10,847 matches
-
OH 2 , ea poate realiza un profit energetic mai mare pe unitatea de substrat consumată. Ca o consecință, ori de câte ori oxidarea este posibilă, celula utilizează glucoza într-o proporție mai mică în condiții anaerobe. Această descreștere a rației de utilizare a glucozei (efectul Pasteur) este probabil problema cea mai importantă și mai complexă a reglării metabolismului energetic în celula de drojdie. Efectul Pasteur, al cărui mecanism a determinat formularea mai multor ipoteze, este explicat acum ca o consecință a mecanismelor fundamentale de
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
și mai complexă a reglării metabolismului energetic în celula de drojdie. Efectul Pasteur, al cărui mecanism a determinat formularea mai multor ipoteze, este explicat acum ca o consecință a mecanismelor fundamentale de reglare, care implică diferite enzime cheie ale metabolismului glucozei. Aceste mecanisme fac posibilă o ajustare precisă și imediată a rației de utilizare a glucozei pentru necesitățile metabolice ale celulei, privind energia și cheletele carbonice. Descoperirea așa-numitului efect Crabtree la numeroase levuri facultativ anaerobe este considerată ca cel mai
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
mecanism a determinat formularea mai multor ipoteze, este explicat acum ca o consecință a mecanismelor fundamentale de reglare, care implică diferite enzime cheie ale metabolismului glucozei. Aceste mecanisme fac posibilă o ajustare precisă și imediată a rației de utilizare a glucozei pentru necesitățile metabolice ale celulei, privind energia și cheletele carbonice. Descoperirea așa-numitului efect Crabtree la numeroase levuri facultativ anaerobe este considerată ca cel mai interesant eveniment, mai recent, în domeniul fiziologiei drojdiilor. Acest efect constă dintr-o represie a
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
efect Crabtree la numeroase levuri facultativ anaerobe este considerată ca cel mai interesant eveniment, mai recent, în domeniul fiziologiei drojdiilor. Acest efect constă dintr-o represie a respirației în cursul fermentației anaerobe desfășurată cu viteză mare, ca urmare a prezenței glucozei în concentrații relativ mari (3-6%). Glucoza în concentrații mari, în prezența oxigenului, nu este complet oxidată ci parțial fermentată. Această fermentație prezintă unele asemănări cu inhibarea în tumori a respirației (endogene) produsă de adăugarea glucozei, care a fost prima dată
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
anaerobe este considerată ca cel mai interesant eveniment, mai recent, în domeniul fiziologiei drojdiilor. Acest efect constă dintr-o represie a respirației în cursul fermentației anaerobe desfășurată cu viteză mare, ca urmare a prezenței glucozei în concentrații relativ mari (3-6%). Glucoza în concentrații mari, în prezența oxigenului, nu este complet oxidată ci parțial fermentată. Această fermentație prezintă unele asemănări cu inhibarea în tumori a respirației (endogene) produsă de adăugarea glucozei, care a fost prima dată observată în anul 1929 de către Crabtree
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
mare, ca urmare a prezenței glucozei în concentrații relativ mari (3-6%). Glucoza în concentrații mari, în prezența oxigenului, nu este complet oxidată ci parțial fermentată. Această fermentație prezintă unele asemănări cu inhibarea în tumori a respirației (endogene) produsă de adăugarea glucozei, care a fost prima dată observată în anul 1929 de către Crabtree și denumită de atunci efect Crabtree sau efect Pasteur invers. Cercetarea ulterioară a fenomenului fermentației aerobe a glucozei (adică formarea în ciuda prezenței oxigenului) și a diminuării respirației indusă de
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
asemănări cu inhibarea în tumori a respirației (endogene) produsă de adăugarea glucozei, care a fost prima dată observată în anul 1929 de către Crabtree și denumită de atunci efect Crabtree sau efect Pasteur invers. Cercetarea ulterioară a fenomenului fermentației aerobe a glucozei (adică formarea în ciuda prezenței oxigenului) și a diminuării respirației indusă de glucoză, a dus la identificarea unui efect al glucozei sau efect prin catabolit asupra nivelelor funcționale ale unei varietăți de enzime mitocondriale și componente ale lanțului respirator. Mecanismul represiei
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
care a fost prima dată observată în anul 1929 de către Crabtree și denumită de atunci efect Crabtree sau efect Pasteur invers. Cercetarea ulterioară a fenomenului fermentației aerobe a glucozei (adică formarea în ciuda prezenței oxigenului) și a diminuării respirației indusă de glucoză, a dus la identificarea unui efect al glucozei sau efect prin catabolit asupra nivelelor funcționale ale unei varietăți de enzime mitocondriale și componente ale lanțului respirator. Mecanismul represiei prin catabolit, studiat azi în mai multe laboratoare, nu este clarificat. Ceea ce
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
