942 matches
-
de microlitri de amestec ser/antigen sunt apoi transferați din plăcile carrier în plăcile ELISA căptușite cu ser de iepure și incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 5. După spălare, se adăuga în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
în fiecare godeu 50 μl de antiser de porc de Guineea la antigenul utilizat la pct. 4. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 6. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
în fiecare godeu 50 μl de imunoglobulina de iepure anti-porc de Guineea conjugata cu peroxidaza din hrean. Plăcile sunt incubate la 37°C timp de o oră pe un agitator rotativ. 7. Plăcile sunt spălate și se adaugă în fiecare godeu 50 μl de ortofenil-diamina conținând 0,05% H(2)O(2) (30%) m/v. 8. Reacția este stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
v. 8. Reacția este stopată după 15 minute cu H(2)ȘO(4) soluție 1,25 M. Plăcile sunt citite spectofotometric la 492 nm la un cititor ELISA legat la un microcomputer. Martori: Pentru fiecare antigen se utilizează 40 de godeuri ce nu conțin ser dar conțin antigen diluat în PBST; o diluție binara în serie, dublă de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
de antiser de referință, omolog bovin; o diluție binara în serie, dublă de ser negativ bovin. Interpretare: Titrurile de anticorpi sunt exprimate că diluție finală a serului de testat ce dă 50% din valoarea medie a densităților optice înregistrată în godeurile de control al virusului unde serul de testat este absent. Titrurile superioare valorii de 1/40 sunt considerate pozitive. Referințe: Hamblin C., Barnett ITR și Hedger RS (1986) "A new enzime-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies against
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
Amestecurile virus/ser sunt incubate în plăci de microtitrare, la 37°C timp de 30 până la 60 minute înainte de a fi adăugate celulele corespunzătoare. Celulele sunt utilizate la concentrația care formează un monostrat complet după 24 de ore. În fiecare godeu se pun 0,1 ml suspensie celulară. Martori: (i) proba de infectivitate a virusului, (îi) martori de toxicitate a serului, (iii) martori de cultură celulară neinoculată, (iv) antiseruri de referință. Interpretare: Rezultatele testului de seroneutralizare și titrul virusului utilizat în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/180394_a_181723]
-
unor astfel de unități și actualizările lor regulate." 12. Protocolul de testare pentru boala limbii albastre, din partea III C a anexei nr. 1 la normă sanitară veterinară se modifică și va avea următorul cuprins: "Protocol de testare: Control conjugat (Ce): Godeurile 1A și 1B reprezintă un martor de control �� conținând antigen BTV și conjugat. Acesta poate fi utilizat ca martor la cititorul ELISA. Control cu Mab (Cm): Coloanele 1 și 2, rândurile G și H reprezintă testul de control cu anticorpi
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
BTV și conjugat. Acesta poate fi utilizat ca martor la cititorul ELISA. Control cu Mab (Cm): Coloanele 1 și 2, rândurile G și H reprezintă testul de control cu anticorpi monoclonali și conțin antigen BTV, anticorpi monoclonali și conjugat. Aceste godeuri reprezintă culoare maximă. Media citirilor densității optice pentru acest control reprezintă valoarea de inhibare 0%. Control pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E, F. Aceste godeuri conțin antigen BTV, respectiv antiser BTV intens pozitiv și slab
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
monoclonali și conțin antigen BTV, anticorpi monoclonali și conjugat. Aceste godeuri reprezintă culoare maximă. Media citirilor densității optice pentru acest control reprezintă valoarea de inhibare 0%. Control pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E, F. Aceste godeuri conțin antigen BTV, respectiv antiser BTV intens pozitiv și slab pozitiv, Mab și conjugat. Control negativ (C-): Godeurile 2A și 2B sunt teste de control negative, care conțin antigen BTV, antiser BTV negativ, Mab și conjugat. Seruri de testat: Pentru
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
pentru acest control reprezintă valoarea de inhibare 0%. Control pozitiv (C++, C+): Coloanele 1 și 2, rândurile C, D, E, F. Aceste godeuri conțin antigen BTV, respectiv antiser BTV intens pozitiv și slab pozitiv, Mab și conjugat. Control negativ (C-): Godeurile 2A și 2B sunt teste de control negative, care conțin antigen BTV, antiser BTV negativ, Mab și conjugat. Seruri de testat: Pentru supravegheri serologice pe scară largă și screening rapid, serurile pot fi testate la o singură diluție de 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
va avea următorul cuprins: "Procedura: 1. Se diluează antigenul BTV în PBS în concentrație de pretitrare, se dispersează virusul agregat rapid utilizând ultrasunetele (sonicare; dacă nu este disponibil un sonicator, se pipeteaza puternic) și se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii ELISA. Se lovesc ușor lațurile plăcii pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile prin inundarea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii ELISA. Se lovesc ușor lațurile plăcii pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile prin inundarea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă pe hârtie absorbanta. 3. Godeurile de control: Se adaugă 100 æl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 æl de ser de control negativ și pozitiv, la o diluție de 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
ușor lațurile plăcii pentru a dispersa antigenul. 2. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile prin inundarea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă pe hârtie absorbanta. 3. Godeurile de control: Se adaugă 100 æl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 æl de ser de control negativ și pozitiv, la o diluție de 1:5 (10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), în godeurile
