850 matches
-
europene (EN): EN 12128 Biotehnologie. Laboratoare de cercetare, dezvoltare și analiză. Niveluri de izolare a laboratoarelor de microbiologie, zone cu risc, situațiile și cerințele fizice de securitate. EN 12738 Biotehnologie. Laboratoare de cercetare, dezvoltare și analiză. Ghid pentru izolarea animalelor inoculate cu microorganisme folosite în scopuri experimentale. EN 12740 Biotehnologie. Laboratoare de cercetare, dezvoltare și analiză. Ghid pentru manipularea, inactivarea și controlul deșeurilor. EN 12741 Biotehnologie. Laboratoare de cercetare, dezvoltare și analiză. Ghid pentru operațiunile din laboratoarele biotehnologice. Pentru exploatarea/administrarea
32006D0437-ro () [Corola-website/Law/294831_a_296160]
-
creează mediul să se controleze pH-ul după fiecare adăugare de antibiotice și ca acesta să fie readus la pH 7,0-7,4. CAPITOLUL 2 Izolarea virusului Izolarea virusului în ouăle embrionate ale păsărilor de curte Fluidul supernatant clarificat se inoculează în cantități de 0,1-0,2 ml în cavitatea alantoidă a minimum 4 embrioni A din ouă care au fost incubate timp de 8 - 10 zile. Ideal, aceste ouă ar trebui obținute dintr-un anumit efectiv indemn de agenți patogeni
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
se repetă folosind fluid alantoid/amniotic nediluat ca inoculant. Dacă se detectează hemaglutinarea, prezența bacteriei trebui exclusă pe cultură. Dacă sunt prezente bacterii, fluidele pot fi trecute printr-un filtru cu membrană de 450 nm, pot fi adăugate antibiotice și inoculate în ouăle embrionate. CAPITOLUL 3 Diagnostice diferențiate 1. Diferențierea preliminară Pentru că este important ca măsurile de control care limitează răspândirea virusului să fie aplicate cât mai rapid, fiecare laborator regional ar trebui să poată identifica orice virus hemaglutinic izolat ca
jrc1919as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87069_a_87856]
-
de oxitetraciclină. La realizarea mediului, pH-ul trebuie verificat după adăugarea antibioticelor și ajustat pentru a se obține un pH neutru cuprins între 7,0 și 7,4. CAPITOLUL 2 Izolarea virusului Izolarea virusului pe ouă embrionate de găină Se inoculează între 0,1 și 0,2 ml din supernatantul clarificat în cavitatea alantoidiană a cel puțin patru ouă embrionate de găină puse la incubat timp de 8-10 zile. Ideal este ca aceste ouă să provină de la un efectiv liber de
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
de granulă. 6.3.3. Se închide tăietura cu vaselină sterilă cu ajutorul unei seringi. 6.4. Inoculare prin seringă 6.4.1. Vinetele nu se udă cu o zi înaintea inoculării pentru a reduce presiunea turgor. 6.4.2. Se inoculează tulpinile de vânătă exact deasupra cotiledoanelor folosind o seringă cu ac hipodermic (de minimum 23G). Se distribuie granula la vinetele respective. 6.5. Se inoculează 25 de vinete cu o cultură cunoscută de C. sepedonicum și, dacă este posibil, cu
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
udă cu o zi înaintea inoculării pentru a reduce presiunea turgor. 6.4.2. Se inoculează tulpinile de vânătă exact deasupra cotiledoanelor folosind o seringă cu ac hipodermic (de minimum 23G). Se distribuie granula la vinetele respective. 6.5. Se inoculează 25 de vinete cu o cultură cunoscută de C. sepedonicum și, dacă este posibil, cu un țesut de tubercul infectat (5.1.) prin aceeași metodă de inoculare (6.2., 6.3. sau 6.4.). 6.6. Se inoculează 25 de
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
5. Se inoculează 25 de vinete cu o cultură cunoscută de C. sepedonicum și, dacă este posibil, cu un țesut de tubercul infectat (5.1.) prin aceeași metodă de inoculare (6.2., 6.3. sau 6.4.). 6.6. Se inoculează 25 de vinete cu SFT steril de 0,05 M prin aceeași metodă de inoculare (6.2., 6.3. sau 6.4.). 6.7. Vinetele se incubează în condiții adecvate (apendice 5) timp de 40 de zile. Se examinează regulat
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
ca rezultat ofilirea și pierderea vigorii vinetelor inoculate. Dacă testul IF este considerat pozitiv, se poate considera că este necesară o testare suplimentară. Este așadar esențial să se compare ratele de creștere ale tuturor plantelor supuse testului vinetei cu controalele inoculate cu SFT steril de 0,05 M și să se monitorizez condițiile de mediu ale serei. Recomandările pentru teste ulterioare sunt următoarele: 6.9.1. Se taie tulpinile deasupra locului inoculării și se îndepărtează frunzele. 6.9.2. Se macerează
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
