80 matches
-
imunohistochimie: greutate moleculară redusă; obținere simplă în formă pură, minimum de contaminare; este stabilă și nu-și modifică proprietățile în timpul obținerii, păstrării și utilizării; în probele tisulare este prezentă în cantități reduse, ușor de blocat Există mai multe tipuri de cromogeni care, în reacție cu peroxidaza, formează produși finali colorați, ce precipită la nivelul situsului antigenic. Menționată anterior, activitatea peroxidazei în prezența unui donor de electroni rezultă în formarea inițială a unui complex enzimă -substrat și apoi în oxidarea donorului. În
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
situsului antigenic. Menționată anterior, activitatea peroxidazei în prezența unui donor de electroni rezultă în formarea inițială a unui complex enzimă -substrat și apoi în oxidarea donorului. În tehnicile imunohistochimice, produșii finali de reacție trebuie să precipite la locul formării lor. Cromogenii care formează produși finali solubili, nu pot fi folosiți în aceste aplicații. Pentru peroxidază, cei mai folosiți cromogeni sunt: tetra clorhidratul de 3,3’-diaminobenzidină (DAB), 3 amino-9-etilcarba-zol (AEC), 4-cloro-1-naftol, diclorhidrat de p-fenilendiamină (pirocate-chol sau reactivul Hanker-Yates). Soluția substrat DAB
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
complex enzimă -substrat și apoi în oxidarea donorului. În tehnicile imunohistochimice, produșii finali de reacție trebuie să precipite la locul formării lor. Cromogenii care formează produși finali solubili, nu pot fi folosiți în aceste aplicații. Pentru peroxidază, cei mai folosiți cromogeni sunt: tetra clorhidratul de 3,3’-diaminobenzidină (DAB), 3 amino-9-etilcarba-zol (AEC), 4-cloro-1-naftol, diclorhidrat de p-fenilendiamină (pirocate-chol sau reactivul Hanker-Yates). Soluția substrat DAB se prepară înaintea utilizării, prin dizolvarea unei tablete DAB în 10 ml tampon PBS, pH-7. 4 și activarea
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpii murini primari. Etapa a treia a constat în tratarea secțiunilor cu streptavidină-peroxidază (kit-ul de vizualizare LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu substratul cromogen al peroxidazei, DAB, activat extemporaneu cu H 2 O 2 , pentru 10-12 minute, la temperatura camerei, etapă urmată de contracolorare cu hematoxilină. Colorarea pentru receptorii estrogenici și cel progesteronic se relevă prin apariția unui precipitat de culoare brună la nivelul
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
la temperatura camerei, timp de 10 minute, utilizând un anticorp secundar biotinilat, cu specificitate pentru anticorpul primar. Etapa a treia a constat în tratarea secțiunilor cu streptavidină-peroxidază (kit-ul de vizualizare LSAB - DAKO). Activitatea enzimatică a fost relevată cu substratul cromogen al peroxidazei, DAB, activat extemporaneu cu H 2 O 2 , pentru 10-12 minute, la temperatura camerei, etapă urmată de contracolorare cu hematoxilină. Colorarea pentru pS2 se relevă prin apariția unui precipitat de culoare brună la nivelul citoplasmei din celulele epiteliale
CANCERUL GLANDEI MAMARE BIOLOGIE MOLECULARĂ ŞI MARKERITUMORALI Volumul 2 by Emil ANTON, Nicolae IOANID () [Corola-publishinghouse/Science/422_a_768]
-
unui sistem conjugat extins, coplanar, cu polarizabilitate ridicată. În timp au evoluat o serie de ipoteze referitoare la corelația între structura coloranților organici, domeniul de absorbție și culoarea observată, fiind introduse pe rând noțiunile de grupări cromofore, grupări auxocrome și cromogeni (Fluoru și al., 1980; Griffiths, 1976). Printre cei mai cunoscuți cromofori se pot enumera: azo (-N=N-), carbonilic (=C=O), azometinic (-CH=N-), tiocarbonilic (>C=S), nitrozo (-NO), nitro (-NO2), etilenic (=C=C=). Cromoforii incluși într-un sistem de duble
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
