941 matches
-
adaugă 190 μl de extract de eșantion în cel puțin două godeuri. De asemenea, se adaugă eșantioane de control pozitiv și negativ în două godeuri pe fiecare placă. Se incubează timp de șaisprezece ore la 4 °C. (3) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (4) Se prepară o diluție corespunzătoare de anticorpi monoclonali specifici R. solanacearum în PBS (apendicele 4) conținând, de asemenea, 0,5 % seralbumină bovină (BSA) și se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (4) Se prepară o diluție corespunzătoare de anticorpi monoclonali specifici R. solanacearum în PBS (apendicele 4) conținând, de asemenea, 0,5 % seralbumină bovină (BSA) și se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (5) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (6) Se prepară o diluție corespunzătoare de imunoglobuline antișoarece conjugate cu fosfatază alcalină în PBS. Se adaugă 190 μl în fiecare godeu
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
prepară o diluție corespunzătoare de anticorpi monoclonali specifici R. solanacearum în PBS (apendicele 4) conținând, de asemenea, 0,5 % seralbumină bovină (BSA) și se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (5) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (6) Se prepară o diluție corespunzătoare de imunoglobuline antișoarece conjugate cu fosfatază alcalină în PBS. Se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (7) Se spală godeurile
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (5) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (6) Se prepară o diluție corespunzătoare de imunoglobuline antișoarece conjugate cu fosfatază alcalină în PBS. Se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (7) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (8) Se prepară o soluție de substrat al fosfatazei alcaline conținând 1 mg de p-nitrofenil fosfat pe ml de substanță tamponată (apendicele
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (6) Se prepară o diluție corespunzătoare de imunoglobuline antișoarece conjugate cu fosfatază alcalină în PBS. Se adaugă 190 μl în fiecare godeu. Se incubează două ore la 37 °C. (7) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (8) Se prepară o soluție de substrat al fosfatazei alcaline conținând 1 mg de p-nitrofenil fosfat pe ml de substanță tamponată (apendicele 4). Se adaugă 200 μl în fiecare godeu. Se incubează în
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
7) Se spală godeurile de trei ori cu PBS-Tween (apendicele 4). (8) Se prepară o soluție de substrat al fosfatazei alcaline conținând 1 mg de p-nitrofenil fosfat pe ml de substanță tamponată (apendicele 4). Se adaugă 200 μl în fiecare godeu. Se incubează în întuneric la temperatura ambiantă și se măsoară absorbanța la 40 nm la intervale regulate în termen de 90 de minute. Interpretarea rezultatelor testelor ELISA Testul ELISA este negativ atunci când densitatea optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
în fiecare godeu. Se incubează în întuneric la temperatura ambiantă și se măsoară absorbanța la 40 nm la intervale regulate în termen de 90 de minute. Interpretarea rezultatelor testelor ELISA Testul ELISA este negativ atunci când densitatea optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu este mai mică decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca densitatea optică a controlului pozitiv să fie întotdeauna mai mare decât 1,0 (după 90 de minute de incubare cu substratul) și mai mare
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
se măsoară absorbanța la 40 nm la intervale regulate în termen de 90 de minute. Interpretarea rezultatelor testelor ELISA Testul ELISA este negativ atunci când densitatea optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu este mai mică decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca densitatea optică a controlului pozitiv să fie întotdeauna mai mare decât 1,0 (după 90 de minute de incubare cu substratul) și mai mare decât DO dublă obținută pentru extractele de eșantioane de control negativ
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
să fie întotdeauna mai mare decât 1,0 (după 90 de minute de incubare cu substratul) și mai mare decât DO dublă obținută pentru extractele de eșantioane de control negativ. Testul ELISA este pozitiv atunci când densitatea optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu este mai mare decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca DO pentru toate godeurile eșantioanelor de control negativ să fie mai mică decât de două ori DO obținută pentru godeurile eșantioanelor de control pozitiv