2 cu IN KOH. Se distribuie în tuburi de cultură Pyrex de 16 mm x 100 mm (capacitate 12 ml) în volume de 5 ml și 10 ml. Se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 10 minute Se inoculează prin tăiere tuburi de 5 ml și 10 ml din fiecare cultură. Se adaugă aseptic 1 până la 2 ml parafină lichidă sterilă la tubul de 10 ml. Se incubează. Reacție pozitivă: Tub Culoare Interpretare Deschis Galben Fermentativă Închis Galben Deschis
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
volume de10 ml în sticle de 10 ml. Se sterilizează prin autoclavizare la 121 C timp de 15 minute. Reactiv A: H2SO4 8 g Acid acetic SN 1 litru Reactiv B: Naftilamină 5 g Acid acetic SN 1 litru Se inoculează mediul de nitrat în duplicat. Se testează după 10 și 20 de zile adăugând o picătură de iod Lugol, 0,5 ml reactiv A și 0,5 ml reactiv B. Dacă mediul nu devine roșiatic, se adaugă aproximativ 50 mg
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
K2HPO4 1 g NaCl 5 g Apă distilată 1 litru Se dizolvă și se dozează în volume de 6 ml în tuburi de 16 x 100 mm. Se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 10 de minute. Se inoculează și se suspendă aseptic o hârtie de acetat de plumb (Merck 9511) la gura tubului. Se fixează cu capacul. Se incubează timp de maximum douăzeci de zile. Reacție pozitivă: Producerea H2S din tripton este indicată prin colorarea negru maronie a
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
Ramamurthi, 1959) Mediu: Amestec nutritiv bacto difco 8 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă și se dozează în volume de 6 ml în tuburi. Se sterilizează prin autoclavizare la 121ș C timp de 15 de minute. Se inoculează și se incubează la 37 0 C. Reacție pozitivă: Se urmărește creșterea. - Creșterea în clorură de sodiu 7 % (Ramamurthi, 1959) Mediu: Amestec nutritiv difco bacto 8 g NaCl 70 g Apă distilată 1 litru Se amestecă, se dizolvă și se
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
30 de minute. ― Hidroliza amidonului Mediu: Agar nutritiv bacto difco (topit) 1 litru Amidon solubil bacto difco (nr. 0178) 2 g Se amestecă și se sterilizează prin autoclavizare la 115ș C timp de 10 de minute. Se toarnă în talere. Inoculați în spoturi talerele. Dacă se constată o creștere bună (10 până la 20 de zile), se îndepărtează o parte din creștere și se imersează în iod Lugol. Reacție pozitivă: Hidroliza amidonului este indicată prin zone limpezi, sub sau în jurul creșterii bacteriene
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
de imunofluorescență pregătite suplimentar, până la aplicarea cu succes a metodei menționate. 2. În cazul confirmării pozitive a organismului trebuie să se păstreze și să se conserve adecvat: ― materialul specificat la alin. (1), și ― o mostră din materialul de vânătă infectată, inoculată cu un tubercul sau extract de plantă, și ― cultura izolată a organismului, timp de minimum o lună de la procedura de notificare conformă cu art. 5 alin. (2). ANEXA III 1. Elementele avute în vedere pentru determinarea gradului contaminării probabile conform
jrc2214as1993 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87367_a_88154]
-
culturii. În acest scop, se incubează cele două eșantioane în apă peptonată tamponată în conformitate cu procedura obișnuită. Se prelevează 1 ml de bulion incubat din fiecare eșantion și se agită bine. Apoi se prelevează 0,1 ml din amestec și se inoculează cutiile de agar MSRV după metoda obișnuită. 3.3. Serotiparea Cel puțin un izolat din fiecare eșantion pozitiv trebuie tipizat, în conformitate cu clasificarea Kaufmann-White. 4. Rezultatele și transmiterea informațiilor Un efectiv de reproducere este considerat pozitiv în sensul verificării realizării obiectivului
32005R1003-ro () [Corola-website/Law/294221_a_295550]
-
douăsprezece sau douăzeci și patru de cupule. Se pot utiliza alte descendențe celulare cu o eficacitate și sensibilitate confirmate pentru izolarea virusului AIS, ținând seama de variabilitatea sușei și de capacitatea diverselor sușe de a se reproduce în descendențe celulare diferite. Se inoculează o suspensie de organe tratată cu antiser, în culturi celulare tinere, în fază de creștere activă, în scopul obținerii unei diluții finale a materialului tisular, într-un mediu de cultură de 1: 1 000. La fiecare suspensie de organe, se
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
riscul contaminării încrucișate, se recomandă utilizarea unor lame separate, cu douăsprezece sau douăzeci și patru de cupule, în cazul eșantioanelor care provin din situri de acvacultură diferite. III.2.2. Se păstrează o lamă neinoculată care va servi ca martor negativ. Se inoculează o altă lamă cu un izolat de referință al virusului AIS, care va servi ca martor pozitiv și se procedează în felul următor: se inoculează 100 μl dintr-un preparat mamă al virusului AIS (concentrație minimă: 107 TCID50 pe ml
