2,675 matches
-
1 la o temperatură de 25șC. 5.2. Repartizarea, sterilizarea și conservarea mediului de cultură Se împarte mediul de cultură (5.1) în cantități de 100 până la 150 ml în baloane sau în cantități de 12 până la 15 ml în eprubete (4.2.2). Se astupă baloanele și eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Se verifică pH-ul mediului. Dacă mediul de cultură nu va fi utilizat imediat, se păstrează la adăpost
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Repartizarea, sterilizarea și conservarea mediului de cultură Se împarte mediul de cultură (5.1) în cantități de 100 până la 150 ml în baloane sau în cantități de 12 până la 15 ml în eprubete (4.2.2). Se astupă baloanele și eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Se verifică pH-ul mediului. Dacă mediul de cultură nu va fi utilizat imediat, se păstrează la adăpost de lumină, la o temperatură între 1 și
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
l) de hidroxid de sodiu sau de acid clorhidric astfel ca, după sterilizare, pH-ul să fie de 7,0 ± 0,1 la o temperatură de 25șC. 6.2. Repartizarea, sterilizarea și păstrarea diluantului Se repartizează diluantul (6.1) în eprubete (4.2.1) în asemenea cantități încât, după sterilizare, fiecare eprubetă să conțină 9,0 ± 0,2 ml de diluant. Se astupă eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Se verifică pH
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
după sterilizare, pH-ul să fie de 7,0 ± 0,1 la o temperatură de 25șC. 6.2. Repartizarea, sterilizarea și păstrarea diluantului Se repartizează diluantul (6.1) în eprubete (4.2.1) în asemenea cantități încât, după sterilizare, fiecare eprubetă să conțină 9,0 ± 0,2 ml de diluant. Se astupă eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Se verifică pH-ul diluantului. Dacă diluantul nu se utilizează imediat, se păstrează la
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
o temperatură de 25șC. 6.2. Repartizarea, sterilizarea și păstrarea diluantului Se repartizează diluantul (6.1) în eprubete (4.2.1) în asemenea cantități încât, după sterilizare, fiecare eprubetă să conțină 9,0 ± 0,2 ml de diluant. Se astupă eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Se verifică pH-ul diluantului. Dacă diluantul nu se utilizează imediat, se păstrează la adăpost de lumină, la o temperatură între 1 și 5șC, cel mult
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
cu corecție de temperatură, sensibil la unități pH de ordinul ± 0,1. 4.1.5 Baie de apă reglabilă la 45 ± 1șC. 4.1.6 Ansă din platină iridiu sau din nichel-crom. 4.2 Sticlăria de laborator 4.2.1 Eprubete cu dopuri corespunzătoare și cu capacitate de aproximativ 20 ml, pentru a putea conține mediul de confirmare (pct. 5.2) și clopote Durham de dimensiuni care să permită utilizarea lor în aceste eprubete. 4.2.2 Baloane cu capacitate de la
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
2 Sticlăria de laborator 4.2.1 Eprubete cu dopuri corespunzătoare și cu capacitate de aproximativ 20 ml, pentru a putea conține mediul de confirmare (pct. 5.2) și clopote Durham de dimensiuni care să permită utilizarea lor în aceste eprubete. 4.2.2 Baloane cu capacitate de la 150 la 250 ml pentru mediul selectiv solid (pct. 5.1). 4.2.3 Pipete din sticlă sau din material sintetic steril, neciobite, cu capacitate nominală de 1-10 ml, cu un orificiu de
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
cel puțin 0,1 mol/l) de hidroxid de sodiu sau de acid clorhidric astfel ca, după sterilizare, să fie de 7,2 ± 0,1 la o temperatură de 25șC. Se repartizează mediul, în cantități de câte 10 ml, în eprubetele (pct. 4.2.1) cu clopote Durham (pct. 4.2.1). Se astupă eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (pct. 4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Clopotele Durham nu au voie să conțină bule de aer după
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
