10,924 matches
-
și în funcție de dotarea și experiența centrului medical. 4. Pacienți cu Insuficiență Venoasa Cronică în stadiul CEAP C3 Descrierea pacientului în conformitate cu clasificarea CEAP revizuită: - pacienți cu edeme - definite că și creșterea perceptibila a volumului de fluide la nivelul pielii și țesutului celular subcutanat, evidențiabil clinic prin semnul godeului. De cele mai multe ori edemul apare în regiunea gleznei dar se poate extinde la picior și ulterior la nivelul întregului membru inferior. Modalități terapeutice: - schimbarea stilului de viață; - tratament sistemic: diosmină (450 mg) + hesperidină (50
EUR-Lex () [Corola-website/Law/242306_a_243635]
-
apropierea varicelor dar poate apărea oriunde la nivelul membrului inferior. Este cel mai frecvent consecință Insuficientei Venoase Cronice, dar poate să fie și secundară tratamentelor locale aplicate. C4b - pacienți care prezintă: - Lipodermatoscleroză: fibroza postinflamatorie cronică localizată a pielii și țesutului celular subcutanat, asociată în unele cazuri cu contractura a tendonului Ahilean. Uneori este precedată de edem inflamator difuz, dureros. În acest stadiu pretează la diagnostic diferențial cu limfangita, erizipelul sau celulița. Este un semn al Insuficientei Venoase Cronice foarte avansate. - Atrofia
EUR-Lex () [Corola-website/Law/242306_a_243635]
-
ecografie, tomografie) permit completarea diagnosticului și stadializarea limfoamelor, adică stabilirea gradul de extensie al bolii la diagnostic. Alte teste de laborator care aduc elemente de prognostic, dar care nu sunt obligatorii pentru stabilirea diagnosticului sunt testele citogenetice și de biologie celulară. Aceste teste sunt facultative. 2. Indexul Prognostic Internațional Indexul Prognostic Internațional a fost elaborat pentru a putea prezice răspunsul la terapie al pacienților cu limfoame difuze cu celule mari. Indexul cuprinde 5 parametri. În lista de mai jos sunt subliniați
EUR-Lex () [Corola-website/Law/242306_a_243635]
-
doză repetată (28 de zile) (administrare cutanată) 144 B.10. Mutageneza (Test citogenetic in vitro pe celule de mamifere) 148 B.11. Mutageneza (Test citogenetic in vitro al măduvei osoase la mamifere, analiză cromozomială) 151 B.12. Mutageneza (Testul micronucleilor celulari) 154 B.13. Mutageneza (Testul de mutație reversă pe Escherichia coli) 157 B.14. Mutageneza (Testul de mutație reversă pe Salmonella typhimurium) 160 PARTEA C: METODE PENTRU DETERMINAREA ECOTOXICITĂȚII 163 C.1. Toxicitatea acută la pești 163 C.2. Toxicitate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Nici una. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul citogenetică in vitro este un test de potențial mutagen pe termen scurt destinat evidențierii aberațiilor cromozomiale structurale în culturile de celule ale mamiferelor. Se pot folosi culturi de linii celulare stabilite, precum și culturi de celule primare. După expunerea la substanțele de testare în prezența și în absența unui amestec de activare a enzimelor hepatice (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), culturile celulare se tratează cu un inhibitor al fusului mitotic, precum
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
celule ale mamiferelor. Se pot folosi culturi de linii celulare stabilite, precum și culturi de celule primare. După expunerea la substanțele de testare în prezența și în absența unui amestec de activare a enzimelor hepatice (fracțiune postmitocondrială suplimentată cu cofactori), culturile celulare se tratează cu un inhibitor al fusului mitotic, precum colchinina în vederea acumulării celulelor în stadiu de tip metafază al mitozei (c-metafază). Celulele se recoltează la momente adecvate și se realizează preparate cromozomiale. Preparatele se colorează și celulele în metafază
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
preparate cromozomiale. Preparatele se colorează și celulele în metafază se analizează pentrua se evidenția anomaliile cromozomiale. 1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri 1.6.1.1. Celule Se folosesc linii celulare stabilite sau culturi de celule primare, de exemplu celule de hamster chinezesc și limfocite umane. Substanțele de testare sunt înglobate în mediul de cultură sau dizolvate într-un excipient corespunzător înainte de tratarea celulelor. 1.6.1.2. Sistemul de activare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
fitohemaglutinină, ser fetal bovin și antibiotice se adaugă sânge integral heparinizat, incubat la 37°C. 1.6.3.2. Tratarea culturilor cu compusul de testare (i) Tratamentul fără amestec hepatic enzimatic activator Toate tratamentele trebuie să acopere timpul unui ciclu celular complet și schemele de fixare trebuie să asigure analiza primelor mitoze posterioare tratamentului celulelor tratate în diferite stadii de evoluție. Dacă tratamentul nu coincide cu lungimea unui ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli, în vederea prelevării eșantioanelor de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
