90,085 matches
-
oprească complet creșterea. Replici și martori Proiectul de testare include trei replici la fiecare concentrație testată. Se efectuează trei teste martor fără substanță și, dacă este relevant, se realizează și trei teste martor cu substanța auxiliară. Dacă se justifică, planul testului poate fi modificat astfel încât să se mărească numărul de concentrații și să se reducă numărul de replici pe concentrație. Desfășurarea testului Culturile care conțin concentrațiile dorite ale substanței de testare și cantitatea dorită de inocul sunt preparate adăugând cantități alicote
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
fără substanță și, dacă este relevant, se realizează și trei teste martor cu substanța auxiliară. Dacă se justifică, planul testului poate fi modificat astfel încât să se mărească numărul de concentrații și să se reducă numărul de replici pe concentrație. Desfășurarea testului Culturile care conțin concentrațiile dorite ale substanței de testare și cantitatea dorită de inocul sunt preparate adăugând cantități alicote din soluțiile mamă ale substanței la cantități adecvate de preculturi de alge (vezi apendicele 1). Se agită flacoanele de cultură și
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
suspensie prin agitare, amestecare sau barbotare cu aer, pentru a îmbunătății schimbul de gaz și a reduce variația pH-ului în soluțiile testate. Culturile sunt menținute la o temperatură în intervalul 21 - 25șC ± 2șC. Densitatea celulară în fiecare flacon de test se determină la cel puțin 24, 48 și 72 de ore după începerea testului. Mediul de alge filtrat conținând concentrația adecvată de substanță de testare se folosește pentru a determina fundalul. Pentru măsurători de densitate celulară, altele decât metodele de
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
și a reduce variația pH-ului în soluțiile testate. Culturile sunt menținute la o temperatură în intervalul 21 - 25șC ± 2șC. Densitatea celulară în fiecare flacon de test se determină la cel puțin 24, 48 și 72 de ore după începerea testului. Mediul de alge filtrat conținând concentrația adecvată de substanță de testare se folosește pentru a determina fundalul. Pentru măsurători de densitate celulară, altele decât metodele de numărare directă, se utilizează un mediu de alge filtrat cu concentrația adecvată de substanță
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
adecvată de substanță de testare se folosește pentru a determina fundalul. Pentru măsurători de densitate celulară, altele decât metodele de numărare directă, se utilizează un mediu de alge filtrat cu concentrația adecvată de substanță. pH-ul se măsoară la începutul testului și la 72 de ore. pH-ul testelor martor nu variază în mod normal cu mai mult de 1,5 unități pe parcursul testului. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
a determina fundalul. Pentru măsurători de densitate celulară, altele decât metodele de numărare directă, se utilizează un mediu de alge filtrat cu concentrația adecvată de substanță. pH-ul se măsoară la începutul testului și la 72 de ore. pH-ul testelor martor nu variază în mod normal cu mai mult de 1,5 unități pe parcursul testului. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște că o substanță are tendința de evaporare, se
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
utilizează un mediu de alge filtrat cu concentrația adecvată de substanță. pH-ul se măsoară la începutul testului și la 72 de ore. pH-ul testelor martor nu variază în mod normal cu mai mult de 1,5 unități pe parcursul testului. Testarea substanțelor volatile Nu există o modalitate general acceptată de testare a substanțelor volatile. Dacă se cunoaște că o substanță are tendința de evaporare, se pot folosi flacoane de testare închise, cu spațiul liber între capac și nivelul lichidului. S-
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
spațiul liber între capac și nivelul lichidului. S-au propus variante ale acestei metode [vezi referința bibliografică (4)]. Trebuie făcute încercări pentru a determina cantitatea de substanță care rămâne în soluție și se recomandă o atenție deosebită la interpretarea rezultatelor testelor cu substanțe chimice volatile folosind sisteme închise. Test de limită Folosind modul de operare descris în această metodă, se poate efectua un test limită la 100 mg/l pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Dacă
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
au propus variante ale acestei metode [vezi referința bibliografică (4)]. Trebuie făcute încercări pentru a determina cantitatea de substanță care rămâne în soluție și se recomandă o atenție deosebită la interpretarea rezultatelor testelor cu substanțe chimice volatile folosind sisteme închise. Test de limită Folosind modul de operare descris în această metodă, se poate efectua un test limită la 100 mg/l pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Dacă natura substanței nu permite atingerea concentrației de 100
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
determina cantitatea de substanță care rămâne în soluție și se recomandă o atenție deosebită la interpretarea rezultatelor testelor cu substanțe chimice volatile folosind sisteme închise. Test de limită Folosind modul de operare descris în această metodă, se poate efectua un test limită la 100 mg/l pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Dacă natura substanței nu permite atingerea concentrației de 100 mg/l în soluția testată, testul limită se efectuează la o concentrație egală cu solubilitatea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
operare descris în această metodă, se poate efectua un test limită la 100 mg/l pentru a demonstra că CE50 este mai mare decât această concentrație. Dacă natura substanței nu permite atingerea concentrației de 100 mg/l în soluția testată, testul limită se efectuează la o concentrație egală cu solubilitatea substanței (sau concentrația maximă pentru formarea unei dispersii stabile) în mediul folosit (vezi și punctul 1.6.1.1). Testul de limită se efectuează cel puțin în trei replici, cu același
