luni. 3.5. Soluția standard de gossypol A: Se așează 27,9 mg de acetat de gossypol într-un balon gradat de 250 ml. Se dizolvă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
în frigider și stocat într-un balon din sticlă maro cu dop de plută, acest reactiv se păstrează timp de câteva luni. 3.5. Soluția standard de gossypol A: Se așează 27,9 mg de acetat de gossypol într-un balon gradat de 250 ml. Se dizolvă și se completează volumul cu solventul A (3.2.). Se pun cu pipeta 50 ml din această soluție într-un balon gradat de 250 ml și se completează volumul cu solventul A. Concentrația de
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
gossypol A: Se așează 27,9 mg de acetat de gossypol într-un balon gradat de 250 ml. Se dizolvă și se completează volumul cu solventul A (3.2.). Se pun cu pipeta 50 ml din această soluție într-un balon gradat de 250 ml și se completează volumul cu solventul A. Concentrația de gossypol a acestei soluții este 0,02 mg per ml. Se lasă să stea timp de o oră la temperatura camerei înainte de utilizare. 3.6. Soluția standard
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
a acestei soluții este 0,02 mg per ml. Se lasă să stea timp de o oră la temperatura camerei înainte de utilizare. 3.6. Soluția standard de gossypol B: Se așează 27,9 mg de acetat de gossypol într-un balon gradat de 50 ml. Se dizolvă și se completează volumul cu solventul B (3.3.). Concentrația de gossypol a acestei soluții este de 0,5 mg per ml. 3.7. Soluțiile standard de gossypol A și B rămân stabile timp
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
5 g, astfel o parte alicotă a filtratului conține între 40 și 200 μg de gossypol. Analiza ar trebui făcută la o temperatură a camerei de aproximativ 20ș C. 5.2. Determinarea gossypolului liber Se plasează proba test într-un balon cu gât din sticlă șlefuită de 250 ml, fundul balonului fiind acoperit cu sticlă sfărâmată. Folosind o pipetă, se adaugă 50 ml de solvent A (3.2.), se astupă balonul cu un dop de plută și se amestecă pentru o
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
40 și 200 μg de gossypol. Analiza ar trebui făcută la o temperatură a camerei de aproximativ 20ș C. 5.2. Determinarea gossypolului liber Se plasează proba test într-un balon cu gât din sticlă șlefuită de 250 ml, fundul balonului fiind acoperit cu sticlă sfărâmată. Folosind o pipetă, se adaugă 50 ml de solvent A (3.2.), se astupă balonul cu un dop de plută și se amestecă pentru o oră în mixer. Se filtrează printr-un filtru uscat și
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
2. Determinarea gossypolului liber Se plasează proba test într-un balon cu gât din sticlă șlefuită de 250 ml, fundul balonului fiind acoperit cu sticlă sfărâmată. Folosind o pipetă, se adaugă 50 ml de solvent A (3.2.), se astupă balonul cu un dop de plută și se amestecă pentru o oră în mixer. Se filtrează printr-un filtru uscat și se colectează filtratul într-un balon mic cu gât din sticlă șlefuită. În timpul filtrării, se acoperă balonul cu o sticlă
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]
-
Folosind o pipetă, se adaugă 50 ml de solvent A (3.2.), se astupă balonul cu un dop de plută și se amestecă pentru o oră în mixer. Se filtrează printr-un filtru uscat și se colectează filtratul într-un balon mic cu gât din sticlă șlefuită. În timpul filtrării, se acoperă balonul cu o sticlă de ceasornic. Se pun cu pipeta părți alicote identice de filtrat conținând 50 - 100 μg de gossypol în fiecare din cele două baloane gradate de 25
jrc149as1972 by Guvernul României () [Corola-website/Law/85284_a_86071]