hepatic enzimatic activator Toate tratamentele trebuie să acopere timpul unui ciclu celular complet și schemele de fixare trebuie să asigure analiza primelor mitoze posterioare tratamentului celulelor tratate în diferite stadii de evoluție. Dacă tratamentul nu coincide cu lungimea unui ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli, în vederea prelevării eșantioanelor de celule care se găseau în timpul tratamentului la stadii diferite ale ciclului celular, adică G1, S și G2. Se adaugă substanța de testare la culturile de linii celulare stabilite când
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
posterioare tratamentului celulelor tratate în diferite stadii de evoluție. Dacă tratamentul nu coincide cu lungimea unui ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli, în vederea prelevării eșantioanelor de celule care se găseau în timpul tratamentului la stadii diferite ale ciclului celular, adică G1, S și G2. Se adaugă substanța de testare la culturile de linii celulare stabilite când acestea se găsesc în faza lor de creștere exponențială. Se tratează culturile de limfocite umane când sunt încă în stare semisincronă. (ii) Tratamentul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
unui ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli, în vederea prelevării eșantioanelor de celule care se găseau în timpul tratamentului la stadii diferite ale ciclului celular, adică G1, S și G2. Se adaugă substanța de testare la culturile de linii celulare stabilite când acestea se găsesc în faza lor de creștere exponențială. Se tratează culturile de limfocite umane când sunt încă în stare semisincronă. (ii) Tratamentul cu amestec enzimatic hepatic activator Amestecul de activare a enzimelor hepatice folosite pentru tratarea substanței
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
hepatic activator Amestecul de activare a enzimelor hepatice folosite pentru tratarea substanței de testare se menține prezent cât de mult posibil, fără a exercita un efect toxic asupra celulelor. Dacă, din motive de toxicitate, acest tratament nu acoperă un ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli în vederea prelevării eșantioanelor de celule care se găseau în stadii diferite ale ciclului celular în momentul tratamentului, adică G1, S și G2. Recoltarea celulelor: Înainte de recoltare, culturile celulare se tratează o perioadă adecvată
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
fără a exercita un efect toxic asupra celulelor. Dacă, din motive de toxicitate, acest tratament nu acoperă un ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli în vederea prelevării eșantioanelor de celule care se găseau în stadii diferite ale ciclului celular în momentul tratamentului, adică G1, S și G2. Recoltarea celulelor: Înainte de recoltare, culturile celulare se tratează o perioadă adecvată cu un inhibitor de fus mitotic. Fiecare cultură se recoltează și se prelucrează separat în vederea preparării cromozomilor. Sunt necesari minim doi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
tratament nu acoperă un ciclu celular complet, se aleg timpi de fixare multipli în vederea prelevării eșantioanelor de celule care se găseau în stadii diferite ale ciclului celular în momentul tratamentului, adică G1, S și G2. Recoltarea celulelor: Înainte de recoltare, culturile celulare se tratează o perioadă adecvată cu un inhibitor de fus mitotic. Fiecare cultură se recoltează și se prelucrează separat în vederea preparării cromozomilor. Sunt necesari minim doi timpi de prelevare. Se recomandă ca primul timp să fie după aproximativ un ciclu
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
se tratează o perioadă adecvată cu un inhibitor de fus mitotic. Fiecare cultură se recoltează și se prelucrează separat în vederea preparării cromozomilor. Sunt necesari minim doi timpi de prelevare. Se recomandă ca primul timp să fie după aproximativ un ciclu celular, iar cel de-al doilea mai târziu. Acest lucru asigură acoperirea tuturor stadiilor ciclului celular și permite întârzierea ciclului celular. 1.6.3.3. Prepararea cromozomilor Prepararea cromozomilor presupune tratarea celulelor cu soluții hipotone, fixarea, etalarea pe lame și colorarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
și se prelucrează separat în vederea preparării cromozomilor. Sunt necesari minim doi timpi de prelevare. Se recomandă ca primul timp să fie după aproximativ un ciclu celular, iar cel de-al doilea mai târziu. Acest lucru asigură acoperirea tuturor stadiilor ciclului celular și permite întârzierea ciclului celular. 1.6.3.3. Prepararea cromozomilor Prepararea cromozomilor presupune tratarea celulelor cu soluții hipotone, fixarea, etalarea pe lame și colorarea acestora. Analiza: Pentru depistarea anomaliilor cromozomiale, sunt analizate pe cultură minim 100 de metafaze bine
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
