733 matches
-
pH - denumită pH optim - pentru care activitatea sa enzimatică este maximă. Activitatea enzimelor scade de o parte și de alta a valorii pH-ului optim. Variațiile moderate de pH influențează activitatea enzimatică, respectiv viteza de reacție, prin modificarea stării de ionizare a moleculelor de enzimă, modificare care se repercutează asupra afinității enzimelor atât pentru substratul de reacție (complexul enzimă-substrat), cât și pentru anumiți efectori enzimatici. Modificări mai mult sau mai puțin accentuate în raport cu valoarea pH-ului optim determină, de regulă, o
Biochimie by Lucia Carmen Trincă () [Corola-publishinghouse/Science/532_a_1322]
-
de clopoțel. Etalonarea aparatului se realizează cu soluție etalon de KCl de normalități cunoscute pentru care conductibilitatea specifică se ia din tabele. APLICAȚIILE CONDUCTOMETRIEI În practică, conductometria se utilizează pentru următoarele determinări: • determinarea solubilității electroliților greu solubili; • determinarea constantei de ionizare a electroliților slabi; • urmărirea reacțiilor chimice și determinarea vitezei de reacție; • determinarea tipului de emulsie; • studiul structurii și proprietăților combinațiilor complexe; • determinarea și controlul calității apei distilate; • controlul unor procese industriale; • titrarea conductometrică; Titrări conductometrice Într-un anumit domeniu de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
ioni pozitivi, fragmente purtătoare de sarcină caracterizate prin raportul dintre masă și sarcină (m/z sau m/e). O condiție necesară fragmentării moleculelor este ca substanța analizată să fie adusă în stare gazoasă, ea fiind injectată într-o cameră de ionizare în care se produce fragmentarea moleculelor, iar apoi fragmentele rezultate sunt accelerate de un câmp electric și sunt supuse unui proces de separare, în funcție de valoarea raportului m/z și concentrate pe un colector, înregistrându-se abundența lor relativă. Toate operațiunile
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
din el trebuie separați cu ajutorul unui câmp magnetic, care deviază particulele în funcție de raportul m/z, în care m=masa exprimată în unități atomice, iar z este sarcina electrică (se notează și cu m/e). Ionii care provin din camera de ionizare sunt trecuți în analizorul de masă unde sunt separați în funcție de raportul dintre masă și sarcina lor. Se obțin spectre de masă ce sunt reprezentarea abundeței fiecărui tip de ion format, în funcție de m/z. Abundența ionilor poate să fie reprezentată în
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
corespunde ionului molecular cu cea mai mare abundeță, numit și ion de bază. Pentru identificarea compușilor moleculari analizați prin spectroscopia de masă se poate proceda în două moduri: - structura moleculară a compusului inițial poate fi reconstituită din fragmentele rezultate prin ionizare; lucrul acesta este dificil din cauza fragmentărilor succesive a ionilor, care sunt procese complexe și anume, cu atât mai complexe cu cât masa compusului este mai mare; - prin compararea spectrului obținut experimental cu spectrul compusului analizat existent într-o bibliotecă de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
a ionilor, care sunt procese complexe și anume, cu atât mai complexe cu cât masa compusului este mai mare; - prin compararea spectrului obținut experimental cu spectrul compusului analizat existent într-o bibliotecă de spectre. Spectroscopia de masă se bazează pe ionizarea și fragmentarea moleculelor, prin acumularea de energie până la un nivel la care se produce ruperea unor legături intermoleculare, concomitent cu formarea unor fragmente, caracterizate prin raportul dintre masa și sarcina lor, m/z. De fapt, se formează un amestec de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
z. De fapt, se formează un amestec de ioni pozitivi (care au cea mai mare abundență), ioni negativi (mai rar și cu abundeță mai mică) și radicali neutri din punct de vedere electric (pot exista și radicali ionici). Procesul de ionizare se produce în camera de ionizare, putându-se utiliza mai multe procedee de fragmentare a moleculelor gazoase: prin impact electronic sau chimic, prin bombardare cu atomi rapizi, prin impact cu impulsuri laser de scurtă durată etc. Ionii produși de ionul
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
amestec de ioni pozitivi (care au cea mai mare abundență), ioni negativi (mai rar și cu abundeță mai mică) și radicali neutri din punct de vedere electric (pot exista și radicali ionici). Procesul de ionizare se produce în camera de ionizare, putându-se utiliza mai multe procedee de fragmentare a moleculelor gazoase: prin impact electronic sau chimic, prin bombardare cu atomi rapizi, prin impact cu impulsuri laser de scurtă durată etc. Ionii produși de ionul molecular pot ei înșiși să se
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
