942 matches
-
în fiecare dintre coloanele de la 3 la 12. apoi 1.1.5. Se adaugă 50 µl antiser de cobai, diluat în prealabil într-un tampon de blocare, în toate godeurile, cu excepția godeurilor de CONTROL CU BLANC din placa ELISA (toate godeurile conțin în prezent un volum final de 100 µl). 1.1.5.1. Se incubează timp de 1 oră la 37ș într-un agitator rotativ. 1.1.5.2. Se spală plăcile de trei ori și se usucă în modul
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
1.5.1. Se incubează timp de 1 oră la 37ș într-un agitator rotativ. 1.1.5.2. Se spală plăcile de trei ori și se usucă în modul menționat anterior. 1.1.5.3. Se adaugă în fiecare godeu 50 µl ser de iepure anticobai conjugat cu peroxidază de hrean, diluat în prealabil într-un tampon de blocare. 1.1.5.4. Se incubează timp de 1 oră la 37șC într-un agitator rotativ. 1.1.5.5. Se
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
sterilă) chiar înainte de utilizare. Se adaugă un substrat (peroxid de hidrogen = H2O2), pentru obținerea unei concentrații finale de 0,05% (v/v) (1/2000 dintr-o soluție la 30% de H2O2). Se adaugă 50 µl din soluția OFD în fiecare godeu și se lasă plăcile pe suport timp de 10 minute la temperatura mediului ambiant. Se oprește reacția prin adăugarea a 50 µl de acid sulfuric 1M (H2SO4) în fiecare godeu. 1.1.7. Citire Citire prin spectrofotometrie la 492 nm
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
H2O2). Se adaugă 50 µl din soluția OFD în fiecare godeu și se lasă plăcile pe suport timp de 10 minute la temperatura mediului ambiant. Se oprește reacția prin adăugarea a 50 µl de acid sulfuric 1M (H2SO4) în fiecare godeu. 1.1.7. Citire Citire prin spectrofotometrie la 492 nm. 1.2. Exprimarea rezultatelor 1.2.1. Cu ajutorul unui program de calculator, se stabilesc valorile de densitate optică (DO) și procentajul de inhibiție (PI) în serurile de testare și serurile
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
1.2. Exprimarea rezultatelor 1.2.1. Cu ajutorul unui program de calculator, se stabilesc valorile de densitate optică (DO) și procentajul de inhibiție (PI) în serurile de testare și serurile de control, pe baza valorii medii înregistrate în cele patru godeuri care conțin serurile de cobai de control. Valorile DO și PI se utilizează pentru a stabili dacă testul a fost efectuat în limite acceptabile. Limitele superioare și inferioare ale serurilor de cobai de control se situează respectiv între valorile 1
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
120 și 1/480). Plăcile care nu sunt conforme cu criteriile menționate anterior trebuie respinse. Totuși, dacă titrul serului de control pozitiv este mai mare de 1/480 și eșantioanele testate sunt totuși negative, eșantioanele considerate negative pot fi acceptate. Godeurile cu ser de control negativ dedublate și godeurile de control cu blanc dedublate ar trebui să prezinte valori PI cuprinse între + 25% și -25%, respectiv între +95% și +105%. Nerespectarea acestor limite nu are ca efect invalidarea rezultatelor plăcii, însă
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
conforme cu criteriile menționate anterior trebuie respinse. Totuși, dacă titrul serului de control pozitiv este mai mare de 1/480 și eșantioanele testate sunt totuși negative, eșantioanele considerate negative pot fi acceptate. Godeurile cu ser de control negativ dedublate și godeurile de control cu blanc dedublate ar trebui să prezinte valori PI cuprinse între + 25% și -25%, respectiv între +95% și +105%. Nerespectarea acestor limite nu are ca efect invalidarea rezultatelor plăcii, însă sugerează că este în curs formarea unei culori
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
testate este de 50% (PI 50%). Eșantioanele care prezintă valori PI mai mari de 50% sunt considerate pozitive. Eșantioanele care prezintă valori PI mai mici de 50% sunt considerate negative. Eșantioanele care prezintă valori PI superioare sau inferioare pragului pentru godeurile dedublate sunt considerate inexacte. Aceste eșantioane pot fi testate din nou printr-un test punctual sau prin titrare. Eșantioanele pozitive pot fi și ele titrate pentru a furniza o indicație cu privire la gradul de pozitivitate. Analiză punctuală 1 2 3 4
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
spălare). Se scutură ușor plăcile pe un material absorbant pentru a îndepărta orice urmă de clătire. 2.1.1.3. Se saturează plăcile cu o SSTF +5% (m/v) de lapte praf degresat (lapte NestléTM), câte 200 µl în fiecare godeu timp de o oră la 37°C. 2.1.1.4. Se înlătură soluția de saturare și se scutură ușor plăcile pe un material absorbant. 2.1.2. Eșantioane 2.1.2.1. Serurile de testat și serurile pozitive și
