942 matches
-
valori DO 0,4 și 1,4. Orice placă ce nu îndeplinește criteriile de mai sus trebuie eliminată. Dacă un pachet software al calculatorului nu este utilizabil, se printează valorile DO utilizând imprimantă ELISA. Se calculează valoarea medie DO pentru godeurile de control al antigenului, ce sunt echivalente cu valoarea 100%. Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
al antigenului, ce sunt echivalente cu valoarea 100%. Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm) x 100. Godeurile de control duble ale serurilor negative și godeurile blank în duplicat trebuie să înregistreze valori PI între +25% și -25% și respectiv între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm) x 100. Godeurile de control duble ale serurilor negative și godeurile blank în duplicat trebuie să înregistreze valori PI între +25% și -25% și respectiv între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se dezvoltă. Controlul serurilor intens pozitive și slab pozitive
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
respectiv între +51% și +80%. Diagnosticul de prag pentru seruri de testat este de 50% (50% PI sau 50% DO). Probele ce înregistrează valori PI 50% sunt înregistrate că negative. Probele ce înregistrează valori PI peste și sub pragul pentru godeurile duble sunt considerate dubioase; asemenea probe pot fi retestate prin testarea spot sau/și prin titrare. Probe pozitive pot fi de asemenea titrate a prevede o indicație a gradului de pozitivitate. Citire vizuală (cu ochiul liber): Probele pozitive și negative
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
de antigen sunt titrate față de o diluție constantă (1/100) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează o diluție de 1:20 în PBS de antigen al bolii limbii albastre în raport cu o diluție serica binara (50 μl/godeu) pe placă de microtitrare, utilizând o pipeta multicanal. 2. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de trei ori. 4. Se adaugă 50 μl de anticorpi monoclonali 3-17-A3 (diluție
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
utilizând o pipeta multicanal. 2. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de trei ori. 4. Se adaugă 50 μl de anticorpi monoclonali 3-17-A3 (diluție 1/100) în fiecare godeu al plăcii de microtitrare. 5. Se incubează o oră la 37°C pe un agitator orbital. 6. Se spală cu PBS de trei ori. 7. Se adaugă 50 μl de globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
oră la 37°C pe un agitator orbital. 6. Se spală cu PBS de trei ori. 7. Se adaugă 50 μl de globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon barbital sodic sau borat, pH 8,5% până la 9% este turnata într-o placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon barbitol sodic sau borat, pH 8,5% până la 9% este turnata într-o placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
în serie pe plăci de microtitrare utilizând anse de diluție de 0,05 ml. De asemenea, virusul titrat în prealabil se diluează în mediul de cultură fără ser conținând 100 TCID 50/0,05 ml, apoi se adaugă în fiecare godeu. Urmează incubarea timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
diluează în mediul de cultură fără ser conținând 100 TCID 50/0,05 ml, apoi se adaugă în fiecare godeu. Urmează incubarea timp de o oră la 37°C pentru a permite să aibă loc neutralizarea, se adăuga în fiecare godeu 0,05 ml de suspensie celulară conținând 0,5 până la 1,0 x 106 celule la 1 ml mediu de cultură celulară ce conține ser fără anticorpi față de virusul febrei aftoase și apoi placă se închide ermetic. Plăcile sunt incubate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
fiecare test includ antiser omolog cu titrul cunoscut, o cultură de celule martor, un martor de toxicitate a serului, un martor de mediu și o titrare de virus din care este calculată cantitatea actuala de virus utilizată în testare. Interpretare: Godeurile cu efect citopatic prezent sunt considerate că infectate și titrurile de neutralizare sunt exprimate că și corespunzătoare diluției finale de ser prezenta în amestecurile ser/virus la punct final 50% estimat în conformitate cu metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
finale de ser prezenta în amestecurile ser/virus la punct final 50% estimat în conformitate cu metoda Spearman-Karber. (Karber, G., 1931, Archiv fuer Experimentelle Pathologic und Pharmokologic, 162, 480). Testele sunt considerate a fi valide când cantitatea actuala de virus utilizată per godeu în testare este între 101,5 și 102,5 TCID50 și când titrul serului de referință este binar în raport cu titrul așteptat, estimat din manieră titrărilor anterioare. Cand valorile martorilor depășesc aceste limite, testările se repetă. La un titru final de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
de iepure, peste noapte, într-o cameră umedă și la temperatura camerei. 2. Cincizeci de microlitri din fiecare ser de testat în diluții serice în baza 2, în duplicat, pornind de la 1/4 sunt preparați în plăci de microtitrare cu godeuri multiple cu fund sub forma literei "U" (plăci carrier). Sunt adăugați cincizeci de microlitri dintr-o doză constantă de antigen în fiecare godeu și amestecul este lăsat peste noapte la 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
serice în baza 2, în duplicat, pornind de la 1/4 sunt preparați în plăci de microtitrare cu godeuri multiple cu fund sub forma literei "U" (plăci carrier). Sunt adăugați cincizeci de microlitri dintr-o doză constantă de antigen în fiecare godeu și amestecul este lăsat peste noapte la 4°C. Adăugarea antigenului reduce diluția de start a serului la 1/8. 3. Plăcile ELISA sunt spălate de cinci ori cu PBST. 4. Cincizeci de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]