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
minute de incubare cu substratul) și mai mare decât DO dublă obținută pentru extractele de eșantioane de control negativ. Testul ELISA este pozitiv atunci când densitatea optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu este mai mare decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca DO pentru toate godeurile eșantioanelor de control negativ să fie mai mică decât de două ori DO obținută pentru godeurile eșantioanelor de control pozitiv. O lectură negativă ELISA în godeurile eșantioanelor de control pozitiv indică
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
DO dublă obținută pentru extractele de eșantioane de control negativ. Testul ELISA este pozitiv atunci când densitatea optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu este mai mare decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca DO pentru toate godeurile eșantioanelor de control negativ să fie mai mică decât de două ori DO obținută pentru godeurile eșantioanelor de control pozitiv. O lectură negativă ELISA în godeurile eșantioanelor de control pozitiv indică faptul că testul nu a fost efectuat corect sau
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
optică (DO) medie a godeurilor eșantionului dublu este mai mare decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca DO pentru toate godeurile eșantioanelor de control negativ să fie mai mică decât de două ori DO obținută pentru godeurile eșantioanelor de control pozitiv. O lectură negativă ELISA în godeurile eșantioanelor de control pozitiv indică faptul că testul nu a fost efectuat corect sau că a fost inhibat. O lectură ELISA pozitivă în godeurile eșantioanelor de control negativ indică o
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
decât densitatea optică dublă a godeurilor controlului negativ, cu condiția ca DO pentru toate godeurile eșantioanelor de control negativ să fie mai mică decât de două ori DO obținută pentru godeurile eșantioanelor de control pozitiv. O lectură negativă ELISA în godeurile eșantioanelor de control pozitiv indică faptul că testul nu a fost efectuat corect sau că a fost inhibat. O lectură ELISA pozitivă în godeurile eșantioanelor de control negativ indică o contaminare încrucișată sau o legătură de anticorpi nespecifică. 9. Testul
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
de două ori DO obținută pentru godeurile eșantioanelor de control pozitiv. O lectură negativă ELISA în godeurile eșantioanelor de control pozitiv indică faptul că testul nu a fost efectuat corect sau că a fost inhibat. O lectură ELISA pozitivă în godeurile eșantioanelor de control negativ indică o contaminare încrucișată sau o legătură de anticorpi nespecifică. 9. Testul biologic Notă: Testele preliminare efectuate în conformitate cu această metodă trebuie să permită o detectare reproductibilă a 103-104 celule formând colonii de R. solanacearum per ml
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
apendicele 2. Testul poate fi realizat inoculând prin injectarea profundă a mediilor cu culturi pure de izolat de R. solanacearum și prin incubare la 28 °C. În cazul în care mediile sunt repartizate pe plăci de cultură cu 96 de godeuri sterile (200 μl/godeu), se poate observa o modificare a culorii, în 72 ore, din verde oliv în galben, ceea ce indică un rezultat pozitiv al testului. Biovar 1 2 3 4 5 Utilizarea: Maltozei - + + - + Lactozei - + + - + D (+) Celobiozei - + + - + Manitolului - - + + + Sorbitolului - - + + - Dulcitolului
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
fi realizat inoculând prin injectarea profundă a mediilor cu culturi pure de izolat de R. solanacearum și prin incubare la 28 °C. În cazul în care mediile sunt repartizate pe plăci de cultură cu 96 de godeuri sterile (200 μl/godeu), se poate observa o modificare a culorii, în 72 ore, din verde oliv în galben, ceea ce indică un rezultat pozitiv al testului. Biovar 1 2 3 4 5 Utilizarea: Maltozei - + + - + Lactozei - + + - + D (+) Celobiozei - + + - + Manitolului - - + + + Sorbitolului - - + + - Dulcitolului - - + + - Teste suplimentare diferențiază biovarul
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
