959 matches
-
de o desrăsucire locală a ADN-ului, pe o porțiune (lungime) de cca 20-30 de perechi de baze. Factorul de transcripție TF II H joacă, în condițiile normale ale transcrierii mesajului conținut într-o genă, un rol important în inițierea transcripției. De reținut că numai în această operație de debut a transcrierii mesajului genic, intră în acțiune cel puțin 20 de proteine diverse, din care reținem și alți factori generali de transcripție, numiți generic GTF (General Transcription Factors), respectiv „rudele“ lui
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
conținut într-o genă, un rol important în inițierea transcripției. De reținut că numai în această operație de debut a transcrierii mesajului genic, intră în acțiune cel puțin 20 de proteine diverse, din care reținem și alți factori generali de transcripție, numiți generic GTF (General Transcription Factors), respectiv „rudele“ lui TF II H (TF II A, TF II B, TF II S ș.a.). La operația de desrăsucire contribuie esențial proteinele - helicaze XPB și XPD. Aceste helicaze fac parte din complexul TF
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
fiecare replicare a ADN sau datorită mutației genei RAS, ajung prin intermediul unor proteine-mesager la frânele celulare p.53 și RB, care inhibă ciclul celular, fără însă să oprească total desfășurarea unor procese metabolice. În cazul leziunilor ADN (stânga), factorul de transcripție TBX2 interacționând cu proteina 14ARF, sechestrează proteina Mdm2. Consecința este că degradarea p.53 nu se mai produce, astfel că această frână celulară fiind mereu activă, oprește multiplicarea celulară. În cazul scurtării telomerelor (mijloc), produsul genei PLM (Promyelocitic leukemia) interacționând
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
asemenea, să diminueze expresia proteinei inhibitoare Id-1, care dă liber proteinei p.16INK4a (adesea și p.27KIP1) să activeze cealaltă frână a ciclului celular, respectiv proteina RB. În fine, produsul proteinic al genei RAS, respectiv p.Ras, activează factorul de transcripție Ets1, care stimulează, la rându-i, aceeași p.16INK4a ce „va apăsa“ pe frâna p.RB, oprind desfășurarea ciclului celular. În final, prin activarea cvasi permanentă a celor două frâne ale multiplicării celulare, se instalează treptat și ireversibil fenomenul de
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
mare număr de proteine celulare cu importanță funcțională interacționează metabolic cu laminele. Acest fapt recomandă respectiva structură lamelară drept un comportament vital esențial al tuturor celulelor de la metazoare. Laminele nucleare sunt astfel implicate în majoritatea activităților nucleului, incluzând replicarea ADN, transcripția pe ARNm, organizarea structurală cromatiniană, reglarea ciclului celular, dezvoltarea celulară și diferențierea, migrația celulară, apoptoza ș.a. După 2005, studii genetice la Drosophila, la viermele nematod Caenorhabditis elegans și pe șoareci, au lămurit o parte din secretele alcătuirii moleculare a laminelor
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
tipuri de mecanisme în opera de inhibare a apoptozei. Un exemplu îl constituie virusul leucemic HtLV, care: a) activează factorul transcripțional survivina; b) scoate din uz frâna celulară p.53; c) activează un mare număr de proteine cu rol în transcripție, precum nFkB, ap1, CReB ș.a. nFkB, proteină localizată în citosolul linfocitelor B, este actorul principal în transmiterea mesajelor inflamatorii. Localizarea sa citoplasmatică nu-i permite să acționeze asupra genelor din nucleu, astfel că, aflat în citosol, NFkB este inactiv . În
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
pe membrana celulei) transmit mesaje care duc la fosforilarea (inactivarea) „paznicului“ ikB, astfel că moleculele nFkB eliberate, se constituie în tetrameri care, reușind de data asta migrația în nucleu, se fixează pe secvențele-țintă ggggaCtttCC din structura ADN și stimulează puternic transcripția genelor care posedă aceste secvențe nucleotidice. În altă ordine de idei, referindu-ne de data aceasta la rolul nFkB în func ționalitatea normală a limfocitelor B, este important de reținut că nFkB codifică sinteza lanțurilor ușoare k din componența imunoglobulinelor
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
reținut că nFkB codifică sinteza lanțurilor ușoare k din componența imunoglobulinelor. În patologia tumorală virală, nFkB este implicat și în acțiuni antiapoptotice la alte leucemii decât cele umane: de pildă leucoze la păsări. lap1 este și el un factor de transcripție (antiapoptotic) activat de gena TAX a virusului leucemogen HTLV. CReB (Cyclic AMP Responsive element Binding protein) este o genă care are în structura sa un domeniu de activare a transcripției (numit q2, bogat în glutamine). Evident că activată de diferiți
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
