80 matches
-
1.5.4. Se incubează timp de o oră la 37 °C pe un agitator orbital. 1.1.5.5. Plăcile se spală de trei ori și se usucă ca mai sus. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția de cromogen OFD (orto-fenildiamină) conform instrucțiunilor producătorului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă), exact înainte de utilizare. Se adaugă substratul [peroxid de hidrogen H(2)O(2)] pentru a rezultă o concentrație finală de 0,05% (v/v) (1/2.000
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]
-
în SFT + 5 % lapte + 0,05 % Tween 20, la un pH de 7,2. Se incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]
-
incubează o oră la 37°C. 2.1.3.2. Se spală plăcile așa cum este descris la punctul 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/Substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 f2æl pe godeu de soluție de cromogen/ substrat (10 ml de soluție de 80,6 mM de DMAB (dimetil amino benzaldehidă) + 10 ml de soluție 1.56 mM de MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]
-
MBTHC (3-metil-2-benzo-tiazolină hidrazonă clorhidrat) + 5 f2æl H(2)0(2)). Dezvoltarea culorii este oprită prin adăugarea a 50 f2æl H(2)SO(4) 3N după aproximativ 5-10 minute (înainte ca testul negativ de control să înceapă să se coloreze). Alți cromogeni, ca ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic]), TMB (tetrametil benzidină), sau OFD (orto-fenildiamină) pot fi de asemenea utilizate. 2.1.4.2. Plăcile se citesc la 600 nm (sau 620 nm). 2.2. Interpretarea rezultatelor 2.2.1. Valoarea finală
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]
-
se amestecă ușor pentru a asigura omogenizarea. Se incubează timp de 30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]
-
30 de minute la 37°C. 3.1.4. Se spală plăcile de cinci ori cu SSFTT și se usucă așa cum a fost descris mai sus. 3.1.5. Cromogen/ Substrat Se adaugă câte 100 f2æl/godeu de soluție de cromogen/ substrat (1 ml ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic])5 mg/ml + 9 ml de soluție tampon de substrat (soluție tampon de fosfat-citrat 0,1 M cu pH de 4, care conține H(2)O(2) 0,03 %] și se
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 15 februarie 2006 (*actualizată*) privind condiţiile de sănătate a animalelor ce guvernează mişcarea ecvideelor şi importul lor din ţări terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220360_a_221689]
-
marcat cu peroxidază, care se leagă de antigenul E^(rns) care formează un complex cu anticorpii cu care a fost căptușită suprafața microplăcii. Conjugatul care nu s-a legat se îndepărtează prin spălare și se adaugă un substrat ce conține cromogen. Intensitatea culorii care se dezvoltă, este invers proporțională cu cantitatea de anticorpi specifici pentru E^(rns) prezenți în probă. Dacă proba nu conține anticorpi (probă negativă) mare parte din cantitatea definită de antigen E^(rns) adăugat se poate lega de
NORMĂ SANITARĂ VETERINARĂ din 12 iulie 2005 care aprobă un manual de diagnostic stabilind proceduri de diagnostic, metode de prelevare a probelor şi criterii pentru evaluarea testelor de laborator pentru confirmarea pestei porcine clasice*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/220391_a_221720]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg/ml în apă distilata sterilă; peroxid de hidrogen (30% m/v-substrat) 0,05% v/v adăugat imediat înainte de utilizare (5 μl H2O2 la 10 ml OPD
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259610_a_260939]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg/ml în apă distilata sterilă; peroxid de hidrogen (30% m/v-substrat) 0,05% v/v adăugat imediat înainte de utilizare (5 μl H2O2 la 10 ml OPD
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259608_a_260937]
-
adăugarea la serul de testat. Anticorpii față de boală limbii albastre prezenți în serul de testat blochează reactivitatea anticorpilor monoclonali (Mab) și determină o reducere a culorii așteptate, dezvoltată după adăugarea de anticorpi anti-șoarece marcați cu enzimă și după adăugarea de cromogen/substrat. Serul poate fi testat la o singură diluție unică de 1:5 (test spot - apendice 1) sau poate fi titrat (titrarea serului - apendice 2) pentru a da diluția finală. Valorile inhibiției mai mari de 50% pot fi considerate pozitive
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
la -20°C sau liofilizați și se diluează înainte de utilizare 1/100 în tampon de blocare, înainte de utilizare. 5. Conjugat: globulina de iepure anti-șoarece (adsorbita și eluată) conjugata cu peroxidaza din hrean și păstrată la întuneric la 4°C. 6. Cromogen și substrat: ortofenilen diamina (cromogen-OPD) la o concentrație finală de 0,4 mg/ml în apă distilata sterilă; peroxid de hidrogen (30% m/v-substrat) 0,05% v/v adăugat imediat înainte de utilizare (5 μl H2O2 la 10 ml OPD
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar. În proba de competiție, anticorpii monoclonali trebuie să fie în exces; prin urmare este aleasă o diluție de antigen descendentă pe curbă
