1,292 matches
-
incubează la 37 șC timp de 48 până la 72 de ore. La sfârșitul perioadei de incubație, se numără coloniile derivate prin reversie pe cutie. Pentru metoda de preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă și o cantitate adecvată de amestec de activare de enzime hepatice sau aceeași cantitate de soluție tampon, înainte de adăugarea a 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Restul modului de operare este identic cu cel folosit
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
preincubare, se incubează în prealabil un amestec conținând substanța de testare, 0,1 mililitri de cultură bacteriană proaspătă și o cantitate adecvată de amestec de activare de enzime hepatice sau aceeași cantitate de soluție tampon, înainte de adăugarea a 2,0 mililitri de agar-agar de acoperire. Restul modului de operare este identic cu cel folosit pentru metoda de incorporare directă pe cutie. Toate cutiile pentru cele două metode se pregătesc cel puțin în trei exemplare. 2. DATE Se indică numărul de colonii
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
g NaHCO3 (bicarbonat de sodiu): se dizolvă în apă, se completează la un litru. 2,59 g KCl (clorură de potasiu): se dizolvă în apă, se completează la un litru. 0,23 g Apă de diluare reconstituită Se amestecă 25 mililitri din fiecare din cele patru soluții mamă și se completează la un litru cu apă. Se aerează până la saturarea cu oxigen dizolvat. PH-ul trebuie să fie de 7,9 ± 0,3. Dacă este necesar, se ajustează cu NaOH (hidroxid
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
cel puțin 24 de ore; - număr de organisme: cel puțin 20 de organisme pentru fiecare concentrație de test, repartizate, de preferință în 4 loturi de 5 sau în 2 loturi de 10; - încărcătură biologică: se furnizează un minim de 2 mililitri de soluție de testare pentru fiecare organism; - concentrația de test: soluția de testare se pregătește imediat după introducerea dafniilor, de preferință fără a folosi alți solvenți decât apa. În același timp cu martorul, se supun testelor concentrații care formează o
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
g NaHCO3 (bicarbonat de sodiu): se dizolvă în apă până se obține un litru. 2,59 g KCl (clorură de potasiu): se dizolvă în apă până se obține un litru. 0,23 g Apă de diluare reconstituită Se amestecă 25 mililitri din fiecare din cele patru soluții mamă și se diluează până se obține un litru. Se aerează până la saturarea cu oxigen dizolvat. PH-ul trebuie să fie de 7,9 ± 0,3. Dacă este necesar, se ajustează cu NaOH (hidroxid
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
pentru o serie de teste, iar apa se controlează în prealabil prin analiza COD. Dacă este necesar, apa poate fi purificată prin iradiere UV sau prin alte metode. 1.6.1.2. Soluție nutritivă Soluția nutritivă conține pe litru 1 mililitru din fiecare din soluțiile (a) - (f) enumerate mai jos în apă (1.6.1.1.) (inițialele PA semnifică "de cantitate analitică recunoscută"). (a) KH2PO4 dihidrogenfosfat de potasiu: PA 8,50 g K2HPO4 monohidrogenfosfat de potasiu: PA 21,75 g Na2HPO4
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
completează la 1 000 ml cu ajutorul apei (1.6.1.1.) Soluția se filtrează pe membrană steriă de 0,2 micrometri. În locul soluției 1.6.1.2. (f), se pot folosi 15 mg de extract de drojdie dizolvat în 100 mililitri de apă (1.6.1.1.). PA 5,0 mg 1.6.1.3. Substanțe de referință Anilină proaspăt distilată, acetat de sodiu, benzoat de sodiu. 1.6.1.4. Soluție de clorură mercurică 1 % de HgCl2 în apă (1
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
secundar Este preferabil să se aleagă un efluent secundar de bună calitate, provenind dintr-o instalație care tratează în special apele menajere. Acest efluent se aerează de la prelevare până la utilizare. Se filtrează printr-un filtru obișnuit, îndepărtându-se primii 200 mililitri. Filtratul, bine aerat, se folosește în aceeași zi. 1.6.3.2. Inocul pe bază de pământ Se pun în suspensie 100 grame de pământ (fertil, nesteril) în 1 000 de mililitri de apă potabilă fără clor (nu se pot
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
printr-un filtru obișnuit, îndepărtându-se primii 200 mililitri. Filtratul, bine aerat, se folosește în aceeași zi. 1.6.3.2. Inocul pe bază de pământ Se pun în suspensie 100 grame de pământ (fertil, nesteril) în 1 000 de mililitri de apă potabilă fără clor (nu se pot folosi solurile cu un conținut mare de argilă, nisip sau carbon organic). După agitare, se lasă suspensia fără agitare timp de 30 de minute. Se filtrează supernatantul prin hârtie de filtru obișnuită