astfel ca, după sterilizare, să fie de 7,2 ± 0,1 la o temperatură de 25șC. Se repartizează mediul, în cantități de câte 10 ml, în eprubetele (pct. 4.2.1) cu clopote Durham (pct. 4.2.1). Se astupă eprubetele. Se sterilizează în autoclavă (pct. 4.1.2) la 121 ± 1șC timp de 15 minute. Clopotele Durham nu au voie să conțină bule de aer după sterilizare. Se verifică pH-ul mediului. Dacă mediul nu este utilizat imediat, se păstrează
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
aplică testul de confirmare (pct. 6.7). 6.7 Testul de confirmare Conform indicațiilor date la pct. 6.6.2, testul de confirmare se aplică pe un număr potrivit de colonii (de exemplu între 3 și 5) necaracteristice, inseminându-le în eprubete cu bulion lactozat cu bilă și verde strălucitor (pct. 5.2) cu ajutorul unei anse cu buclă (pct. 4.1.6). Se incubează eprubetele la 30 ± 1șC timp de 24 ± 2 ore. Coloniile care produc gaz în clopotele Durham vor fi
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
se aplică pe un număr potrivit de colonii (de exemplu între 3 și 5) necaracteristice, inseminându-le în eprubete cu bulion lactozat cu bilă și verde strălucitor (pct. 5.2) cu ajutorul unei anse cu buclă (pct. 4.1.6). Se incubează eprubetele la 30 ± 1șC timp de 24 ± 2 ore. Coloniile care produc gaz în clopotele Durham vor fi considerate coliformi. 7. Calculul și exprimarea rezultatelor 7.1 Se vor reține pentru numărare (vezi pct. 7.4) plăcile cu cel mult 150
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
1 - triclor-etan sau tetraclor-etan 40 ml Acid acetic glacial 6 ml Atenție! Tetraclor-etanul fiind toxic, manipulările trebuie să se facă sub o hotă de aspirație. Mod de preparare Se amestecă etanolul și 1,1,1 - triclor-etanul sau tetraclor-etanul într-o eprubetă și se încălzesc într-o baie de apă la 60-70o C. Se adaugă albastrul de metilen, se amestecă cu grijă, se răcește în frigider la 4o C timp de 12 până la 24 de ore, apoi se adaugă acidul acetic glacial
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
cu grijă, se răcește în frigider la 4o C timp de 12 până la 24 de ore, apoi se adaugă acidul acetic glacial. Se filtrează cu un filtru de porozitate maximă de 10-12 microni și se păstrează soluția colorantă într-o eprubetă etanșă. În caz de formare a particulelor de sedimente, se filtrează din nou înainte de utilizare. 5. Aparatură și sticlărie de laborator 5.1. Microscop care mărește de 500 până la 1000 de ori. 5.2. Microseringă care permite repartizarea cantităților de
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
se aplică inventarierile. Etalonarea aparatului se efectuează urmându-se instrucțiunile producătorului, utilizându-se eșantioane al căror conținut de celule a fost determinat prin metoda microscopică (lit. A). 5.2. Baia de apă, cu circulație, reglabilă la 40 ± 1oC. 5.3. Eprubetă, cu capac potrivit, de aproximativ 15 ml. 6. Eșantionul de lapte 6.1 Eșantionul trebuie păstrat într-o eprubetă (pct. 5.3), la temperatură joasă. Dacă eșantionul nu conține conservant chimic, inventarierea nu trebuie efectuată în timpul primelor 24 de ore
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
a fost determinat prin metoda microscopică (lit. A). 5.2. Baia de apă, cu circulație, reglabilă la 40 ± 1oC. 5.3. Eprubetă, cu capac potrivit, de aproximativ 15 ml. 6. Eșantionul de lapte 6.1 Eșantionul trebuie păstrat într-o eprubetă (pct. 5.3), la temperatură joasă. Dacă eșantionul nu conține conservant chimic, inventarierea nu trebuie efectuată în timpul primelor 24 de ore de după muls, dat fiind faptul că conținutul de germeni ar fi prea scăzut. Temperatura de conservare nu trebuie să
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Aparatură și sticlărie de laborator Material obișnuit de laborator și, mai ales: 4.1. Aparatură 4.1.1. Etuvă reglabilă la 64 ± 1°C. 4.1.2. Baie de apă reglabilă la 64 ± 1°C. 4.1.3. Stativ pentru eprubete sau fiole. 4.1.4. Seringi de unică folosință permițând prelevarea și repartizarea a 0,1 ml. 4.1.5. Pensă. 4.1.6. Cuptor cu aer cald reglabil la 170-175°C. 4.1.7. Autoclavă reglabilă la 121 ± 1
