83,221 matches
-
mg/ml. Această suspensie rămâne stabilă cel puțin un an la 4° C. 2.1.5. Suspensie de D-lactat dehidrogenază (D-LDH), 5 mg/ml. Această suspensie rămâne stabilă cel puțin un an la 4° C. Se recomandă înainte de determinare verificarea activității enzimei. Notă: Toți reactivii sunt disponibili în comerț. 2.2. Aparatură 2.2.1. Un spectrofotometru pentru determinări la 340 nm., lungimea de undă la care absorbția NADH este maximă. În cazul în care acesta nu este disponibil
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
dehidrogenază (D-LDH), 5 mg/ml. Această suspensie rămâne stabilă cel puțin un an la 4° C. Se recomandă înainte de determinare verificarea activității enzimei. Notă: Toți reactivii sunt disponibili în comerț. 2.2. Aparatură 2.2.1. Un spectrofotometru pentru determinări la 340 nm., lungimea de undă la care absorbția NADH este maximă. În cazul în care acesta nu este disponibil se poate utiliza un spectrofotometru cu o sursă spectrală discontinuă, care să permită măsurători la 334 nm sau 365 nm
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
la 2 ml. 2.3. Pregătirea probei Notă preliminară: Nici o parte a sticlăriei care intră în contact cu amestecul de reacție nu trebuie atinsă cu degetele, pentru că aceasta poate introduce acid L-lactic și poate astfel conduce la rezultate eronate. Determinarea lactatului este efectuată în mod normal direct pe vin, fără îndepărtarea prealabilă a pigmentației (colorație) și fără diluare în cazul în care concentrația acidului lactic este mai mică de 100 mg/l. Dacă, totuși, concentrația acidului lactic se situează între
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
apă bidistilată, - 1 g/l și 2,5 g/l, se diluează 1/25 cu apă bidistilată, - 2,5 g/l și 5 g/l, se diluează 1/50 cu apă bidistilată. 2.4. Metoda de lucru 2.4.1. Determinarea acidului lactic total Soluția tampon trebuie să fie la o temperatură între 20 și 25°C înainte de a trece la determinare. Cu spectrofotometrul reglat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuve cu drum optic de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
și 5 g/l, se diluează 1/50 cu apă bidistilată. 2.4. Metoda de lucru 2.4.1. Determinarea acidului lactic total Soluția tampon trebuie să fie la o temperatură între 20 și 25°C înainte de a trece la determinare. Cu spectrofotometrul reglat la lungimea de undă de 340 nm, se determină absorbția folosind cuve cu drum optic de 1 cm, cu aerul ca standard de absorbție zero (referință) (fără cuvă în drumul optic) sau cu apă ca standard. Se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de absorbție a soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicând procedura pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
pentru probă (A2). Se calculează diferențele (A2 - A1) dintre absorbțiile soluțiilor din cuvele de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicând procedura pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4, se omogenizează, se așteaptă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicând procedura pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
AS. La final se calculează diferența dintre ele: 2.4.2. Determinarea acidului L-lactic și a acidului D-lactic Determinările acidului L-lactic și acidului D-lactic pot fi efectuate independent aplicând procedura pentru determinarea acidului lactic total până la determinarea A1 și continuând apoi după cum urmează: Se adaugă 0,02 ml de soluție 2.1.4, se omogenizează, se așteaptă până la terminarea reacției (aproximativ 20 minute) și se determină absorbțiile din cuvele de referință și pentru probă (A2). Se adaugă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de referință și pentru probă, AR și AS. La final se calculează diferența între acestea: Notă: Timpul necesar pentru finalizarea acțiunii enzimei poate varia de la un lot la altul. Valoarea de mai sus este dată numai orientativ și se recomandă determinarea ei pentru fiecare lot. Când se determină acidul L-lactic singur, timpul de incubare poate fi redus la 10 minute. 2.5. Exprimarea rezultatelor Concentrația acidului lactic se redă în grame la litru, cu o cifră zecimală. 2.5.1
