6,925 matches
-
liniilor celulare bine caracterizate, 4-nitroquinolin-N oxid (4-NQO) poate fi utilizat atât pentru autoradiografie, cât și pentru testele LSC efectuate fără activare metabolică. N-dimetilnitrozamina este un exemplu de compus care poate fi folosit ca martor pozitiv când se folosesc sisteme de activare metabolică. Concentrații de expunere Trebuie folosite mai multe concentrații ale substanței de testare, alese într-un interval adecvat pentru definirea răspunsului. Concentrația maximă trebuie să producă unele efecte citotoxice. Compușii relativ insolubili în apă trebuie testați până la limita superioară a
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
solubile în apă, limita superioară a concentrației se stabilește de la caz la caz. Celule Mediile de creștere, concentrația CO2, temperatura și umiditatea adecvate sunt necesare pentru menținerea culturilor. Liniile celulare bine caracterizate trebuie verificate periodic în vederea decelării contaminării cu Mycoplasma. Activare metabolică Pentru culturile primare de hepatocite nu se utilizează un sistem de activare metabolică. Liniile celulare bine caracterizate și limfocitele se tratează cu substanța de testare cu și fără un sistem adecvat de activare metabolică. Mod de operare Pregătirea culturilor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Celule Mediile de creștere, concentrația CO2, temperatura și umiditatea adecvate sunt necesare pentru menținerea culturilor. Liniile celulare bine caracterizate trebuie verificate periodic în vederea decelării contaminării cu Mycoplasma. Activare metabolică Pentru culturile primare de hepatocite nu se utilizează un sistem de activare metabolică. Liniile celulare bine caracterizate și limfocitele se tratează cu substanța de testare cu și fără un sistem adecvat de activare metabolică. Mod de operare Pregătirea culturilor Liniile celulare bine caracterizate se obțin din culturi de sușe (prin tripsinizare sau
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
periodic în vederea decelării contaminării cu Mycoplasma. Activare metabolică Pentru culturile primare de hepatocite nu se utilizează un sistem de activare metabolică. Liniile celulare bine caracterizate și limfocitele se tratează cu substanța de testare cu și fără un sistem adecvat de activare metabolică. Mod de operare Pregătirea culturilor Liniile celulare bine caracterizate se obțin din culturi de sușe (prin tripsinizare sau descuamare) cultivate cu o densitate corespunzătoare în vase de cultură și incubate la 37 C. Culturile pe termen scurt de hepatocite
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de pasaje celulare în momentul tratamentului, numărul de culturi celulare, - metodele folosite pentru menținerea culturilor, inclusiv compoziția mediului, temperatura și concentrația CO2, - substanța de testare, excipientul folosit, concentrațiile și motivația alegerii acestor concentrații folosite în experiment, - informații despre sistemul de activare metabolică, - schema de tratament, - martorii pozitivi și negativi, - tehnica de autoradiografie folosită, - metodele folosite pentru a bloca intrarea celulelor în faza S, - metodele folosite pentru extragerea ADN și determinarea conținutului total în ADN prin tehnica LSC, - dacă este posibil, relația
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
marcare diferențiată a cromatidelor surori, rezultat ce poate fi obținut prin încorporarea bromodeoxiuridinei (BrdU) în ADN-ul cromozomial pentru două cicluri celulare. Celulele de mamifere sunt tratate in vitro cu substanța de testare cu și fără un sistem exogen de activare metabolică la mamifere, dacă este cazul, apoi sunt cultivate pe o perioadă de două cicluri de replicare într-un mediu ce conține BrdU. După tratarea cu un inhibitor de fus mitotic (de exemplu colchicină) pentru oprirea celulelor în stadiul de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
afecteze în mod semnificativ viabilitatea celulară sau rata de creștere, iar efectele asupra frecvenței SCE trebuie monitorizate printr-un solvent martor. Celulele se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem exogen adecvat de activare metabolică la mamifere. Alternativ, dacă se folosesc celule cu activitate metabolică intrinsecă, trebuie să se cunoască intensitatea și natura acestei activități, astfel încât să fie corespunzătoare clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Numărul de culturi Pentru fiecare punct experimental se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
să fie corespunzătoare clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Numărul de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesec cel puțin două culturi. Folosirea martorilor pozitivi și negativi În toate experimentele se folosesc martori pozitivi, folosind atât un compus cu activare directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică; de asemenea, se folosește și un martor pentru excipient. Exemple de substanțe ce pot fi folosite ca martori pozitivi: - compuși cu activare directă: - etilmetansulfonatul, - compuși cu activare indirectă: - ciclofosfamida. După caz