preparării cromozomilor. Sunt necesari minim doi timpi de prelevare. Se recomandă ca primul timp să fie după aproximativ un ciclu celular, iar cel de-al doilea mai târziu. Acest lucru asigură acoperirea tuturor stadiilor ciclului celular și permite întârzierea ciclului celular. 1.6.3.3. Prepararea cromozomilor Prepararea cromozomilor presupune tratarea celulelor cu soluții hipotone, fixarea, etalarea pe lame și colorarea acestora. Analiza: Pentru depistarea anomaliilor cromozomiale, sunt analizate pe cultură minim 100 de metafaze bine etalate. Înainte de analiză, lamele se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
etalarea pe lame și colorarea acestora. Analiza: Pentru depistarea anomaliilor cromozomiale, sunt analizate pe cultură minim 100 de metafaze bine etalate. Înainte de analiză, lamele se codează. Pentru limfocitele umane se analizează doar metafazele care conțin 46 de centromeri. În liniile celulare stabilite se analizează numai metafazele ce conțin ±2 centromeri din numărul modal. În plus, se calculează indicele mitotic sau alți indicatori de citotoxicitate pe parcursul experimentului la fiecare doză. 2. DATE Datele se sistematizează în tabele. Aberațiile de tip cromatidian (lacune
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
experimentale: compoziția mediului, concentrația CO2, temperatura de incubare, timpul de incubare, nivelul dozelor, timpul de tratare, durata tratamentului cu inhibitor de fus mitotic și concentrația acestuia, tipul de amestec hepatic enzimatic activator folosit, martorii pozitivi și negativi, - numărul de culturi celulare, - numărul de metafaze analizate (datele se raportează separat pentru fiecare cultură), - indicele mitotic sau alți indicatori de citotoxicitate, - tipul și numărul de aberații raportate separat pentru fiecare cultură tratată sau martor, numărul modal al cromozomilor liniilor celulare stabilite folosite, - evaluarea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
compusul testat o singură dată, la cea mai mare doză tolerată. În prima etapă, probele sunt prelevate la 24 de ore după tratament. Nu mai sunt necesare prelevări ulterioare dacă în acest stadiu rezultatele sunt cert pozitive. Deoarece cinetica ciclului celular poate fi influențată de substanța de testare, se folosește un moment de prelevare precoce și unul tardiv, spațiate în mod convenabil în intervalul 6 - 48 de ore. Pentru alte niveluri suplimentare ale dozei de tratament, probele trebuie luate în intervalul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
martor, - semne de toxicitate pe perioada desfășurării studiului, - evaluarea statistică, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B (punctul D). 4. REFERINȚE BIBLIOGRAFICE Vezi introducerea generală: partea B (punctul E). B12. MUTAGENEZA (TESTUL MICRONUCLEILOR CELULARI) 1. METODĂ 1.1. INTRODUCERE Vezi introducerea generală: partea B (punctul A). 1.2. DEFINIȚIE Vezi introducerea generală: partea B (punctul C). 1.3. SUBSTANȚE DE REFERINȚĂ Nici una. 1.4. PRINCIPIUL METODEI DE TESTARE Testul micronucleului este un test in
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
tratament. Pregătirea măduvei osoase Măduva osoasă se obține din ambele oase femurale ale unor animale sacrificate recent, prin clătire cu ser fetal de vițel. Celulele se sedimentează prin centrifugare și se înlătură supernatantul. Se așează pe lame picături din suspensia celulară omogenă și se întind ca frotiu. După uscarea în aer, lamele se colorează. Analiză Lamele se codează înaintea examinării microscopice. Pentru determinarea incidenței micronucleilor, se numără cel puțin 1 000 de eritrocite policromatice pentru fiecare animal. Pentru fiecare animal se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
amestecă cu agar-agar de acoperire și se varsă la suprafața unei cutii de agar-agar selectiv. 1.6.1. Pregătire 1.6.1.1. Bacterii Se cultivă bacteriile la 37șC până la faza exponențială tardivă sau faza staționară precoce a creșterii. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie de 108 - 109 celule/ml. 1.6.1.2. Activare metabolică Bacteriile tratate cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem de activare metabolică adecvat. Cel mai frecvent folosit sistem este
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
enzimatici. 1.6.2. Condiții experimentale 1.6.2.1. Linii de experiment Se folosesc trei linii, respectiv WP2, WP2 uvr A și WP2 uvr A pKM 101. Se folosesc metodele recunoscute de preparare și păstrare a culturilor de tulpini celulare. Se verifică cerințele de creștere și identitatea genetică a speciilor, sensibilitatea acestora la razele UV sau la mitomicina C, precum și rezistența la ampicilină a speciei WP2 uvr A pKM 101. Liniile trebuie, de asemenea, să producă revertanți spontani în intervalele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
1.5. CRITERII DE CALITATE Nici unul. 1.6. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.6.1. Pregătiri 1.6.1.1. Bacterii Culturile proaspete de bacterii se incubează la 37șC până la faza exponențială tardivă sau faza staționară precoce a creșterii. Densitatea celulară aproximativă trebuie să fie 108 - 109 celule pe mililitru. 1.6.1.2. Activare metabolică Bacteriile se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem de activare metabolică adecvat. Sistemul cel mai frecvent folosit
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]