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
III.2.2. Se păstrează o lamă neinoculată care va servi ca martor negativ. Se inoculează o altă lamă cu un izolat de referință al virusului AIS, care va servi ca martor pozitiv și se procedează în felul următor: se inoculează 100 μl dintr-un preparat mamă al virusului AIS (concentrație minimă: 107 TCID50 pe ml) în prima cupulă și se amestecă bine. Se transferă un volum din această materie din prima în a doua cupulă pentru a se obține o
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
timp de 30 de minute, la o temperatură de 0-6 șC și se filtrează suspensia la 0,22 μm. În cazul în care contaminarea bacteriană are loc în cursul fazei de subcultură, suspensia se filtrează la 0,22 μm, se inoculează unor celule proaspete și se lasă la incubat o nouă perioadă de patrusprezece până la optsprezece zile. III.6. Teste de identificare a virusului În cazul depistării unui ECP, indiferent de stadiu sau în cazul unui test de hemadsorbție pozitiv, se
jrc5932as2002 by Guvernul României () [Corola-website/Law/91104_a_91891]
-
patogenicitate Acesta este un test pentru confirmarea diagnosticului de Ralstonia solanacearum și pentru evaluarea virulenței culturilor identificate ca fiind Ralstonia solanacearum. Se prepară un inocul de 106 celule pe ml din cultură și dintr-o sușă de control pozitiv. Se inoculează 5- 10 plante de tomată sau vinete, preferabil la nivelul celei de a treia frunze adevărate sau mai bătrâne (secțiunea III.6.). Se incubează până la două săptămâni la 22° C - 28° C și umiditate relativă mare, udând zilnic. Se observă
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de vinete în stadiul celei de a treia frunze adevărate pentru fiecare eșantion. Plantele de test nu se udă cu 24 de ore înaintea inoculării. 6.2 Se distribuie 100 μl de extract concentrat resuspendat între plantele de test. Se inoculează în tulpină între cotiledoane și în unul sau mai multe alte locuri. 6.3 Prin aceeași tehnică se inoculează 10 răsaduri cu o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă din biovar 2 / rasa 3 de Ralstonia
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
cu 24 de ore înaintea inoculării. 6.2 Se distribuie 100 μl de extract concentrat resuspendat între plantele de test. Se inoculează în tulpină între cotiledoane și în unul sau mai multe alte locuri. 6.3 Prin aceeași tehnică se inoculează 10 răsaduri cu o suspensie de 106 celule pe ml dintr-o sușă virulentă din biovar 2 / rasa 3 de Ralstonia solanacearum drept control pozitiv și cu tampon de concentrare drept control negativ. Se separă plantele de control pozitiv de
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
lamele de imunofluorescență, și - toată documentația relevantă, până la finalizarea respectivei metode. 2. În cazul confirmării organismului, ar trebui să se păstreze să și conserve în condiții corespunzătoare: - materialul prevăzut în alin. (1), și - un eșantion din tomata sau vânăta infectată inoculată cu extractul de plantă sau tubercul, dacă este cazul, și - cultura izolată a organismului, până cel puțin o lună după procedura de notificare prevăzută în art. 5 alin. (2). ANEXA IV Elementele din investigația prevăzută în art. 5alin. alin. (1
jrc3681as1998 by Guvernul României () [Corola-website/Law/88841_a_89628]
-
de oxitetraciclină. Proporția de antibiotice poate fi de 5 ori mai mică pentru tampoanele traheale. În timpul preparării mediului, este imperativ ca pH-ul să fie controlat după adăugarea antibioticelor și ajustat. 4. Izolarea virusului în ouăle de găină embrionate Se inoculează 0,2 ml de supernatant clarifiat în cavitatea alantoidiană a cel puțin 4 ouă de găină embrionate, puse la incubat pentru 8 până la 11 zile. În mod ideal, aceste ouă ar trebui să provină de la un lot liber de organisme
jrc2655as1995 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87809_a_88596]
-
Jumătatea superioară a gelului IEF a fost scanată la λ = 634 nm. ANEXA XVI (Articolul 11) METODĂ DE REFERINȚĂ PENTRU DETECTAREA BACTERIILOR COLIFORME DIN UNT, LAPTE PRAF DEGRESAT, CAZEINĂ ȘI CAZEINAȚI La analiza untului pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme se inoculează probe de 1 g de unt în mediul de cultură. Pentru detectarea prezenței bacteriilor coliforme în lapte praf degresat sau cazeină/cazeinați, se inoculează probe de 0,1 g în mediul de cultură. Se folosește standardul FIL 73A: 1985, metoda
jrc5187as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90355_a_91142]