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Condiții experimentale Numărul de culturi Pentru fiecare punct experimental se folosesec cel puțin două culturi. Folosirea martorilor pozitivi și negativi În toate experimentele se folosesc martori pozitivi, folosind atât un compus cu activare directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică; de asemenea, se folosește și un martor pentru excipient. Exemple de substanțe ce pot fi folosite ca martori pozitivi: - compuși cu activare directă: - etilmetansulfonatul, - compuși cu activare indirectă: - ciclofosfamida. După caz, se poate introduce un martor pozitiv suplimentar din
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
se folosesc martori pozitivi, folosind atât un compus cu activare directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică; de asemenea, se folosește și un martor pentru excipient. Exemple de substanțe ce pot fi folosite ca martori pozitivi: - compuși cu activare directă: - etilmetansulfonatul, - compuși cu activare indirectă: - ciclofosfamida. După caz, se poate introduce un martor pozitiv suplimentar din aceeași clasă chimică cu substanța de testare. Concentrații de expunere Se vor folosi cel puțin trei concentrații ale substanței de testare, spațiate în
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
atât un compus cu activare directă, cât și un compus ce necesită activare metabolică; de asemenea, se folosește și un martor pentru excipient. Exemple de substanțe ce pot fi folosite ca martori pozitivi: - compuși cu activare directă: - etilmetansulfonatul, - compuși cu activare indirectă: - ciclofosfamida. După caz, se poate introduce un martor pozitiv suplimentar din aceeași clasă chimică cu substanța de testare. Concentrații de expunere Se vor folosi cel puțin trei concentrații ale substanței de testare, spațiate în mod adecvat. Concentrația maximă trebuie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
una sau două ore. Durata tratamentului poate fi extinsă în anumite cazuri până la două cicluri celulare complete. Celulele fără o activitate metabolică intrinsecă corespunzătoare se tratează cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem de activare metabolică. La sfârșitul perioadei de expunere, celulele se spală abundent pentru îndepărtarea substanței de testare și se cultivă timp de două cicluri de replicare în prezența BrdU. Ca tehnică alternativă, celulele pot fi tratate simultan cu substanța de testare și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
celulare, - condițiile de desfășurare a testului: compoziția mediului, concentrația CO2, concentrația substanței de testare, excipientul folosit, temperatura de incubare, durata tratamentului, inhibitorul fusului de diviziune celulară folosit, concentrația acestuia și timpul de tratament cu acesta, tipul de sistem folosit pentru activarea metabolică la mamifere, martorii pozitivi și negativi, - numărul de culturi la fiecare punct experimental, - detalii despre tehnica folosită pentru prepararea lamelor, - numărul de metafaze analizate (datele vor fi redate separat pentru fiecare cultură în parte), - numărul mediu de SCE per
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de testare Substanțele testate pot fi preparată în mediile de cultură sau dizolvate ori suspensionate într-un excipient adecvat, înainte de tratarea celulelor. Concentrația finală a excipientului în sistem nu trebuie să afecteze viabilitatea celulară, rata de creștere sau incidența transformărilor. Activarea metabolică Celulele trebuie să tratate cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem adecvat de activare metabolică. Dacă tipul celular folosit are activitate metabolică intrinsecă, natura acestei activități trebuie să fie cunoscută și adecvată clasei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
celulelor. Concentrația finală a excipientului în sistem nu trebuie să afecteze viabilitatea celulară, rata de creștere sau incidența transformărilor. Activarea metabolică Celulele trebuie să tratate cu substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem adecvat de activare metabolică. Dacă tipul celular folosit are activitate metabolică intrinsecă, natura acestei activități trebuie să fie cunoscută și adecvată clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi În fiecare experiment trebuie folosiți martori pozitivi, atât un compus
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
natura acestei activități trebuie să fie cunoscută și adecvată clasei de substanțe chimice testate. Condiții experimentale Folosirea martorilor pozitivi și negativi În fiecare experiment trebuie folosiți martori pozitivi, atât un compus cu activitate directă cât și un compus ce necesită activare metabolică. De asemenea, trebuie folosit și un martor negativ (pentru excipient). Printre exemplele de substanțe ce pot fi folosite ca martor pozitiv se numără: - compuși cu activitate directă: - etilmetansulfonatul, - β-propiolactona, - compuși care necesită activare metabolică: - 2-acetilaminofluoren, - 4-dimetilaminoazobenzen, - 7,12-dimetilbenzantracen Dacă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
