90,085 matches
-
Pentru determinarea modificărilor fenotipice in vitro induse de substanțele chimice asociate cu transformări maligne in vivo, se folosesc sisteme de cultură de celule de mamifere. Cele mai des utilizate celule sunt C3H10T1/2, 3T3, SHE și celule de la șobolani Fisher. Testele urmăresc modificările în morfologia celulară, formarea de focare sau modificări în dependența de ancorare pe agar-agar semisolid. Există sisteme folosite mai rar care depistează alte modificări celulare morfologice sau fiziologice în urma expunerii la substanțe chimice cancerigene. Nici unul din mecanismele testate
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
toxicologică, dar nu poate fi folosită pentru a calcula frecvența transformărilor în toate testele, deoarece unele dintre acestea pot necesita incubare prelungită și/sau recultivare. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Celule În funcție de testul de transformare folosit, sunt disponibile diferite linii celulare sau celule primare. Cercetătorul trebuie să se asigure că celulele folosite în cadrul testului manifestă modificări fenotipice corespunzătoare după expunerea la un agent cancerigen cunoscut și că testul efectuat are o validitate și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
prelungită și/sau recultivare. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei de testare Pregătire Celule În funcție de testul de transformare folosit, sunt disponibile diferite linii celulare sau celule primare. Cercetătorul trebuie să se asigure că celulele folosite în cadrul testului manifestă modificări fenotipice corespunzătoare după expunerea la un agent cancerigen cunoscut și că testul efectuat are o validitate și o fiabilitate demonstrate și documentate. Mediu Se utilizează medii și condiții experimentale corespunzătoare testului de transformare efectuat. Substanța de testare Substanțele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
de testare Pregătire Celule În funcție de testul de transformare folosit, sunt disponibile diferite linii celulare sau celule primare. Cercetătorul trebuie să se asigure că celulele folosite în cadrul testului manifestă modificări fenotipice corespunzătoare după expunerea la un agent cancerigen cunoscut și că testul efectuat are o validitate și o fiabilitate demonstrate și documentate. Mediu Se utilizează medii și condiții experimentale corespunzătoare testului de transformare efectuat. Substanța de testare Substanțele testate pot fi preparată în mediile de cultură sau dizolvate ori suspensionate într-un
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
să se asigure că celulele folosite în cadrul testului manifestă modificări fenotipice corespunzătoare după expunerea la un agent cancerigen cunoscut și că testul efectuat are o validitate și o fiabilitate demonstrate și documentate. Mediu Se utilizează medii și condiții experimentale corespunzătoare testului de transformare efectuat. Substanța de testare Substanțele testate pot fi preparată în mediile de cultură sau dizolvate ori suspensionate într-un excipient adecvat, înainte de tratarea celulelor. Concentrația finală a excipientului în sistem nu trebuie să afecteze viabilitatea celulară, rata de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
se exprimă ca procent din nivelul de supraviețuire la probele martor, iar frecvența de transformare ca raport între numărul de celule transformate și numărul de celule supraviețuitoare. Datele se evaluează prin metode statistice corespunzătoare. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - tipul de celule folosite, numărul de culturi celulare, metoda de menținere a culturilor, - condițiile experimentale: concentrația substanței de testare, excipientul folosit, timpul de incubare, durata și frecvența tratamentului, densitatea celulară pe parcursul
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
folosit (dacă este cazul), argumentarea alegerii dozelor, - metoda folosită pentru exprimarea numărului de celule viabile și transformate, - evaluarea statistică, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B. TESTUL GENEI LETALE DOMINANTE LA ROZĂTOARE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Efectele genei letale dominante determină
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
cu substanța de testare și nu trebuie să producă efecte toxice. Pentru testarea chimică, se folosesc preparate proaspete. Condiții experimentale Calea de administrare De regulă, compusul testat trebuie administrat o singură dată. Pe baza informațiilor toxicologice se poate utiliza un test cu administrare repetată. Căile normale de administrare sunt: intubarea orală sau injectarea intraperitoneală. Se pot folosi și alte căi de administrare convenabile. Animale de experiență Se recomandă utilizarea șobolanilor sau a șoarecilor. Se folosesc animale sănătoase și mature din punct