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
a fost diluată în timpul pregătirii, rezultatul se înmulțește cu factorul de diluare. Notă: 2.5.1.2. Acid L-lactic C = 0,160 x A Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, rezultatul se înmulțește cu factorul de diluare. Notă: Determinare la 365 nm: C = 0,297 2.5.2. Repetabilitatea (r) r = 0,02 + 0,07 xi g/l xi este concentrația acidului lactic în probă în g/l. 2.5.3. Reproductibilitatea (R) R = 0,05 + 0,125 xi
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
0,125 xi g/l xi este concentrația acidului lactic în probă în g/l. 3. METODA UZUALĂ 3.1.1. Pentru tratamentul preliminar al vinului Consultați capitolul "Acidul tartric", metoda uzuală, secțiunea 3.1.1. 3.1.2. Pentru determinarea acidului lactic 3. 1.2.1. Soluție 0,1M de sulfat de ceriu (IV) în acid sulfuric 0,35M: Păstrând soluția rece, se dizolvă 40,431 g de sulfat de ceriu (IV), Ce(SO4)2·4H2O în 350 ml soluție
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
2.1. Coloană de sticlă cu diametrul interior de 10-11 mm și lungă de aproximativ 300 mm, echipată cu robinet de golire pentru reglarea curgerii. 3.2.2. Baie de apă termostatată la 65° C. 3.2.3. Spectrofotometru pentru determinarea absorbției la o lungime de undă de 570 nm, echipat cu cuve cu drum optic de 1 cm. 3.3. Metoda de lucru 3.3.1. Pregătirea coloanei de schimb ionic Vezi capitolul "Acidul tartric", metoda uzuală, secțiunea 3.3
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
Metoda de lucru 3.3.1. Pregătirea coloanei de schimb ionic Vezi capitolul "Acidul tartric", metoda uzuală, secțiunea 3.3.1. 3.3.2. Separarea acizilor organici Vezi capitolul "Acidul tartric", metoda uzuală, secțiunea 3.3.2. 3.3.3. Determinarea acidului lactic Se pun 10 ml eluat într-o eprubetă de 50 ml cu dop de sticlă rodat și se adaugă 10 ml soluție de sulfat de ceriu (punctul 3.1.2.1). Se agită; se așează eprubeta într-o
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
cu dop cu 5 ml acetat de sodiu 27% (punctul 3.1.2.3) și 2 ml de H2SO4 0,775M (77,5 ml de H2SO4 1M se aduc la 100 ml cu apă distilată). Apoi, la fel ca la determinarea acidului lactic, se adaugă 5 ml de nitroprusiat de sodiu 2% (punctul 3.1.2.5) și 5 ml de piperidină 10% (punctul 3.1.16). După agitare, se măsoară absorbția în aceleași condiții ca cele descrise pentru măsurarea acidului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
de undă și absorbanța spectrală a aparatului. 3.2. Cuve de sticlă cu drum optic de 1 cm sau cuve de unică folosință. 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de eșantioane între 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Determinarea acidului L-malic se realizează în mod normal direct pe vin, fără o îndepărtare prealabilă a pigmentării (coloritului) și fără diluare, cu condiția de a avea o concentrație a acidului L-malic mai mică de 350 mg/l (măsurată la
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
coeficientul de absorbție a NADH (la 340 nm, є=6,3 m mol -1 1 cm-1) astfel încât, pentru L-malat: C = 0,473 ΔA g/l Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, se înmulțește rezultatul cu factorul de diluare. Notă: Determinări la 334 nm: C = 0,482 ΔA Determinări la 365 nm: C = 0,876 ΔA 6.2. Repetabilitatea (r) r = 0,03 + 0,034xi xi este concentrația acidului malic în probă, în g/l. 6.3. Reproductibilitatea (R) R = 0
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
є=6,3 m mol -1 1 cm-1) astfel încât, pentru L-malat: C = 0,473 ΔA g/l Dacă proba a fost diluată în timpul pregătirii, se înmulțește rezultatul cu factorul de diluare. Notă: Determinări la 334 nm: C = 0,482 ΔA Determinări la 365 nm: C = 0,876 ΔA 6.2. Repetabilitatea (r) r = 0,03 + 0,034xi xi este concentrația acidului malic în probă, în g/l. 6.3. Reproductibilitatea (R) R = 0,05 + 0,071 xi xi este concentrația acidului