pot enumera: azo (-N=N-), carbonilic (=C=O), azometinic (-CH=N-), tiocarbonilic (>C=S), nitrozo (-NO), nitro (-NO2), etilenic (=C=C=). Cromoforii incluși într-un sistem de duble legături conjugate ce aparțin diferitelor structuri aromatice (benzenice, naftalenice sau antrachinonice) formează cromogenul substanței organice colorate. Cromoforii, deși sunt purtători de culoare, nu se manifestă ca substanțe colorante pentru suportul pe care se depun. Pentru a conferi proprietăți tinctoriale substanțelor colorate este necesară introducerea grupărilor auxocrome în sistemul conjugat al colorantului. Principalii auxocromi
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
care să intervină numai într-o singură clasă tinctorială, după cum este la fel de rar cazul unei clase tinctoriale alcătuită dintr-un singur tip chimic. Astfel, printre coloranții antrachinonici întâlnim coloranți acizi, de cadă, de dispersie, pigmenți, după cum în clasa coloranților reactivi, cromogenul poate fi azoic, antrachinonic, ftalocianinic. Este deci necesară cunoașterea ambelor clasificări pentru stabilirea unor corelații corecte între structura chimică și comportarea tinctorială a coloranților (Forst, 1980; Grindea și al., 1983). 1.2.1. Clasificarea după structura chimică Acest criteriu de
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
p favorabil reacției ulterioare de substituție nucleofilă, pe când în cel de al doilea caz apare un efect +I defavorabil substituției nucleofile. Introducerea grupării sulfonice în substituentul X' conduce la creșterea solubilității colorantului, dar micșorează substantivitatea acestuia. Molecula de colorant sau cromogenul S-Col poate aparține oricărei clase chimice, posibilitățile de variere fiind în principiu nelimitate, cu condiția de a prezenta afinitatea necesară pentru fibră. Cele mai utilizate sunt însă sistemele cromogene care aparțin coloranților azoici, antrachinonici și ftalocianinici. Astfel, pentru nuanțele
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
în principiu nelimitate, cu condiția de a prezenta afinitatea necesară pentru fibră. Cele mai utilizate sunt însă sistemele cromogene care aparțin coloranților azoici, antrachinonici și ftalocianinici. Astfel, pentru nuanțele cele mai strălucitoare de galben, portocaliu și roșu se folosesc drept cromogeni coloranții monoazoici simpli, ca de exemplu: . Cromogenii formați din coloranți mono și diazoici complexați cu cupru conferă coloranților reactivi culorile violet, rubiniu și albastru (colorantul I), cei antrachinonici nuanțe de albastru strălucitor (colorantul II) iar cei ftalocianinici nuanțe de turquoise
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
prezenta afinitatea necesară pentru fibră. Cele mai utilizate sunt însă sistemele cromogene care aparțin coloranților azoici, antrachinonici și ftalocianinici. Astfel, pentru nuanțele cele mai strălucitoare de galben, portocaliu și roșu se folosesc drept cromogeni coloranții monoazoici simpli, ca de exemplu: . Cromogenii formați din coloranți mono și diazoici complexați cu cupru conferă coloranților reactivi culorile violet, rubiniu și albastru (colorantul I), cei antrachinonici nuanțe de albastru strălucitor (colorantul II) iar cei ftalocianinici nuanțe de turquoise strălucitor (colorantul III). Procesul de formare a
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
conțin ca sisteme reactive monoclortriazina (R1) și sulfatoetilsulfona (R2) - coloranții Cibacron C. Deoarece coloranții bifuncționali se pot lega de fibrele textile prin intermediul ambelor grupe R1 și R2, ei prezintă un grad de fixare ridicat. Datorită prezenței grupărilor sulfonice atât în cromogenul colorantului cât și în gruparea reactivă vinil sulfonică acești coloranți sunt caracterizați printr-o foarte bună solubilitate în apă. Dezavantajul principal al acestora îl constituie prețul de cost mare datorită introducerii celei de a doua grupe reactive în molecula colorantului
Metode neconvenţionale de sorbţie a unor coloranţi by Viorica DULMAN, Simona Maria CUCU-MAN, Rodica MUREŞAN () [Corola-publishinghouse/Science/100974_a_102266]
-
acidului ascorbic în urină dă reacții fals negative pentru hematurie. • Determinarea prezenței nitriților în urină reprezintă un test screening pentru bacteriurie. Această reacție se bazează pe capacitatea bacteriilor gram-negative de a transforma nitrații urinari în nitriți, reacție ce activează un cromogen. Reacții fals-negative se produc în infecțiile cu enterococi și alți germeni care nu produc nitriți în prezența acidului ascorbic. De asemenea, reacții fals-negative se constată în situațiile în care urina nu a fost reținută în vezica urinară suficient timp (minim