Se calculează numărul mediu de celule fluorescente tipice pe câmp (c). 2. Se calculează numărul de celule fluorescente tipice pe fereastră de lamă de microscop (C). C = c x S/s unde S = suprafața (S) a ferestrei lamei cu multe godeuri și s = suprafața (s) a câmpului obiectivului s = πi2/4G2K2 unde i = coeficientul de câmp (depinde de tipul ocularului și variază de la 8 la 24) K = coeficientul tubului (1 sau 1,25) G = grosisment (de 100 de ori, 40 de
32006L0063-ro () [Corola-website/Law/295071_a_296400]
-
2-cloroetanol, pentru fabricarea tioplastelor lichide de la subpoziția 4002 99 90 (a) 6 500 tone 0 1.1-31.12 09.2955 ex 2932 19 00 60 Flurtamon (ISO) 300 tone 0 1.1-31.12 09.2957 ex 8507 90 98 10 Godeu cilindric din oțel nealiat pentru acumulator, ambutisat, post-nichelat, cu un diametru exterior de cel puțin 13 mm, dar de cel mult 17 mm și cu o înălțime de cel puțin 27 mm, dar cel mult 70 mm 70 000 000
32004R0226-ro () [Corola-website/Law/292788_a_294117]
-
test se recomandă o suspensie de 1% (valoarea hematocritului) în tampon fosfat salin. 3. Se recomandă sușa Ulster 2C a virusului maladiei de Newcastle ca antigen standard. Metoda (a) Se distribuie 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu al unei microplăci de plastic (se utilizează forme în V). (b) Se toarnă 0,025 ml de suspensie de virus (adică lichid alantoidian) în primul godeu. (c) Se folosește un microdiluator sau se realizează diluții binare de la 1:2 la
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
standard. Metoda (a) Se distribuie 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu al unei microplăci de plastic (se utilizează forme în V). (b) Se toarnă 0,025 ml de suspensie de virus (adică lichid alantoidian) în primul godeu. (c) Se folosește un microdiluator sau se realizează diluții binare de la 1:2 la 1:4096 din godeu în godeu. (d) Se adaugă 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu. (e) Se adaugă 0,025 ml hematii
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
de plastic (se utilizează forme în V). (b) Se toarnă 0,025 ml de suspensie de virus (adică lichid alantoidian) în primul godeu. (c) Se folosește un microdiluator sau se realizează diluții binare de la 1:2 la 1:4096 din godeu în godeu. (d) Se adaugă 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu. (e) Se adaugă 0,025 ml hematii la 1% în fiecare godeu. (f) Se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la 4°C.
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
se utilizează forme în V). (b) Se toarnă 0,025 ml de suspensie de virus (adică lichid alantoidian) în primul godeu. (c) Se folosește un microdiluator sau se realizează diluții binare de la 1:2 la 1:4096 din godeu în godeu. (d) Se adaugă 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu. (e) Se adaugă 0,025 ml hematii la 1% în fiecare godeu. (f) Se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la 4°C. (g) Se
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
de virus (adică lichid alantoidian) în primul godeu. (c) Se folosește un microdiluator sau se realizează diluții binare de la 1:2 la 1:4096 din godeu în godeu. (d) Se adaugă 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu. (e) Se adaugă 0,025 ml hematii la 1% în fiecare godeu. (f) Se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la 4°C. (g) Se citesc plăcile după 30-40 de minute, când se încheie sedimentarea martorilor. Se citesc
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
microdiluator sau se realizează diluții binare de la 1:2 la 1:4096 din godeu în godeu. (d) Se adaugă 0,025 ml de tampon fosfat salin în fiecare godeu. (e) Se adaugă 0,025 ml hematii la 1% în fiecare godeu. (f) Se amestecă agitând ușor și se lasă în repaus la 4°C. (g) Se citesc plăcile după 30-40 de minute, când se încheie sedimentarea martorilor. Se citesc înclinând placa pentru a observa prezența sau absența unui flux de hematii
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]
-
ușor și se lasă în repaus la 4°C. (g) Se citesc plăcile după 30-40 de minute, când se încheie sedimentarea martorilor. Se citesc înclinând placa pentru a observa prezența sau absența unui flux de hematii în formă de lacrimă. Godeurile în care nu se produce hemaglutinare ar trebui să se scurgă în același ritm cu celulele martori fără virus. (h) Titrul hemaglutinant corespunde celei mai mari diluții care duce la aglutinarea hematiilor. Se poate considera că această diluție conține o
jrc1935as1992 by Guvernul României () [Corola-website/Law/87085_a_87872]