NORMĂ SANITARĂ-VETERINARĂ din 26 mai 2005 (**actualizată**) privind lista cuprinzând ţările terţe sau părţi ale ţărilor terţe şi condiţiile de certificare veterinară, sănătate animală şi publică pentru importul în Comunitatea Europeană al anumitor animale vii şi al cărnii proaspete provenite de la acestea şi preluarea acestor liste şi condiţii pentru importul în România*). In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de microtitrare. După spălarea plăcilor în vederea eliminării materialului liber, se adaugă un conjugat anti-Erns marcat peroxidază. Acesta se leagă de antigenul Erns complexat cu anticorpul plasat pe placa de microtitrare. Conjugatul nelegat este îndepărtat prin spălare și se adaugă substratul cromogen. Intensitatea culorii care apare este invers proporțională cu cantitatea de anticorpi specifici pentru Erns prezenți în probă. Dacă proba nu conține anticorpi (probă negativă), o mare parte din cantitatea definită de antigen Erns care a fost adăugată se poate lega
jrc5970as2003 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91142_a_91929]
-
cu tampon de blocare înainte de utilizare, îndreptat împotriva polipeptidei p7 specifice de grup. 5. Conjugatul: globulină anti-șoarece de iepure (absorbită și eluată) conjugată cu peroxid de hrean și păstrată la întuneric la o temperatură de 4°C. 6. Substratul și cromogenul: 0,2 g diamină de ortofenilenă (OPD) dizolvată într-o soluție tampon constând din 2,553 g acid citric și 4,574 g hidrogen ortofosfat bisodic ridicat la 500 ml cu apă distilată, divizată în 25 ml alicoți și păstrată
jrc2435as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87589_a_88376]
-
PBS. 7. Adăugați 50 μl globulină de iepure anti-șoarece la peroxidaza de hrean, diluată la o concentrație pre-titrată optimală, în fiecare godeu al plăcii de microtitrare. 8. Incubați o oră la 37șC pe un agitator orbital. 9. Adăugați substrat și cromogen după descrierea anterioară. Opriți reacția după zece minute prin adăugarea a 1 M acid sulfuric (50 μl/godeu). La testul competitiv, anticorpul monoclonal trebuie să fie în exces, pentru aceasta fiind aleasă o diluție a antigenului care se încadrează în
jrc2435as1994 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87589_a_88376]
-
un tampon de blocare. 1.1.5.4. Se incubează timp de 1 oră la 37șC într-un agitator rotativ. 1.1.5.5. Se spală plăcile de trei ori și se usucă în modul menționat anterior. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția cromogen (OFD = ortofenildiamină) conform instrucțiunilor fabricantului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă) chiar înainte de utilizare. Se adaugă un substrat (peroxid de hidrogen = H2O2), pentru obținerea unei concentrații finale de 0,05% (v/v) (1/2000
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
1.1.5.4. Se incubează timp de 1 oră la 37șC într-un agitator rotativ. 1.1.5.5. Se spală plăcile de trei ori și se usucă în modul menționat anterior. 1.1.6. Cromogen Se prepară soluția cromogen (OFD = ortofenildiamină) conform instrucțiunilor fabricantului (0,4 mg/ml în apă distilată sterilă) chiar înainte de utilizare. Se adaugă un substrat (peroxid de hidrogen = H2O2), pentru obținerea unei concentrații finale de 0,05% (v/v) (1/2000 dintr-o soluție la
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
într-o SSTF + 5% lapte degresat + 0,05% Tween-20 cu pH 7,2. Se incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.3.2. Se clătesc plăcile conform descrierii din etapa 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 µl/godeu de soluție de cromogen/substrat [10 ml de 80,6 mM de DMAB (dimetilaminobenzaldehidă) + 10 ml de 1,56 mM de MBTH (3-metil-2-benzotiazolină de hidroclorură de hidrazon) + 5 µl de
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
incubează timp de 1 oră la 37°C. 2.1.3.2. Se clătesc plăcile conform descrierii din etapa 2.1.1.2. 2.1.4. Cromogen/substrat 2.1.4.1. Se adaugă 200 µl/godeu de soluție de cromogen/substrat [10 ml de 80,6 mM de DMAB (dimetilaminobenzaldehidă) + 10 ml de 1,56 mM de MBTH (3-metil-2-benzotiazolină de hidroclorură de hidrazon) + 5 µl de H2O2]. Se blochează după aproximativ 5-10 minute (înainte să înceapă să se coloreze controlului
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
de MBTH (3-metil-2-benzotiazolină de hidroclorură de hidrazon) + 5 µl de H2O2]. Se blochează după aproximativ 5-10 minute (înainte să înceapă să se coloreze controlului negativ) reacția colorimetrică prin adăugarea de 50 µl de H2SO4 3N. Se pot utiliza și alți cromogeni, cum sunt ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic), TMP (tetrametil de benzidină) sau OFD (ortofenildiamină). 2.1.4.2. Se citește placa la 600 nm (sau 620 nm). 2.2. Interpretarea rezultatelor 2.2.1. Se calculează valoarea pragului adăugând
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]
-
godeu și se amestecă ușor pentru a garanta omogeneitatea. Se incubează timp de 30 de minute la 37șC. 3.1.4. Se spală plăcile de 5 ori cu SSTF și se usucă pe sugativă conform descrierii anterioare. 3.1.5. Cromogen/substrat Se adaugă în fiecare godeu 100 µl din soluția următoare de cromogen/substrat: 1 ml de ABTS (2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolină-6-acid sulfonic) cu 5 mg/ml + 9 ml de tampon de substrat (0,1 M de tampon de fosfat-citrat
jrc5495as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90665_a_91452]