cât și un compus ce necesită activare metabolică. De asemenea, trebuie folosit și un martor negativ (pentru excipient). Printre exemplele de substanțe ce pot fi folosite ca martor pozitiv se numără: - compuși cu activitate directă: - etilmetansulfonatul, - β-propiolactona, - compuși care necesită activare metabolică: - 2-acetilaminofluoren, - 4-dimetilaminoazobenzen, - 7,12-dimetilbenzantracen Dacă este necesar, poate fi inclus un martor pozitiv suplimentar care să aparțină aceleiași clase de substanțe ca substanța de testare. Concentrații de expunere Se folosesc mai multe concentrații ale substanței de testare. Acestea trebuie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
limita superioară a concentrației se stabilește de la caz la caz. Mod de operare Celulele se tratează o perioadă corespunzătoare, în funcție de sistemul de testare utilizat, acest lucru putând presupune reevaluarea dozei prin schimbarea mediului (și, dacă este cazul, un amestec de activare metabolică proaspăt) dacă expunerea este prelungită. Celulele fără o activitate metabolică intrinsecă suficientă sunt expuse la substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem adecvat de activare metabolică. La sfârșitul perioadei de expunere, celulele trebuie spălate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
schimbarea mediului (și, dacă este cazul, un amestec de activare metabolică proaspăt) dacă expunerea este prelungită. Celulele fără o activitate metabolică intrinsecă suficientă sunt expuse la substanța de testare atât în prezența cât și în absența unui sistem adecvat de activare metabolică. La sfârșitul perioadei de expunere, celulele trebuie spălate, îndepărtând substanța de testare, și cultivate în condiții adecvate pentru apariția modificărilor fenotipice urmărite și pentru stabilirea incidenței de transformare. Toate rezultatele trebuie confirmate în cadrul unui experiment independent. 2. DATE Datele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
informațiile următoare: - tipul de celule folosite, numărul de culturi celulare, metoda de menținere a culturilor, - condițiile experimentale: concentrația substanței de testare, excipientul folosit, timpul de incubare, durata și frecvența tratamentului, densitatea celulară pe parcursul tratamentului, tipul de sistem exogen folosit pentru activarea metabolismului, martorii pozitivi și negativi, caracteristicile fenotipului monitorizat, tipul de sistem selectiv folosit (dacă este cazul), argumentarea alegerii dozelor, - metoda folosită pentru exprimarea numărului de celule viabile și transformate, - evaluarea statistică, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
și de serviciu au același dispozitiv de comandă, sistemul de frânare manuală este astfel proiectat încât să poată fi activat când vehiculul se află în mișcare. Această dispoziție nu se aplică atunci când un dispozitiv auxiliar de comandă permite Cel puțin activarea parțială a sistemului de frânare de serviciu, așa cum se menționează în Anexa II, punctul 2.1.3.6. 2.2.1.2.5. În cazul avarierii altei componente decât frâna(așa cum se arată la punctul 1.6) sau a altor
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/88811_a_89598]
-
metal sau dintr-un material cu caracteristici asemanătoare și nu va fi supus distorsionării în operarea normală a echipamentului de frânare. 2.2.1.3. Acolo unde există dispozitive de control separate pentru sistemele de frânare de serviciu și secundară, activarea simultană a celor două controale nu trebuie să facă inoperabile ambele sisteme de frânare de serviciu și secundară, nici atunci când ambele sisteme de frânare sunt în bună funcționare, nici atunci când unul dintre ele nu funcționează.. 2.2.1.4. În
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/88811_a_89598]
-
dintre ele nu funcționează.. 2.2.1.4. În cazul avarierii unei piese a transmisiei sistemului de frânare de serviciu, trebuie să fie îndeplinite următoarele condiții: 2.2.1.4.1. Un număr suficient de roți oprește, totuși, vehiculul prin activarea dispozitivului de control al sistemului de frânare de serviciu, indiferent de încărcătura vehiculului. 2.2.1.4.2. Aceste roți sunt astfel selectate, încât performanța reziduală a sistemului de frânare de serviciu să satisfacă cerințele menționate la punctul 2.1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/88811_a_89598]
-
vehiculul este în staționare, sau de către mijloace automate. 2.2.1.5.2. Mai mult decât atât, dispozitivele de stocare situate pe circuitul de jos al acest dispozitiv,sunt astfel alcătuite, încât, în cazul unei căderi de tensiune, după patru activări complete ale sistemului de frânare de serviciu, conform condițiilor prevăzute la punctul 1.2. al Anexei IV, secțiunile A si B, este încă posibilă oprirea vehiculului la a cincea acționarere cu un grad de eficiență prevăzut pentru frânarea secundară. 2
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/88811_a_89598]
-
de frânare. Șoferul va putea verifica dacă becul funcționeaz sau nu. 2.2.1.12.2. Căderea unei părți a sistemului de transmisie hidraulică va fi semnalată șoferului printr-un dispozitiv care conține o lampă roșie, care se aprinde la activarea dispozitivului de control și care ramâne aprinsă, atâta timp cât durează căderea și cât timp butonul de aprindere(start) se află în poziția "on"(de pornire). Totuși va fi admis și un dispozitiv care conține o lampă roșie de atenționare, care se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/88811_a_89598]