leucoze la păsări. lap1 este și el un factor de transcripție (antiapoptotic) activat de gena TAX a virusului leucemogen HTLV. CReB (Cyclic AMP Responsive element Binding protein) este o genă care are în structura sa un domeniu de activare a transcripției (numit q2, bogat în glutamine). Evident că activată de diferiți inductori (inclusiv proteine virale prooncogene), produșii codificați de CREB vor avea o acțiune antiapoptotică, deci proneoplazică. Fenomenul de apoptoză indusă de experimentatori și curând de clinicieni începe să fie folosit
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
cel al destinului celulei infectate: celula devine neoplazică datorită atacului viral, dar ea nu mai produce „virus nou“. Asemenea celule au fost numite 8 Cel care în 1975 a fost distins cu Premiul Nobel alături de D. Baltimore pentru descoperirea revers transcripției. Surprizele au continuat: suprainfectarea unor culturi celulare NP cu o anumită sușe de RSV (sușa Bryan) care conținea, accidental, un „virus asociat“ (RAV = Rous Associated Virus) (mai exact, un virus leucozic aviar), a dus la un final neașteptat: cultura de
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
ca în fig. 5-3. Forma replicativă provirală, comportă la fiecare extremitate o secvență LTR (U3-R-U5) absentă la ARN-ul viral infecțios și confecționată printr-un mecanism complex, cu ocazia integrării în genomul celulei gazdă. Această LTR conține semnalele necesare pentru transcripție de către ARN polimeraza II celulară și de maturare a transcriptului. 1. Particula virală completă conținând anvelopa, capsida cu ARn-ul codificator (roșu) și reverstranscriptaza (galben) se adsoarbe pe receptorul de pe suprafața membranei plasmatice. 2. Complexul ARn + reverstranscriptază pătrunde în celula victimă
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
specifice care face să crească durata vieții kinazelor, conduc în final la o activare a oncogenelor. F. Activarea transcripțională a unei oncogene prin demetilarea promoto rului său îmbracă cel puțin două aspecte: a) o hipometilare care are drept consecință activarea transcripției până la stadiul de oncogeneză: se observă supraexpresia unor antigene tumorale - utilizabile ca markeri, precum MAGE din melanom, CAGE în cancerul testicular ș.a. Este de asemenea posibilă superexpresia genei MDR (Multi Drug Resistance) care dă serioase probleme chimioterapiei antineoplazice. S-a
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
aceste gene antioncogene. Termenul nu poate fi însă acceptat deoarece, în ciuda faptului că unele dintre GST se comportă ca antagoniști ai oncogenelor, ele nu joacă doar rolul de frână a multiplicării celulare, ci, în anumite situații, sunt chiar activatori ai transcripției. Este cazul genei T.P.53, care poate influența promotorul altor gene, stimulând astfel operația de transcriere. GST mai pot avea și alte funcții în afara celei de antagoniști ai oncogenelor. De exemplu, genele APC (Anaphase Promoting Complex) care sunt supresoare de
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
revenire la formele ancestrale de viață a celulelor neintegrate în sisteme de organizare complexe. Dacă dobândirea nemuririi celulare prin victoria oncogenelor asupra genelor supresoare de tumori (GST) s-ar fi realizat, evoluția a numeroase specii ar fi încetat. Factorii favorabili transcripției din familia E2F (1, 2 și 3) proteina 110RB îi împiedică pe aceștia să acționeze în favoarea intrării celulei în faza S (de sinteză a noului ADN) dacă structurarea moleculei de ADN este necorespunzătoare. Proteina 110RB este deci un represor transcripțional
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
prin intermediul produsului său, proteina p.53 și alte roluri. Astfel, așa cum s-a arătat mai înainte și folosind limbajul automobilistic, această „frână clasică“ poate deveni „accelerator“: legându-se de secvențele promotorului unor gene, p.53 poate fi un activator al transcripției acestora. În fine, atunci când se fixează pe ADN-ul lezionat ori imperfect împerecheat, p.53 devine un veritabil clopoțel de alarmă, contribuind astfel la debutul operațiunii de reparare a respectivului ADN. Introducerea unui mutant al genei TP53 care elacoză p53
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
provin din intronii unor anumite gene. În opera de transcriere a lor acționează polimeraze II, astfel că precursorul lor ia naștere în cursul fenomenului splicing (când se produce excizia intronilor și comasarea exonilor, în timpul așa zisei operații de maturare a transcripției); b) ceilalți 75 % sunt codificați de niște gene speciale, care, evident, nu codifică proteine. Aceste gene speciale pentru miARN sunt foarte puține: doar 1 % din ansamblul genelor ce codifică proteine. Aceste gene sunt înalt conservate, adică sunt foarte vechi și
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
prezen tatoare de antigen. Aici ele vor fi recunoscute de către receptorii limfocitari (de exemplu de nKg2D al limfocitelor natural Killer). O serie de evenimente genetice care se produc în celulele cancerizate precum deleția genelor, diferite rearanjamente, mutații punctiforme, defecte în transcripția mesajului referitor la sinteza MHC, a TAP sau a b-2-microglobulinei, duc în final la scăderea sau chiar anularea procesului de prezentare al antigenului. Celulele infectate de anumite virusuri cu potență oncogenă sau transformate oncogen din alte cauze și care reușesc