1929 de către Crabtree și denumită de atunci efect Crabtree sau efect Pasteur invers. Cercetarea ulterioară a fenomenului fermentației aerobe a glucozei (adică formarea în ciuda prezenței oxigenului) și a diminuării respirației indusă de glucoză, a dus la identificarea unui efect al glucozei sau efect prin catabolit asupra nivelelor funcționale ale unei varietăți de enzime mitocondriale și componente ale lanțului respirator. Mecanismul represiei prin catabolit, studiat azi în mai multe laboratoare, nu este clarificat. Ceea ce este bine stabilit este că absența zaharurilor rapid
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
pe suprafața mediului, a unui inel la limita de separare dintre suprafața mediului și peretele vasului de cultură și formarea sedimentului. Pentru aspectul dezvoltării în mediul lichid, levurile s-au însămânțat în flacoane Erlanmeyer de 50 ml cu mediul lichid glucoză - peptonă - extract levuri și în malț extract. Culturile s au examinat la 3 zile după incubare la 28 Co și apoi după o lună de menținere la temperatura camerei. Dezvoltarea pe medii solide se referă la tipul coloniilor, consistența lor
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
carbon. În taxonomia drojdiilor aceste teste sunt în mod curent de asimilație, când se testează capacitatea de utilizare a surselor de carbon în semi - anaerobioză. Astfel, pentru testele de asimilație s-au utilizat următoarele surse de carbon: Monozaharide - hexoze (D-glucoză, D-galactoză); Dizaharide (sucroză, maltoză, lactoză); Trizaharide (rafinoză); Alcooli (etanol). S-a folosit mediul lichid BYNB care a fost repatizat în eprubete (180/16 mm), câte 4,5 ml, la care s-au adăugat separat sursele de carbon; s au
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
în eprubete (180/16 mm), câte 4,5 ml, la care s-au adăugat separat sursele de carbon; s au pregătit pentru fiecare sursă de carbon două eprubete. Pentru inoculare s-au pregătit culturi proaspete (48 ore) pe mediu agarizat glucoză - peptonă - extract de drojdii. Apoi s-au efectuat suspensii în apă distilată sterilă, încât acestea să conțină aproximativ 61025 × celule/ml. Fiecare eprubetă a fost însămânțată cu o picătură din suspensiile standardizate, termostatarea făcându-se la 28 Co . Creșterea s-
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
carbon este un caracter biologic stabil și reprezintă unul dintre principalele teste de determinare a speciilor. În testarea acestei proprietăți se folosesc tuburile Durham, conform recomandărilor lui Domercq, Castelli și Lodder, Kreger van Rij. Zaharurile supuse fermentării vor fi monozaharidele (glucoza, galactoza), dizaharidele (zaharoza, lactoza, maltoza) și un trizaharid (rafinoza). Fructoza nu se introduce în testare deoarece ne bazăm pe teoria lui Kluyver (1914) confirmată și de Lodder și Kreger van Rij (1952), conform căreia o specie de drojdie care produce
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
dizaharidele (zaharoza, lactoza, maltoza) și un trizaharid (rafinoza). Fructoza nu se introduce în testare deoarece ne bazăm pe teoria lui Kluyver (1914) confirmată și de Lodder și Kreger van Rij (1952), conform căreia o specie de drojdie care produce fermentația glucozei produce și fermentația fructozei și manozei. Fermentarea rafinozei este un test foarte important. Există drojdii care pot fermenta în întregime rafinoza, altele deloc, altele o scindează iar din componentele rezultate fermentează o parte, după zestrea de enzime pe care le
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
mediului (datorită producerii amoniacului). Reacția începe din porțiunea înclinată a mediului și continuă rapid în zona verticală. Rezultatele se apreciază zilnic timp de 5 zile. 4.2.4.4. Producerea de acid Unele drojdii produc prin metabolizarea sursei de carbon (glucoza) urme de acizi volatili și nevolatili. Formarea de acid se folosește în taxonomie numai pentru cazurile când se produc cantități mari de acid acetic, testul fiind realizat în condiții standard. Se utilizează un mediu agarizat ce conține 5% glucoză și
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
carbon (glucoza) urme de acizi volatili și nevolatili. Formarea de acid se folosește în taxonomie numai pentru cazurile când se produc cantități mari de acid acetic, testul fiind realizat în condiții standard. Se utilizează un mediu agarizat ce conține 5% glucoză și 0,5 % carbonat de calciu. Producerea de acid este testată în condiții de aerobioză și se apreciază prin dizolvarea carbonatului pentru anumite genuri și specii puternic fermentative. 4.2.4.5. Producerea de compuși amiloizi extracelulari Acest test se
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
ridicată trebuie să ia în considerație comportarea diferită a speciilor osmodure sau osmotolerante, care sunt capabile să tolereze concentrații superioare de zahăr. Unele specii osmofile manifestă deasemenea toleranță apreciabilă în alcool. Numeroase specii de levuri cresc bine la concentrații de glucoză de până la 40 %, speciile osmofile fiind capabile să se dezvolte la concentrații de 40 70 %, existând totuși puține levuri care pot crește la concentrații de 65 - 70 %. Capacitatea de creștere la concentrații mari de zahăr a fost testată pe un