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Flacoane cu o capacitate de 250 ml. 4.2.4. Pipete (astupate cu vată) din sticlă sau din material sintetic steril, cu capacitate nominală de 1 ml și de 10 ml. 4.2.5. Spatule de sticlă 4.2.6. Eprubete sau fiole cu capac sau dop și un diametru interior de aproximativ 8 mm. 4.2.7. Sterilizarea sticlăriei de laborator Sticlăria trebuie sterilizată cu ajutorul uneia dintre următoarele metode: a) în cuptorul cu aer cald, la o temperatură de 170-175
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Se dizolvă componentele în apă. Se fierbe, amestecându-se din când în când. Se reglează pH-ul în așa fel încât, după sterilizare, acesta să fie 7,4 ± 0,1 la 25°C. Se repartizează câte 10 ml în fiecare eprubetă sau câte 100 ml în flacoane și se înclină până se obține o pantă. Se sterilizează la 121°C timp de 15 minute. 5.1.2. Mediu de geloză Compoziție Clorură de sodiu 2 g Geloză 15 g Apă 1
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
pe geloză nutritivă înclinată (pct. 5.1.1). Gelatina înclinată este inseminată în striuri cu ajutorul unei anse îmbibate cu tulpina de probă apoi este incubată în aerobioză timp de 48 de ore la 63 ± 1oC. După incubare, se închide ermetic eprubeta cu ajutorul unui dop de cauciuc steril. Cultura de rezervă astfel obținută poate fi conservată mai multe luni în frigider, la 5oC. 5.5 Cultura de probă (suspensie de spori) 5.5.1. Se varsă aseptic 20 ml de geloză nutritivă
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
1.1) pe o cutie Petri sterilă (pct. 4.2.2) și se lasă să se răcească la temperatura ambiantă. 5.5.2. Cu ajutorul unei pipete sterile (pct. 4.2.4), se transferă 5 ml de apă distilată sterilă în eprubeta cu cultura de rezervă (pct. 5.4.2) și se recuperează prin spălare sporii de pe gelatina înclinată, cu ajutorul unei anse sterile. Suspensia de spori se conservă la 5oC și se folosește în următoarele 36 de ore. 5.5.3. Cu ajutorul
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
1oC timp de 16-18 ore. Suspensia de spori trebuie să fie uniform de tulbure și, dacă nu conține fulgi sau un sediment, trebuie înlocuită cu o nouă suspensie, preparată din cultura de rezervă (pct. 5.4.2). 5.6. Pregătirea eprubetelor 5.6.1. Se topește mediul gelatinat (pct. 5.1.2) apoi se răcește la 55oC. 5.6.2. Se amestecă o parte din suspensia de spori proaspeți (pct. 5.5.4) cu cinci părți de mediu gelatinat (pct. 5
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
topește mediul gelatinat (pct. 5.1.2) apoi se răcește la 55oC. 5.6.2. Se amestecă o parte din suspensia de spori proaspeți (pct. 5.5.4) cu cinci părți de mediu gelatinat (pct. 5.6.1) într-o eprubetă sau într-un flacon; se amestecă cu grijă. 5.6.3. Se transferă într-o eprubetă sau într-o fiolă sterilă (pct. 5.6.2) 0,3 ml de mediu inseminat (pct. 4.2.6) calculat pentru a obține un
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
amestecă o parte din suspensia de spori proaspeți (pct. 5.5.4) cu cinci părți de mediu gelatinat (pct. 5.6.1) într-o eprubetă sau într-un flacon; se amestecă cu grijă. 5.6.3. Se transferă într-o eprubetă sau într-o fiolă sterilă (pct. 5.6.2) 0,3 ml de mediu inseminat (pct. 4.2.6) calculat pentru a obține un strat uniform, cu o grosime de 5 mm, apoi se închide eprubeta cu un dop sau
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Se transferă într-o eprubetă sau într-o fiolă sterilă (pct. 5.6.2) 0,3 ml de mediu inseminat (pct. 4.2.6) calculat pentru a obține un strat uniform, cu o grosime de 5 mm, apoi se închide eprubeta cu un dop sau un capac și, pentru fiolă, se închide extremitatea la flacără. Se lasă să se solidifice mediul gelatinat, apoi eprubetele se țin în poziție verticală timp de cel puțin 12 ore. 5.6.4. Eprubetele pot fi
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
6) calculat pentru a obține un strat uniform, cu o grosime de 5 mm, apoi se închide eprubeta cu un dop sau un capac și, pentru fiolă, se închide extremitatea la flacără. Se lasă să se solidifice mediul gelatinat, apoi eprubetele se țin în poziție verticală timp de cel puțin 12 ore. 5.6.4. Eprubetele pot fi folosite în aceeași zi sau se pot păstra timp de mai multe luni, la 0-6oC, cu condiția să fie răcite imediat după preparare
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]