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
2.1. Serurile de testat și serurile pozitive și negative de control se diluează la 1/25 într-o SSTF +5% (m/v) de lapte praf degresat + 0,05% (v/v) Tween -20; se aplică apoi 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. Pentru titrare, se realizează serii de diluție din 2 în 2 începând de la 1/25 (100 µl/godeu), prin utilizarea unei coloane a plăcii pentru fiecare ser; se procedează la fel
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
0,05% (v/v) Tween -20; se aplică apoi 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. Pentru titrare, se realizează serii de diluție din 2 în 2 începând de la 1/25 (100 µl/godeu), prin utilizarea unei coloane a plăcii pentru fiecare ser; se procedează la fel pentru controalele pozitiv și negativ. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.2.2. Se clătesc plăcile conform descrierii din etapa 2.1
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
controalele pozitiv și negativ. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.2.2. Se clătesc plăcile conform descrierii din etapa 2.1.1.2. 2.1.3. Conjugat 2.1.3.1. Se depun 100 µl/ godeu de anticorpi antical conjugați cu peroxidază de hrean; anticorpii se diluează într-o SSTF + 5% lapte degresat + 0,05% Tween-20 cu pH 7,2. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.3.2. Se clătesc plăcile
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
pH 7,2. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.3.2. Se clătesc plăcile conform descrierii din etapa 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 µl/godeu de soluție de cromogen/substrat [10 ml de 80,6 mM de DMAB (dimetilaminobenzaldehidă) + 10 ml de 1,56 mM de MBTH (3-metil-2-benzotiazolină de hidroclorură de hidrazon) + 5 µl de H2O2]. Se blochează după aproximativ 5-10 minute (înainte să înceapă
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
1.2. Eșantioane și controale 3.1.2.1. Cernere: se diluează serurile de testat și serurile de control în proporție de 1 la 10 direct pe placă în SSTF pentru obținerea unui volum final de 100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de o oră la 37șC. 3.1.2.2. Titrare: se pregătește o serie de diluții din 2 în 2 de seruri de testat și de control pozitive (100 µl în fiecare godeu) de la 1/10 la
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
100 µl în fiecare godeu. Se incubează timp de o oră la 37șC. 3.1.2.2. Titrare: se pregătește o serie de diluții din 2 în 2 de seruri de testat și de control pozitive (100 µl în fiecare godeu) de la 1/10 la 1/1280 care se depun în opt godeuri. Controlul negativ este testat la o diluție de 1/10. 3.1.3. Conjugat Se adaugă 50 µl de anticorp monoclonal diluat în prealabil (anticorp monoclonal conjugat cu
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
37șC. 3.1.2.2. Titrare: se pregătește o serie de diluții din 2 în 2 de seruri de testat și de control pozitive (100 µl în fiecare godeu) de la 1/10 la 1/1280 care se depun în opt godeuri. Controlul negativ este testat la o diluție de 1/10. 3.1.3. Conjugat Se adaugă 50 µl de anticorp monoclonal diluat în prealabil (anticorp monoclonal conjugat cu peroxidază de hrean) în fiecare godeu și se amestecă ușor pentru a
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
1280 care se depun în opt godeuri. Controlul negativ este testat la o diluție de 1/10. 3.1.3. Conjugat Se adaugă 50 µl de anticorp monoclonal diluat în prealabil (anticorp monoclonal conjugat cu peroxidază de hrean) în fiecare godeu și se amestecă ușor pentru a garanta omogeneitatea. Se incubează timp de 30 de minute la 37șC. 3.1.4. Se spală plăcile de 5 ori cu SSTF și se usucă pe sugativă conform descrierii anterioare. 3.1.5. Cromogen
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
a garanta omogeneitatea. Se incubează timp de 30 de minute la 37șC. 3.1.4. Se spală plăcile de 5 ori cu SSTF și se usucă pe sugativă conform descrierii anterioare. 3.1.5. Cromogen/substrat Se adaugă în fiecare godeu 100 µl din soluția următoare de cromogen/substrat: 1 ml de ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic) cu 5 mg/ml + 9 ml de tampon de substrat (0,1 M de tampon de fosfat-citrat cu pH 4 cu conținut de
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