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală plăcile prin inundarea și golirea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă pe hârtie absorbanta. 3. Godeurile de control: Se adaugă 100 æl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 æl de ser de control negativ și pozitiv, la o diluție de 1:5 (10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), în godeurile respective C-, C+ și C++. Se adaugă 50 æl de tampon de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
Godeurile de control: Se adaugă 100 æl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 æl de ser de control negativ și pozitiv, la o diluție de 1:5 (10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), în godeurile respective C-, C+ și C++. Se adaugă 50 æl de tampon de blocare în godeurile de control cu Mab. Metodă de titrare punctuala: Se adaugă o diluție 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare în godeurile
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
adaugă 50 æl de ser de control negativ și pozitiv, la o diluție de 1:5 (10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), în godeurile respective C-, C+ și C++. Se adaugă 50 æl de tampon de blocare în godeurile de control cu Mab. Metodă de titrare punctuala: Se adaugă o diluție 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare în godeurile duplicat din coloanele 3-12 (10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), sau Metodă de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
godeurile respective C-, C+ și C++. Se adaugă 50 æl de tampon de blocare în godeurile de control cu Mab. Metodă de titrare punctuala: Se adaugă o diluție 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare în godeurile duplicat din coloanele 3-12 (10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o serie dublă de diluție din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
10 æl ser + 40 æl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o serie dublă de diluție din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a 8 godeuri pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serului de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă câte 50 æl în toate godeurile de pe placă, cu excepția celui cu martor
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
blocare de-a lungul a 8 godeuri pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serului de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă câte 50 æl în toate godeurile de pe placă, cu excepția celui cu martor. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă pe hârtie absorbanta. 6. Se diluează concentratul de globuline
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă pe hârtie absorbanta. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-soarece 1:5000 în tampon de blocare și se adaugă câte 50 æl în toate godeurile de pe placă. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 de minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă pe hârtie absorbanta. 8. Se decongelează OPD și imediat înainte de utilizare se adaugă
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
de trei ori cu PBS și se usucă pe hârtie absorbanta. 8. Se decongelează OPD și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 æl de peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii. Se lasă culoarea să se dezvolte timp de aproximativ 10 minute și se oprește reacția cu acid sulfuric 1 M (50 æl pe godeu). Culoarea ar trebui să se dezvolte în godeurile cu Mab și în acele godeuri care
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii. Se lasă culoarea să se dezvolte timp de aproximativ 10 minute și se oprește reacția cu acid sulfuric 1 M (50 æl pe godeu). Culoarea ar trebui să se dezvolte în godeurile cu Mab și în acele godeuri care conțin ser fără anticorpi la BTV. 9. Se examinează și se înregistrează plăcile fie vizual fie utilizând un cititor spectrofotometric." 14. Partea de analiză a
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
OPD. Se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii. Se lasă culoarea să se dezvolte timp de aproximativ 10 minute și se oprește reacția cu acid sulfuric 1 M (50 æl pe godeu). Culoarea ar trebui să se dezvolte în godeurile cu Mab și în acele godeuri care conțin ser fără anticorpi la BTV. 9. Se examinează și se înregistrează plăcile fie vizual fie utilizând un cititor spectrofotometric." 14. Partea de analiză a rezultatelor de la testele efectuate pentru boala limbii albastre
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
toate godeurile plăcii. Se lasă culoarea să se dezvolte timp de aproximativ 10 minute și se oprește reacția cu acid sulfuric 1 M (50 æl pe godeu). Culoarea ar trebui să se dezvolte în godeurile cu Mab și în acele godeuri care conțin ser fără anticorpi la BTV. 9. Se examinează și se înregistrează plăcile fie vizual fie utilizând un cititor spectrofotometric." 14. Partea de analiză a rezultatelor de la testele efectuate pentru boala limbii albastre, din partea III C a anexei nr.
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]
-
anexei nr. 1 se modifică și va avea următorul cuprins: "Analiza rezultatelor: Utilizând pachetul software se imprimă valorile DO (densității optice) și procentul de inhibiție (PI) pentru serurile de testat și cele de control, pe baza valorii medii înregistrate în godeurile de control cu antigen. Datele, exprimate că valori DO și PI sunt utilizate pentru a determina dacă testul a fost efectuat în limite acceptabile. Limitele superioare ale testului de control (LSC) și limitele inferioare ale testului de control (LIC) pentru
EUR-Lex () [Corola-website/Law/185454_a_186783]