sarcinii nu este așa de clară. Fuziunea β este posibilă când se poate stabiliza ionul rezultat. Compușii aromatici (toluenul) se rup cu producerea ionului de benziliu care se rearanjează mai stabil sub forma ionului tropiliu. Moleculele intră în camera de ionizare prin injectarea probei sau prin partea terminală a capilarei cromatografice, unde există un vid înaintat de cca.10-6 torri. Moleculele de analit se ciocnesc cu un flux îngust de electroni, perpendicular pe direcția de zbor a moleculelor analizate și care
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
sunt caracteristice fiecărei substanțe în condiții experimentale standard, reproductibile. Pentru exemplificare, se prezintă modul de fragmentare al metanolului. Este un procedeu mai blând, necesitând energii mai mici. În acest caz, moleculele gazoase de substanță analizată se introduc în camera de ionizare împreună cu un gaz reactiv (metan, izopropan, amoniac). Gazul reactiv se introduce în cantitate mai mare în raport cu substanța de analizat, fapt dovedit prin presiunile relative egale cu cca. 10-6 torri pentru gazul reactiv. Acest amestec este bombardat cu un flux de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
acestui gaz, dând o plasmă, care conține numeroși ioni reactivi. Ionii formați sunt acizi Brönsted și atacă moleculele de analizat pe care le ionizează, fomându-se ioni pseudomoleculari, trecându-se mai intâi prin faza de aduct. Experimental s-a constatat că ionizarea prin impact electronic, mai energică, conduce la spectre mai bogate în benzi sau picuri și implicit mai greu de interpretat, spre deosebire de ionizarea chimică, mai blândă, care furnizează spectre mai simple și mai ușor de interpretat. Adesea cele două spectre sunt
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
le ionizează, fomându-se ioni pseudomoleculari, trecându-se mai intâi prin faza de aduct. Experimental s-a constatat că ionizarea prin impact electronic, mai energică, conduce la spectre mai bogate în benzi sau picuri și implicit mai greu de interpretat, spre deosebire de ionizarea chimică, mai blândă, care furnizează spectre mai simple și mai ușor de interpretat. Adesea cele două spectre sunt complementare și, prin analizarea și compararea lor, se pot obține informații mai complete și mai sigure în beneficiul analizei. BOMBARDAREA CU ATOMI
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
mai ușor de interpretat. Adesea cele două spectre sunt complementare și, prin analizarea și compararea lor, se pot obține informații mai complete și mai sigure în beneficiul analizei. BOMBARDAREA CU ATOMI RAPIZI Bombardarea cu atomi rapizi este un procedeu de ionizare în care molecula de compus organic este supusă unui impact cu atomi neutri sau grei, cum sunt atomii de argon sau de xenon, de mare viteză. Moleculele gazoase, de exemplu de argon, sunt ionizate prin impact electronic, iar ionii de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
care ciocnesc alți atomi neutri de argon, pe care-i trimit către proba de analizat, care este o dispersie a acestuia în glicerină, alcool 3-nitrobenzilic sau în dietanolamină (matrice), depusă la extremitatea unui suport introdus în sursă. Acest tip de ionizare este mult mai întrebuințat, mai ales pentru compușii care nu pot fi aduși în stare gazoasă. IONIZAREA PRIN DESORBȚIE ASISTATA LASER DINTR-O MATRICE În acest caz, compusul de analizat este amestecat cu acid dihidroxibenzoic (este vorba de o matrice
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
o dispersie a acestuia în glicerină, alcool 3-nitrobenzilic sau în dietanolamină (matrice), depusă la extremitatea unui suport introdus în sursă. Acest tip de ionizare este mult mai întrebuințat, mai ales pentru compușii care nu pot fi aduși în stare gazoasă. IONIZAREA PRIN DESORBȚIE ASISTATA LASER DINTR-O MATRICE În acest caz, compusul de analizat este amestecat cu acid dihidroxibenzoic (este vorba de o matrice solidă), iar o cantitate mică din proba pregătită în acest fel se depune pe o extremitate a
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
exemplu de 5 nanosecunde pentru laserul UV de N2 cu λ=337 nm. Rezultă o plasmă pe suprafața țintei care are numai câteva zecimi de mm2. Matricea de acid dihidroxibezoic ușurează desorbția moleculelor mari și fotoionizarea lor. Acest tip de ionizare nu provoacă fragmentarea moleculelor analizate, iar ionii se formează la fiecare emisie de lumină a laserului, fenomen care este adaptat foarte bine la analizoarele cu timp de zbor (TOF). Metoda nu se aplică compușilor cu masa moleculară mai mică de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
se formează la fiecare emisie de lumină a laserului, fenomen care este adaptat foarte bine la analizoarele cu timp de zbor (TOF). Metoda nu se aplică compușilor cu masa moleculară mai mică de 500 Da deoarece energia laserului le descompun. IONIZAREA LA PRESIUNE ATMOSFERICĂ Este analogă ionizării chimice (CI). Acest procedeu se aplică la determinarea elementelor sau biomoleculelor cu M > 2000 Da (daltoni), polare și puțin stabile. O astfel de ionizare se realizează cu plasmă de argon sau azot care a