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
clor (nu se pot folosi solurile cu un conținut mare de argilă, nisip sau carbon organic). După agitare, se lasă suspensia fără agitare timp de 30 de minute. Se filtrează supernatantul prin hârtie de filtru obișnuită, îndepărtându-se primii 200 mililitri. Filtratul se aerează imediat și aerarea continuă până la utilizare; se folosește în aceeași zi. 1.6.3.3 Inocul pe bază de apă de suprafață Se filtrează o probă de apă de suprafață prin hârtie de filtru obișnuită, îndepărtându-se
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
aerează imediat și aerarea continuă până la utilizare; se folosește în aceeași zi. 1.6.3.3 Inocul pe bază de apă de suprafață Se filtrează o probă de apă de suprafață prin hârtie de filtru obișnuită, îndepărtându-se primii 200 mililitri. Filtratul, bine aerat, se folosește în aceeași zi. 1.6.3.3. Inocul mixt Se amestecă cu grijă volume egale din 3 tipuri de eșantioane de inoculi definiți anterior, astfel încât să se obțină inoculul final. Validitatea inocululului se verifică cu ajutorul
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
40 de miligrame de COD pe litru. Substanța de referință (1.6.1.3.) este testată la concentrația inițială care corespunde la 20 miligrame COD pe litru. În fiecare din cele două recipiente (1.6.2.2.), se varsă 900 mililitri de mediu nutritiv astfel preparat și se însămânțează cu 0,5 mililitri de inocul (1.6.3.). Se acoperă recipientele (de exemplu) cu o folie de aluminiu, evitând perturbarea schimburilor de gaze între recipient și atmosfera înconjurătoare (bumbacul nu poate
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
1.3.) este testată la concentrația inițială care corespunde la 20 miligrame COD pe litru. În fiecare din cele două recipiente (1.6.2.2.), se varsă 900 mililitri de mediu nutritiv astfel preparat și se însămânțează cu 0,5 mililitri de inocul (1.6.3.). Se acoperă recipientele (de exemplu) cu o folie de aluminiu, evitând perturbarea schimburilor de gaze între recipient și atmosfera înconjurătoare (bumbacul nu poate fi folosit datorită analizei COD-ului). Se pun apoi recipientele pe agitatorul
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
1.1.). Înainte de fiecare prelevare, se agită cu grijă mediul, iar substanțele care aderă la pereții recipientului se dizolvă sau se pun în suspensie. Se analizează în aceeași zi probele filtrate sau centrifugate; în caz contrar, se adaugă 0,05 mililitri din soluția de HgCl2 (1.6.1.4.) pentru 10 mililitri de mediu sau se conservă bine la 2 - 4 șC până la 24 de ore sau la peste 18 șC pentru perioade mai lungi. Dacă se atinge o valoare maximă
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
substanțele care aderă la pereții recipientului se dizolvă sau se pun în suspensie. Se analizează în aceeași zi probele filtrate sau centrifugate; în caz contrar, se adaugă 0,05 mililitri din soluția de HgCl2 (1.6.1.4.) pentru 10 mililitri de mediu sau se conservă bine la 2 - 4 șC până la 24 de ore sau la peste 18 șC pentru perioade mai lungi. Dacă se atinge o valoare maximă înainte de a douăzeci și opta zi, testul poate fi considerat terminat
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
pentru o inoculare identică. Proba prelevată (cca. 30 ml) se centrifughează imediat sau se filtrează pe membrană cu ajutorul dispozitivului de filtrare (1.6.2.3.), folosindu-se membrane filtrante tratate conform dispozițiilor pct. 1.6.2.4. Se îndepărtează primii mililitri de filtrat. Concentrația de COD a filtratului restant (cca. 10 ml) se determină în două reprize cu ajutorul analizorului de carbon (1.6.2.5). Dacă filtratul nu poate fi analizat în aceeași zi, se conservă conform dispozițiilor pct. 1.6
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
MgSO4 x 7H2O (sulfat de mangan heptahidrat): PA 0,050 g CaCl2 x 2H2O (clorură de calciu dihidrat): PA 0,050 g Extract de drojdie: PA 0,005 g pH-ul este de 7,5 ± 0,1. Se adaugă 1 mililitru din soluția de oligoelemente cu compoziția de mai jos: FeSO4 x 7H2O [sulfat de fier (II) heptahidrat]: PA 0,100 g MnSO4 x H2O [sulfat de mangan (II) monohidrat]: PA 0,100 g K2MoO4 (molibdat de potasiu): PA 0,025