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
și loturi martor. Numărul și sexul animalelor Se utilizează un număr corespunzător de masculi tratați, luând în considerare variația spontană a caracterelor biologice evaluate. Numărul se stabilește în funcție de sensibilitatea predeterminată a detectării și de mărimea semnificației. De exemplu, în cadrul unui test tipic, numărul masculilor din fiecare lot testat trebuie să fie suficient pentru a asigura între 30 - 50 de femele gestante în fiecare perioadă de împerechere. Martori negativi și pozitivi În general, în fiecare experiment se utilizează substanțe martor pozitive și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
rezultate acceptabile cu privire la martorii pozitivi, aceste rezultate pot fi folosite ca martori pozitivi în experimentul curent. Substanțele martor pozitiv trebuie folosite la o doză scăzută, adecvată (ex: MMS, intraperitoneal într-o doză de 10 mg/kg) pentru a demonstra sensibilitatea testului. Doze În mod normal se utilizează trei doze de tratament. Doza maximă trebuie să producă efecte toxice sau să reducă fertilitatea animalelor tratate. În anumite cazuri, este suficientă folosirea unei singure doze maxime. Test de limită Substanțele care nu sunt
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
mg/kg) pentru a demonstra sensibilitatea testului. Doze În mod normal se utilizează trei doze de tratament. Doza maximă trebuie să producă efecte toxice sau să reducă fertilitatea animalelor tratate. În anumite cazuri, este suficientă folosirea unei singure doze maxime. Test de limită Substanțele care nu sunt toxice se testează la doza de 5 g/kg în cazul unei singure administrări sau 1 g/kg /zi în cazul administrărilor repetate. Mod de operare Sunt disponibile mai multe scheme de tratament. Cea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
pot calcula în funcție de diferența dintre numărul de corpora lutea și numărul implanturilor sau urmărind reducerea numărului mediu de implanturi per uter la lotul tratat în comparație cu lotul martor. Datele se evaluează prin metode statistice adecvate. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: - specie, linie, vârsta și greutatea animalelor, numărul animalelor pe sexe folosite atât în lotul tratat cât și în lotul martor, - substanța de testare, excipientul, criterii de selecționare a dozelor testate, substanțe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
confirmarea împerecherii, - momentul sacrificării animalelor, - criteriul de inventariere a genelor letale dominante, - relația doză/răspuns, - evaluarea statistică a rezultatelor, - discutarea rezultatelor, - interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B. TESTE CITOGENETICE IN VIVO ASUPRA CELULELOR GERMINATIVE LA MAMIFERE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acest test
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
TESTE CITOGENETICE IN VIVO ASUPRA CELULELOR GERMINATIVE LA MAMIFERE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acest test de citogeneză in vivo detectează aberațiile cromozomiale structurale ale spermatogoniilor. Testul constă în analiza mitozei spermatogoniei pentru a decela tipul de aberație cromatidiană și cromozomială. Metoda utilizează preparate din mamifere care au tratate cu substanța chimică de testare administrată pe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acest test de citogeneză in vivo detectează aberațiile cromozomiale structurale ale spermatogoniilor. Testul constă în analiza mitozei spermatogoniei pentru a decela tipul de aberație cromatidiană și cromozomială. Metoda utilizează preparate din mamifere care au tratate cu substanța chimică de testare administrată pe căi specifice și sacrificate la diferite intervale de timp. Animalele sunt
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
cel puțin 5 masculi per lot. Martori negativi și pozitivi În toate experimentele se folosesc martori pozitivi și negativi. Substanțele martor pozitiv se folosesc în doză mică (ex. mitomicină C intraperitoneal, până la 0,3 mg/kg) pentru a demonstra sensibilitatea testului. Doze Se folosește o singură doză pentru substanța de testare, doza maximă tolerată sau cea care produce unele efecte citotoxice. Dacă această doză induce moartea unui număr mare de celule, se folosește o altă doză, mai slabă, care să producă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Dacă este calculat, raportul mediu între mitozele spermatogonice de la prima și a doua metafază meiotică este trecut în tabel pentru fiecare lot de experiment și lot martor. Datele se evaluează prin metode statistice corespunzătoare. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: ― specia și rasa, vârsta și greutatea masculilor, ― numărul animalelor folosite atât în lotul tratat cât și în lotul martor, ― condițiile experimentale: descrierea detaliată a tratamentului, dozele folosite, excipientul, inhibitorul de fus