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
lumină a laserului, fenomen care este adaptat foarte bine la analizoarele cu timp de zbor (TOF). Metoda nu se aplică compușilor cu masa moleculară mai mică de 500 Da deoarece energia laserului le descompun. IONIZAREA LA PRESIUNE ATMOSFERICĂ Este analogă ionizării chimice (CI). Acest procedeu se aplică la determinarea elementelor sau biomoleculelor cu M > 2000 Da (daltoni), polare și puțin stabile. O astfel de ionizare se realizează cu plasmă de argon sau azot care a fost descrisă la spectroscopia de emisie
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
mai mică de 500 Da deoarece energia laserului le descompun. IONIZAREA LA PRESIUNE ATMOSFERICĂ Este analogă ionizării chimice (CI). Acest procedeu se aplică la determinarea elementelor sau biomoleculelor cu M > 2000 Da (daltoni), polare și puțin stabile. O astfel de ionizare se realizează cu plasmă de argon sau azot care a fost descrisă la spectroscopia de emisie optică. Pentru dozarea unor elemente, atomii acestora sunt transformați în cationi, obținându-se raze ionice, de aceea plasma de azot, este utilizată ca mediu
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
realizează cu plasmă de argon sau azot care a fost descrisă la spectroscopia de emisie optică. Pentru dozarea unor elemente, atomii acestora sunt transformați în cationi, obținându-se raze ionice, de aceea plasma de azot, este utilizată ca mediu de ionizare. Pentru aceasta, conducerea ionilor către analizorul de masă se face printr-un mic orificiu, practicat într-un con metalic răcit, printr-o aspirație determinată de vidul existent în aparat. Plasma de azot pote fi alimentată cu soluția apoasă a probei
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
unor compuși organici nemetalici prin GC/IPC-MS). Prin acest procedeu dur se distrug toate legăturile chimice din compuși, de aceea sunt analizați atomii elementelor componente. În cazul probelor solide, se utilizează pentru volatilizare un laser, înaintea introducerii analitului în plasmă. IONIZAREA ELECTRONSPRAY Acest procedeu se realizează tot la presiune atmosferică și se aplică la ieșirea componenților din coloana capilară HPLC (fig. II. 8.4). Ionii se formează fie prin adăugarea unui electrolit conținând ioni de amoniu la faza mobilă, fie utilizând
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
din câmpul de accelerație, energiile cinetice ale tuturor ionilor sunt egale, ionii fiind animați de o mișcare rectilinie uniformă, dar vitezele lor diferă în funcție de masa lor (m) și de sarcina lor (z). DETECȚIA Pentru detecția ionilor formați în camera de ionizare, accelerați și îndepărtați din această cameră, se utilizează diferite tipuri de detectoare. Aceste detectoare trebuie să fie foarte sensibile la sarcinile electrice transportate de ioni. Numărul de ioni individuali ai aceleiași specii este de regulă mare, astfel că semnalul este
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
de masă se exprimă în masa de probă necesară și consumată, care este de ordinul a câtorva pg/s sau femtomol/s, caz în care se poate obține un semnal normalizat. Evident că sensibilitatea acestor aparate depinde de modul de ionizare. O altă performanță care se poate atribui spectroscopiei de masă este „rezoluția” R, care depinde de lărgimea picului de masă. Teoretic (deci la mod absolut), un pic de masă nu trebuie să aibă o lărgime, deoarece el reprezintă o masă
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
atât rezoluția este mai mare, iar spectrometrul de masă este mai performant. Rezoluția se pote calcula prin împărțirea raportului m/z al picului la lărgimea picului Δm/z. ANALIZOARE DE MASĂ Analizatorul cu câmp magnetic Ionii formați în camera de ionizare, accelerați și îndepărtați de către un repulser, sunt conduși în analizorul (filtrul de masă) cu câmp magnetic, care este un tub curbat, plasat într-un câmp magnetic perpendicular pe traiectoria ionilor pozitivi. De aceea, traiectoria lor rectilinie deviază, devenind curbată, în funcție de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
separate și captarea lor în locuri diferite (m1/z1, m2/z2, m3/z3 și m4/z4). Câmpul magnetic are o intensitate de I=1 Tesla (10.000 Gauss) Analizatorul electromagnetic Analizatorul electromagnetic primește ionii accelerați și îndepărtați din camera de ionizare în două module sau componente, unul electrostatic și unul magnetic, perpendicular pe traiectoriile ionilor, ceea ce asigură separarea ionilor, cu o mare rezoluție, dar numai pentru mase nu prea ridicate. În figura II.8.6. este prezentat modulul conținând sectorul electrostatic
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]