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
1.6.2. Aparatură Material obișnuit de laborator și: - aparat pentru măsurarea carbonului organic; - spectrofotometru; - centrifugă (4 000 g); - dispozitiv de agitare care permite o aerare și o agitare suficiente; - aparatură pentru măsurarea oxigenului dizolvat, pH-metru, fiole conice de 500 mililitri cu deschidere largă, sterile; - aparatură pentru filtrare sterilă (membrană cu o porozitate de 0,22 μm). Sticlăria trebuie curățată cu grijă pentru a elimina orice urmă de materii organice sau toxice. 1.6.3. Pregătirea inoculării Se prelevează un volum
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
dintr-un amestec de trei probe de apă de suprafață poluată și de efluenți de la ieșirea din stațiile de epurare urbane, fără poluare specifică semnificativă. Conținutul de bacterii al fiecărei probe trebuie să fie de cel puțin 105 bacterii pe mililitru. Probele se folosesc pentru însămânțare într-un termen de 12 ore, inclusiv transportul, și nu se lasă mai mult de 6 ore fără aerare. Se filtrează prin hârtie pentru a elimina particulele insolubile cele mai mari, se adună filtratul și
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
martor steril) 150 ml de soluție 2 Fiola nr. 6 (martor acțiune inhibitoare) 150 ml de soluție 3 Fiola nr. 7 (orb) 150 ml de soluție 4 Se însămânțează fiolele 1, 2, 3, 5, 6 și 7 cu 1,5 mililitri de inocul și se amestecă bine prin agitare manuală. Se prelevează 3 până la 5 mililitri în fiecare fiolă. Se centrifughează prelevările la 4 000 grame timp de 15 minute, menținându-se o temperatură mai mică de 26 șC. Se colectează
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
de soluție 3 Fiola nr. 7 (orb) 150 ml de soluție 4 Se însămânțează fiolele 1, 2, 3, 5, 6 și 7 cu 1,5 mililitri de inocul și se amestecă bine prin agitare manuală. Se prelevează 3 până la 5 mililitri în fiecare fiolă. Se centrifughează prelevările la 4 000 grame timp de 15 minute, menținându-se o temperatură mai mică de 26 șC. Se colectează supernatantul în vederea dozării carbonului organic care corespunde timpului zero. Se așează fiolele pe agitator și
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
a CO2 - 4 flacoane de testare din sticlă colorată cu un volum de 4 până la 5 litri, pentru fiecare substanță de testare. - Dopuri, tuburi flexibile din material plastic. 1.6.2.3. Flacoane absorbante de CO2 Flacoane absorbante de 100 mililitri, având în interior hidroxid de bariu. 1.6.3. Pregătirea inoculului Organismele care se folosesc pentru teste provin din noroi activat proaspăt prelevat într-o stație de epurare municipală care funcționează normal. Această stație nu ar trebui să trateze sau
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
activat proaspăt prelevat într-o stație de epurare municipală care funcționează normal. Această stație nu ar trebui să trateze sau nu tratează decât efluenți industriali. De la aducerea în laborator, noroiul activat se aerează timp de patru ore. Se prelevează 500 mililitri de amestec și se omogenizează mecanic timp de 2 minute. Apoi, amestecul se decantează timp de 30 de minute. Dacă lichidul supranatant mai conține o cantitate importantă de particule solide după 30 de minute, se poate continua decantarea timp de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
unei dispersii bune a substanței care trebuie supusă testului. 1.6.4.2. Condiții de testare Deoarece inoculul trebuie folosit la 1 %, se efectuează diluări în mediul de testare. Modul cel mai convenabil este următorul: (a) se adaugă 2 470 mililitri de apă de înaltă calitate (vezi pct. 1.6.1.1) la fiecare din flacoanele de testare de 4 până la 5 litri; (b) se adaugă la fiecare din flacoanele de testare de 4 până la 5 litri, respectiv 3 mililitri de
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]
-
470 mililitri de apă de înaltă calitate (vezi pct. 1.6.1.1) la fiecare din flacoanele de testare de 4 până la 5 litri; (b) se adaugă la fiecare din flacoanele de testare de 4 până la 5 litri, respectiv 3 mililitri de soluție mamă de sulfat de amoniu, de sulfat de magneziu și de clorură de calciu, precum și 6 mililitri de soluție tampon fosfat și 6 mililitri de soluție de clorură ferică; (c) se adaugă 30 de mililitri de inocul provenind
jrc904as1984 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86043_a_86830]