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
fiecare lot, ― tipurile și numărul anomaliilor pentru fiecare animal din fiecare lot (tratat și martor), ― evaluarea statistică a rezultatelor, ― discutarea rezultatelor, ― interpretarea rezultatelor. 3.2. Evaluare și interpretare Vezi introducerea generală: partea B. 4. REFERINȚE Vezi introducerea generală: partea B. TESTUL PETEI LA ȘOARECE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acesta este un test "in vivo" pe
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
generală: partea B. TESTUL PETEI LA ȘOARECE 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Acesta este un test "in vivo" pe șoareci, în care embrionii aflați în dezvoltare sunt expuși la acțiunea unor substanțe. Celulele țintă sunt melanoblastele iar genele de interes sunt cele care controlează pigmentarea blănii. Embrionii aflați în dezvoltare sunt heterozigoți pentru unele gene care
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
manifestă prin apariția unei pete de culoare pe suprafața blănii la puii de șoareci. Se va evalua numărul petelor apărute la descendenți în urma mutațiilor, iar frecvența lor va fi comparată cu media petelor rezultată de la embrionii tratați doar cu solvent. Testul petei decelează apariția presupuselor mutații somatice ce survin în celulele fetale. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea metodei Pregătire Dacă este posibil, substanțele testate se dizolvă sau se suspensionează în soluție izotonică salină. Substanțele chimice insolubile în
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
martor. Rezultatele negative se acceptă numai după ce s-au inventariat cel puțin 300 de descendenți de la femelele tratate cu doza maximă. Martori negativi și pozitivi Lotul martor negativ este reprezentat de șoareci tratați numai cu excipient. Pentru a mări sensibilitatea testului, pot fi puse laolaltă și date istorice ale aceluiași laborator privind martorii, cu condiția să fie omogene. În cazul în care nu se detectează nici un efect mutagen al substanței de testare, pot fi folosite ca martor pozitiv rezultatele recente obținute
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
multe pete produse prin mutații somatice. Datele din loturile tratate și loturile martor negativ se compară printr-o metodă corespunzătoare. De asemenea, datele sunt prezentate în raport cu numărul total de pui rezultați la o fătare. 3. RAPORT 3.1. Protocol de test Protocolul trebuie să conțină, dacă este posibil, informațiile următoare: ― liniile folosite la împerechere, ― numărul femelelor gestante din loturile de experiment și loturile martor, ― media numărului de pui dintr-o serie, la loturile de experiment și loturile martor, la naștere și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
Vezi introducerea generală: partea B. APARIȚIA TRANSLOCAȚIILOR EREDITARE LA ȘOARECI 1. METODĂ 1.1. Introducere Vezi introducerea generală: partea B. 1.2. Definiție Vezi introducerea generală: partea B. 1.3. Substanțe de referință Nici una. 1.4. Principiul metodei de testare Testul apariției translocației ereditare la șoareci decelează modificările cromozomiale structurale și numerice ale celulelor germinale la mamifere, apărute la prima generație (F1). Modificările cromozomiale detectate sunt translocații reciproce, iar dacă în experiment sunt incluse și femele din generația F1, la acestea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
masculi, fie la masculi F1, fie la descendenți masculi ai unei femele F1. Femelele XO sunt identificate citogenetic prin prezența a doar 39 de cromozomi în mitozele celulare din măduva osoasă. 1.5. Criterii de calitate Nici unul. 1.6. Descrierea testului Pregătire Substanțele de testare se dizolvă în soluție izotonică salină. Substanțele chimice insolubile în apă se dizolvă sau se suspensionează într-un excipient corespunzător. Se utilizează soluții proaspăt preparate Excipientul nu trebuie să interfereze cu substanța de testare și nu
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]
-
opt și să fie relativ constant. Se folosesc animale mature din punct de vedere sexual. Numărul animalelor Numărul de animale necesare depinde de frecvența apariției translocațiilor spontane și de rata minimă de inducție necesară pentru un rezultat pozitiv. De obicei, testul se efectuează pe masculi din prima generație (F1). Trebuie testați cel puțin 500 de masculi F1 pe lot. Dacă experimentul include și femele F1, sunt necesari 300 de masculi și 300 de femele. Martori negativi și pozitivi Ca martori se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/86466_a_87253]