[Corola-publishinghouse/Science/2339_a_3664]
-
în vezica urinară suficient timp (minim 4 ore) pentru a permite transformarea unei cantități suficiente de nitrați în nitriți. • Determinarea leucocituriei se bazează pe capacitatea esterazelor secretate de către granulocite de a cliva pirol-aminoacid-esterii, rezultând piroli liberi, care reacționează cu un cromogen conținut în bandeleta reactivă. Testul pozitiv corespunde (funcție de sensibilitatea testului) prezenței a cel puțin 5-15 leucocite/câmp microscopic cu rezoluție înaltă. Reacții fals-negative se constată în prezența glicozuriei, în cazul unei densități urinare mari, excreției excesive de oxalați, precum și la
[Corola-publishinghouse/Science/2339_a_3664]
-
tratament cu cefalexină sau tetraciclină. Reacții fals pozitive se înregistrează în cazul contaminării urinii cu secreție vaginală. • Determinarea glucozei în urină se bazează pe capacitatea glucoz-oxidazei de a cataliza formarea de hidrogen peroxid, care reacționează cu peroxidaza și cu un cromogen conținut în bandeletă. Prezența în urină a acidului ascorbic sau a corpilor cetonici poate determina reacții fals-negative. Totuși, în cazul cetoacidozei diabetice, glucozuria importantă previne reacțiile fals-negative, chiar în prezența unei cetonurii importante. Pragul sangvin de eliminare renală a glucozei
[Corola-publishinghouse/Science/2339_a_3664]
-
gluconat, în prezența enzimei și a oxigenului molecular, cu formare de apă oxigenată. Intensitatea reacției poate fi apreciată fie prin măsurarea directă a oxigenului consumat (analizorul Beckman) sau a peroxidului de hidrogen format (analizorul Yellow-Spring), fie prin metodele utilizând un cromogen. Proba de dozare Determinarea glicemiei în plasmă dă o valoare cu cca. 15% (nu cu 15 mg/dl) mai mare decât în sângele integral. Diferența se datorează faptului că aproximativ 40% din volumul sângelui este ocupat de hematii (egal cu
Tratat de diabet Paulescu by Constantin Ionescu-Tîrgovişte, Cornelia Pencea, Olivia Georgescu () [Corola-publishinghouse/Science/92245_a_92740]
-
ADN-ul biotinilat generat de AgHBs este hibridizat cu oligonucleotide specifice care tapetează stripurile sub forma unor linii paralele. După hibridizarea ADN-ului se adaugă streptavidina marcată cu fosfatază alcalină care se leagă de hibridul biotinilat format anterior. Se adaugă cromogenul BCIP/NBT (5-bromo-4-cloro-3-indolilfosfat / 4-nitro-blue tetrazolium în soluție dimetilformamidă) rezultând un precipitat roșu-maroniu. Stripurile de genotipare INNOLiPA VHB conțin o linie marker roșie, două linii de control și 14 linii paralele la nivelul cărora sunt fixate probele oligonucleotidice. Linia de control
Oncogeneza virală by Petre Calistru, Radu Iftimovici, Ileana Constantinescu, Petre-Adrian Muțiu () [Corola-publishinghouse/Science/91991_a_92486]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg/ml în apă distilata sterilă; peroxid de hidrogen (30% m/v-substrat) 0,05% v/v adăugat imediat înainte de utilizare (5 μl H2O2 la 10 ml OPD
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
stabilă și reactivă. Aceasta posedă patru resturi de lizină care nu sunt implicate în activitatea sa, dar sunt folosite ca legături chimice. În concordanță cu numele, hidrogen peroxidaza este un substrat pentru enzimă. Hidrogen peroxidaza formează oxigen ce acționează asupra cromogenului, tetrametilbenzidină (TMB). Această metodă tradițională folosită de biologi, este acum aplicată în sectoare ca protecția mediului înconjurător și analiza alimentelor (pesticide, aflatoxine, steroizi anabolici). Determinarea unui compus în aceste condiții este posibilă numai dacă anticorpii adaptați și enzimele conjugate sunt
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg/ml în apă distilata sterilă; peroxid de hidrogen (30% m/v-substrat) 0,05% v/v adăugat imediat înainte de utilizare (5 μl H2O2 la 10 ml OPD
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]