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
concentrația acidului malic în probă, în g/l. 6.3. Reproductibilitatea (R) R = 0,05 + 0,071 xi xi este concentrația acidului malic în probă, în g/l. 20. ACIDUL D-MALIC (metoda enzimatică) Test combinat pentru aproximativ 30 de determinări. 1. PRINCIPIUL Acidul D-malic (D-malat) este oxidat de nicotinamid adenin dinucleotidă la oxaloacetat, în prezența D-malat dehidrogenază decarboxilantă (D-MDH). Oxaloacetatul format în această reacție este descompus în piruvat și acid carbonic. Cantitatea de NADH formată este proporțională concentrației
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
dacă este depozitată la +4șC și timp de două luni dacă este depozitată la -20șC. Soluția de la punctul 2.1.3 este stabilă timp de cinci zile dacă este depozitată la +4șC. 3. APARATURA 3.1. Un spectrofotometru care permite determinări la 340 nm, lungimea de undă la care absorbția NADH și NAPDH este maximă. În lipsa acestuia, poate fi folosit un spectrofotometru cu o sursă discontinuă a spectrului care permite determinări la 334 sau 365 nm. 3.2. Cuve de sticlă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
la +4șC. 3. APARATURA 3.1. Un spectrofotometru care permite determinări la 340 nm, lungimea de undă la care absorbția NADH și NAPDH este maximă. În lipsa acestuia, poate fi folosit un spectrofotometru cu o sursă discontinuă a spectrului care permite determinări la 334 sau 365 nm. 3.2. Cuve de sticlă de 1 cm (dacă se dorește, pot fi utilizate cuvele de folosință unică). 3.3. Micropipete pentru pipetarea volumelor de 0,01 și 2 ml. 4. PREGĂTIREA PROBEI Cantitatea de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
m/v). 3.5. Soluție de sulfat de sodiu 10 % (m/v). 3.6. Acid sulfuric concentrat 95-97% (m/m). 3.7. Acid sulfuric 86 % (m/m). 3.8. Acid cromotropic 5% (m/v). Se prepară soluție proaspătă înainte de fiecare determinare prin dizolvare a 500 mg de sodiu cromotropic (C10H6Na2O8S22H20) în 10 ml apă distilată. 3.9. Soluție de acid DL-malic 0,5g/l Se dizolvă 250 g acid malic (C4H6O5) în soluție de sulfat de sodiu (10%) și se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
eluează acizii absorbiți în rășina de schimb ionic cu soluție sulfat de sodiu 10% (punctul 3.5). Se colectează eluatul într-un balon cotat de 100 ml. Coloana poate fi regenerată folosind metoda descrisă la punctul 4.1. 4.4. Determinarea acidului malic Se etichetează două tuburi cu gât larg de 30 ml (prevăzute cu dopuri de sticlă) A și B. În fiecare tub se adaugă 1,0 ml din eluent ( punctul 4.3) și 1 ml de acid cromotropic (5
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
Rezultatul este exprimat cu o cifră zecimală. Repetabilitatea: Conținuturi < 2 g/l: r = 0,1 g/l. Conținuturi > 2 g/l: r = 0,2 g/l. Reproductibilitatea: R = 0,3 g/l 22. ACIDUL SORBIC 1. PRINCIPIUL METODELOR 1.1. Determinarea prin spectrofotometria de absorbție în ultraviolet Acidul sorbic (acidul trans, trans 2,4 hexandienoic) extras prin distilarea cu vapori de apă este determinat în distilatul de vin prin spectrofotometria de absorbție în ultraviolet. Substanțele care interferă în ultraviolet sunt îndepărtate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]
-
în ultraviolet. Substanțele care interferă în ultraviolet sunt îndepărtate prin evaporarea până la uscare folosind o bază slabă, hidroxidul de calciu. Cromatografia în strat subțire este folosită pentru confirmarea nivelurilor (1 mg/l) mai mici de 20 mg/l. 1.2. Determinarea prin gaz cromatografie Acidul sorbic extras în etil eter este separat prin gaz cromatografie cu un etalon. 1.3. Identificarea urmelor prin cromatografia în strat subțire Acidul sorbic extras în eterul etilic este separat prin cromatografia în strat subțire și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86816_a_87603]