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
a cărei funcție este afectată de respectiva proteină HB X este cea codificată de gena supresoare tumorală P53. Cum se știe, gena P53 și produsul său proteinic (p53) joacă un rol esențial în multiplicarea celulară. Reamintim aceste funcții: a) stimulează transcripția ADN în celula normală; b) intervenție salutară în mecanismele de reparare a ADN-ului alterat prin evenimente de tip mutațional; c) promovarea apoptozei; d) proteina nucleară codificată de gena P53 modulează transcripția unui număr de gene care se leagă de
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
în multiplicarea celulară. Reamintim aceste funcții: a) stimulează transcripția ADN în celula normală; b) intervenție salutară în mecanismele de reparare a ADN-ului alterat prin evenimente de tip mutațional; c) promovarea apoptozei; d) proteina nucleară codificată de gena P53 modulează transcripția unui număr de gene care se leagă de secvențe ADN specifice și de alți factori celulari cum ar fi MDM2, TBP și WT-1. Toate aceste procese fiziologice proprii sunt profund tulburate de legarea proteinei virale HB X de capătul C-
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
fi MDM2, TBP și WT-1. Toate aceste procese fiziologice proprii sunt profund tulburate de legarea proteinei virale HB X de capătul C-terminal al proteinei p53 din celula hepatică agresată. Este dereglat consensul obligatoriu al ADN-ului și funcția de transcripție transactivatoare. Legarea are loc în citoplasmă blocând intrarea proteinei p53 în nucleu. Proteina virală HB X inhibă, de asemenea, legarea XBP (o proteină de reparare a ADN-ului) de proteina p53. Prin intervenția inhibatoare asupra funcției de control a ciclului
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
intern. Detecția ARN-ului amplificat se realizează folosind oligonucleotide țintă specifice marcate care permit identificarea independentă a ampliconului VHC și a ampliconului control intern VHC. Detecția amplificării controlului intern ARN-VHC se realizează în funcție de opțiunea celui care lucrează. Reacția de revers transcripție Reverstranscripția și reacțiile de amplificare sunt realizate prin acțiunea enzimei recombinante termostabile Thermus thermophilus ADN polimeraza (Tth). Tth are dublă activitate: reverstranscriptazică și ADN polimerazică. Aceasta permite realizarea concomitentă a revers transcripției și amplificării PCR în cadrul aceleiași mixturi de reacție
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
în funcție de opțiunea celui care lucrează. Reacția de revers transcripție Reverstranscripția și reacțiile de amplificare sunt realizate prin acțiunea enzimei recombinante termostabile Thermus thermophilus ADN polimeraza (Tth). Tth are dublă activitate: reverstranscriptazică și ADN polimerazică. Aceasta permite realizarea concomitentă a revers transcripției și amplificării PCR în cadrul aceleiași mixturi de reacție. Inițial este sintetizat după matrița ARN-VHC o catenă de ADN complementar. În cadrul reacției de PCR, acest ADN monocatenar inițial este transformat în ADN dublu catenar (reacție de amplificare liniară) după care se
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
central în leucemogeneza din leucemiile/limfoamele cu celule T, respectiv în LTA (din cauza acțiunilor sale pleiotrope). proteinataX interacționează atât cu a) genele virale, activându-le expresia, cât și cu b) unele proteine din celula victimă, care sunt fie factori de transcripție, fie modulatori ai diferitelor funcții celulare. Acestea constau din activarea expresiei genelor implicate în patogeneză. Procesul se realizează prin acțiunea proteinei Tax asupra unor zone bogate în nucleotizi CG, precum sunt componentele virale vCRE, CREB și CPB (fig. 8-13). Această
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
ADN polime raza β. Activarea NFkB duce la activarea tran scripțională a genelor celulare precum inter leukina 2 și gena receptorilor inter leukinei 2. Tax poate lega, de asemenea, IkB promovând activarea NFkB. Legarea Tax de Creb duce la activarea transcripției genelor virale. Tax afectează și ciclul celular inacti vând astfel p16INK4a, un inhibitor cheie al cyclindepen dent kinaselor 4 și 6. Tax interacționează și cu gena MADL-1, cunoscută ca reglator al mitozei. Pertur barea genei MADL-1 poate fi asociată cu
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
oncoproteina E7 a HPV16. Ea pare să indice o interferență importantă a oncoproteinelor virale cu metabolismul glucidic al celulei infectate. La rândul său, proteina e6 se leagă și ea de p53 și, eliminând aptitudinea acesteia de activarea supresiei tumorale și transcripția, E6 și E7 sunt astfel capabile să imortalizeze keratinocite umane. Așa cum s-a observat, și pentru e7,e6 vizează și alte proteine, precum factorul de reglare al interferonului 3 (IRF-3). Ea blochează inducerea de ARNm interferon-β după infecția virală. Toate
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]