de tampon de substrat (0,1 M de tampon de fosfat-citrat cu pH 4 cu conținut de 0,03% de H2O2), apoi se incubează timp de 10 minute la temperatura mediului ambiant. Evoluția culorii se oprește prin adăugarea în fiecare godeu a 100 µl de DSS (dodecilsulfat de sodiu) la 2% (m/v). 3.1.6. Citire Se citește la 450 nm într-un cititor ELISA: 3.2. Interpretarea rezultatelor 3.2.1. Valabilitatea testului Testul este valabil atunci când densitatea optică
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
faptele pe care le descriu, de aceea ochiul le urmărește cadența nesincopată, într-o alunecare care nu lasă urme. După cîteva pagini, ți-e greu să reproduci ce ai citit. E cazul paradoxal al unei eseistici impecabile care nu lasă godeu în mintea cititorului. Unduirea frazelor are drept efect o involuntară stare de amnezie, căci atenția îți scade din cauza eleganței monotone a vorbelor. O rotunjime ritmată al cărei efect stilistic se pierde prin disiparea sensului: aceeași semnificație împărțită în prea multe
Filosofia nostimă by Sorin Lavric () [Corola-journal/Journalistic/5465_a_6790]
-
48-72 de la reexpunerea la antigen; * hipersensibilitatea întârziată granulomatoasă se manifestă în 21-28 de zile. Granuloamele se formează prin agregarea și proliferarea macrofagelor și pot să persiste un interval de mai multe săptămâni. Tehnica patch test Alergenul este plasat într-un godeu de aluminiu fixat pe un petic adeziv cu diametrul de 8 mm care se aplică pe tegument sănătos, paravertebral, în regiunea mediodorsală; confirmarea clinică o face asemănarea leziunii cutanate cu cea din dermatita atopică. Citirea se face la 48 și
ASPECTE DE ALERGOLOGIE ŞI IMUNOLOGIE ÎN PRACTICA MEDICALĂ by LILIANA VEREŞ ,CORNELIA URSU () [Corola-publishinghouse/Science/301_a_586]
-
intern al pleoapei superioare -Edemul (fig.42)-acumularea de lichid în țesutul celular subcutanat; cardiac, inițial alb, apoi cianotic, simetric, decliv inițial, dar cu evoluție ascendentă ajungându-se în final la edem generalizat, anasarcă; renal, alb-palid care lasă cu ușurință godeu (fig.43); pielea edemațiată pierde din elasticitate și prin apăsarea ei pe un plan dur, osos apare depresiunea locală numita godeu; inițial apare la pleoape, față și este mai accentuat dimineața și se estompează în cursul zilei prin mișcare; în
Nursing general : note de curs by Solange Tamara Roşu, Mihaela Carmen Fermeşanu () [Corola-publishinghouse/Science/91817_a_93197]
-
inițial, dar cu evoluție ascendentă ajungându-se în final la edem generalizat, anasarcă; renal, alb-palid care lasă cu ușurință godeu (fig.43); pielea edemațiată pierde din elasticitate și prin apăsarea ei pe un plan dur, osos apare depresiunea locală numita godeu; inițial apare la pleoape, față și este mai accentuat dimineața și se estompează în cursul zilei prin mișcare; în stadiile avansate se poate generaliza; este nedureros; hepatic; cașectic prin hipoalbuminemie, în jumatatea inferioară a corpului; endocrin, în hipotiroidie, la nivelul
Nursing general : note de curs by Solange Tamara Roşu, Mihaela Carmen Fermeşanu () [Corola-publishinghouse/Science/91817_a_93197]
-
mai accentuat dimineața și se estompează în cursul zilei prin mișcare; în stadiile avansate se poate generaliza; este nedureros; hepatic; cașectic prin hipoalbuminemie, în jumatatea inferioară a corpului; endocrin, în hipotiroidie, la nivelul întregului corp, mucos, alb-palid și nu lasă godeu; în hiperfoliculinism, la jumătatea ciclului menstrual cu localizare predominantă la față, pleoape, sâni, gambe; limfatic, elefantiazis, formă particulară, cu piele îngroșată și tulburări trofice; inflamator: roșu, cald, dureros, localizat -Emfizemul subcutanat: acumularea de aer în țesutul celular subcutanat cu apariția
Nursing general : note de curs by Solange Tamara Roşu, Mihaela Carmen Fermeşanu () [Corola-publishinghouse/Science/91817_a_93197]
-
necesare studii care să îmbunătățească metodologia; aceste studii au condus la dezvoltarea metodei imunochimice (ICA), bazată pe utilizarea anticorpilor monoclonali specifici receptorilor estrogenici umani. Spre exemplu, în cazul probelor de adenocarcinom de glandă mamară, după ce sunt dezghețate, sunt trecute în godeurile plăcuțelor speciale, apoi sunt fixate în etanol și incubate cu unul sau mai mulți anticorpi monoclonali de șoarece anti-ER sau anti-PR uman. Complecșii formați între anticorpi și receptori sunt vizualizați prin metoda imunoperoxidazică indirectă. În determinările de recunoaștere prin metode
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]