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
să se dezvolte la concentrații de 40 70 %, existând totuși puține levuri care pot crește la concentrații de 65 - 70 %. Capacitatea de creștere la concentrații mari de zahăr a fost testată pe un mediu de agar și 50% și 60% glucoză. Probele s-au incubat la 28 Co timp de 4 săptămâni. Se apreciază dezvoltarea culturii comparativ cu un martor cultivat pe mediul obișnuit de întreținere (YPG agarizat). 4.2.4.8. Rezistența la cicloheximidă Testul creșterii în prezența antibioticului cicloheximidă
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
tulpinilor de levuri. Cicloheximida stopează dezvoltarea celulelor eucariote prin inhibarea sintezei proteice la nivelul ribozomilor 80 S. Levurile rezistente la cicloheximidă pot avea ribozomi modificați. Testul se realizează în mediul lichid BYNB concentrat de 10 ori, conținând aceeași cantitate de glucoză ca și pentru testarea utilizării aerobe a D-glucozei dar cu adaos de actidionă 0,01 % sterilizată prin filtrare. Sensibilitatea sau rezistența la actidionă s-a apreciat după gradul de dezvoltare al culturilor față de proba martor (fără actidionă). 5 5
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
inhibarea sintezei proteice la nivelul ribozomilor 80 S. Levurile rezistente la cicloheximidă pot avea ribozomi modificați. Testul se realizează în mediul lichid BYNB concentrat de 10 ori, conținând aceeași cantitate de glucoză ca și pentru testarea utilizării aerobe a D-glucozei dar cu adaos de actidionă 0,01 % sterilizată prin filtrare. Sensibilitatea sau rezistența la actidionă s-a apreciat după gradul de dezvoltare al culturilor față de proba martor (fără actidionă). 5 5. REZULTATE ȘI DISCUȚII Aspectul morfologic al celulelor a fost
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
s-a apreciat după gradul de dezvoltare al culturilor față de proba martor (fără actidionă). 5 5. REZULTATE ȘI DISCUȚII Aspectul morfologic al celulelor a fost studiat pe culturi proaspete (24 - 48 ore) dezvoltate pe mediu cu extract de levuri - peptonă - glucoză (YPG) și malț extract (ME), sporularea s-a evidențiat pe mediul Gorodkowa iar caracterele de cultură s-au pus în evidență prin cultivarea în medii lichide (formarea de peliculă, inel și sediment) și medii solide (tipul coloniilor, consistența, culoarea). Rezultatele
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
osmotică ridicată, producerii de acizi și compuși amiloizi extracelulari, hidrolizei ureei, rezistenței la cicloheximidă. Ca surse de carbon s-au folosit monozaharide, dizaharide și trizaharide. Sușele cercetate au manifestat preferințe diferite față de sursele de carbon cercetate. Sușa 981-S fermentează glucoza, zaharoza și maltoza și nu fermentează lactoza și rafinoza. Sușele 2S și 5S nu fermentează hidrații de carbon cercetați iar sușele 3S și 4S fermentează glucoza, galactoza, zaharoza, maltoza și rafinoza și nu fermentează lactoza. În ceea ce privește asimilarea acelorași zaharuri toate
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
cercetate au manifestat preferințe diferite față de sursele de carbon cercetate. Sușa 981-S fermentează glucoza, zaharoza și maltoza și nu fermentează lactoza și rafinoza. Sușele 2S și 5S nu fermentează hidrații de carbon cercetați iar sușele 3S și 4S fermentează glucoza, galactoza, zaharoza, maltoza și rafinoza și nu fermentează lactoza. În ceea ce privește asimilarea acelorași zaharuri toate cele cinci sușe asimilează glucoza și galactoza, nu asimilează lactoza; zaharoza și maltoza sunt asimilate de sușele 1S , 3S și 4S și nu sunt asimilate de
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
nu fermentează lactoza și rafinoza. Sușele 2S și 5S nu fermentează hidrații de carbon cercetați iar sușele 3S și 4S fermentează glucoza, galactoza, zaharoza, maltoza și rafinoza și nu fermentează lactoza. În ceea ce privește asimilarea acelorași zaharuri toate cele cinci sușe asimilează glucoza și galactoza, nu asimilează lactoza; zaharoza și maltoza sunt asimilate de sușele 1S , 3S și 4S și nu sunt asimilate de sușele 2S și 5S . Rafinoza este asimilată de sușele 3S și 4S și nu este asimilată de sușele 1S
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]
-
negativ pentru sușele 1S , 3S și 4S și pozitiv pentru sușele 2S și 5S . Sușele noastre nu au nevoie strictă de vitamine. Cresc bine (sușele 2S și 5S ) sau moderat (sușele 1S , 3S și 4S ) pe medii ce conțin 50% glucoză și deloc pe medii cu 60% glucoză. În ceea ce privește sensibilitatea la antibiotice, trei sușe sunt rezistente la actidionă ( 1S , 3S și 4S ) și două sunt sensibile ( 2S și 5S ). În urma studiilor morfologice, fiziologice și biochimice efectuate la 5 sușe de levuri
IZOLAREA ŞI IDENTIFICAREA UNOR SPECII DE LEVURI FOLOSITE ÎN BIOTEHNOLOGIA VINULUI by MIHAELA CIOCAN () [Corola-publishinghouse/Science/1308_a_1889]