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
nu permite atingerea concentrației de 100 mg/l în soluția testată, testul limită se efectuează la o concentrație egală cu solubilitatea substanței (sau concentrația maximă pentru formarea unei dispersii stabile) în mediul folosit (vezi și punctul 1.6.1.1). Testul de limită se efectuează cel puțin în trei replici, cu același număr de teste martor. Cele două măsurători ale creșterii (biomasa și viteza de creștere) trebuie folosite pentru testul de limită. Dacă într-un test de limită se întâlnește o
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
efectuează la o concentrație egală cu solubilitatea substanței (sau concentrația maximă pentru formarea unei dispersii stabile) în mediul folosit (vezi și punctul 1.6.1.1). Testul de limită se efectuează cel puțin în trei replici, cu același număr de teste martor. Cele două măsurători ale creșterii (biomasa și viteza de creștere) trebuie folosite pentru testul de limită. Dacă într-un test de limită se întâlnește o descreștere minimă de 25% sau mai mult, atât a biomasei cât și a vitezei
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
stabile) în mediul folosit (vezi și punctul 1.6.1.1). Testul de limită se efectuează cel puțin în trei replici, cu același număr de teste martor. Cele două măsurători ale creșterii (biomasa și viteza de creștere) trebuie folosite pentru testul de limită. Dacă într-un test de limită se întâlnește o descreștere minimă de 25% sau mai mult, atât a biomasei cât și a vitezei de creștere față de testul martor, trebuie să se efectueze o testare completă. 2. DATE ȘI
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
punctul 1.6.1.1). Testul de limită se efectuează cel puțin în trei replici, cu același număr de teste martor. Cele două măsurători ale creșterii (biomasa și viteza de creștere) trebuie folosite pentru testul de limită. Dacă într-un test de limită se întâlnește o descreștere minimă de 25% sau mai mult, atât a biomasei cât și a vitezei de creștere față de testul martor, trebuie să se efectueze o testare completă. 2. DATE ȘI EVALUARE Densitatea celulară măsurată în culturile
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
măsurători ale creșterii (biomasa și viteza de creștere) trebuie folosite pentru testul de limită. Dacă într-un test de limită se întâlnește o descreștere minimă de 25% sau mai mult, atât a biomasei cât și a vitezei de creștere față de testul martor, trebuie să se efectueze o testare completă. 2. DATE ȘI EVALUARE Densitatea celulară măsurată în culturile tratate și culturile martor se înregistrează în tabel împreună cu concentrațiile substanței de testare și timpii de măsurare. Valoarea medie a densității celulare pentru
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
inhibarea între 0 și 100%. 2.1.COMPARAREA ARIILOR DINTRE CURBELE DE CREȘTERE Aria dintre curbele de creștere și linia orizontală N = N0 se poate calcula conform formulei: unde: A = aria N0 = număr de celule /ml la timpul t0 (începutul testului),0, N1 = număr de celule/ml măsurat la t1 Nn = număr de celule/ml măsurat la tn, t1 = timpul primei măsurători după începerea testului tn = timpul a n-a măsurători după începerea testului n = numărul de măsurători efectuate după începerea
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
poate calcula conform formulei: unde: A = aria N0 = număr de celule /ml la timpul t0 (începutul testului),0, N1 = număr de celule/ml măsurat la t1 Nn = număr de celule/ml măsurat la tn, t1 = timpul primei măsurători după începerea testului tn = timpul a n-a măsurători după începerea testului n = numărul de măsurători efectuate după începerea testului Procentul de inhibiție a creșterii celulare la fiecare concentrație a substanței de testare (IA) se calculează conform formulei: unde: Ac= aria dintre curba
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de celule /ml la timpul t0 (începutul testului),0, N1 = număr de celule/ml măsurat la t1 Nn = număr de celule/ml măsurat la tn, t1 = timpul primei măsurători după începerea testului tn = timpul a n-a măsurători după începerea testului n = numărul de măsurători efectuate după începerea testului Procentul de inhibiție a creșterii celulare la fiecare concentrație a substanței de testare (IA) se calculează conform formulei: unde: Ac= aria dintre curba de creștere a testului martor și linia orizontală N
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
0, N1 = număr de celule/ml măsurat la t1 Nn = număr de celule/ml măsurat la tn, t1 = timpul primei măsurători după începerea testului tn = timpul a n-a măsurători după începerea testului n = numărul de măsurători efectuate după începerea testului Procentul de inhibiție a creșterii celulare la fiecare concentrație a substanței de testare (IA) se calculează conform formulei: unde: Ac= aria dintre curba de creștere a testului martor și linia orizontală N = N0 At= aria dintre curba de creștere la
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
n-a măsurători după începerea testului n = numărul de măsurători efectuate după începerea testului Procentul de inhibiție a creșterii celulare la fiecare concentrație a substanței de testare (IA) se calculează conform formulei: unde: Ac= aria dintre curba de creștere a testului martor și linia orizontală N = N0 At= aria dintre curba de creștere la concentrația t și linia orizontală N = N0 Valorile IA sunt trasate pe hârtie semilogaritmică sau pe hârtie probit semilogaritmică față de concentrațiile corespunzătoare. Dacă se trasează pe hârtie
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
perioada corespunzătoare de expunere, de exemplu, CEb50 (0 -72 de ore). 2.2.COMPARAREA VITEZELOR DE CREȘTERE Viteza medie specifică de creștere (μ) pentru culturile cu o creștere exponențială se poate calcula după formula: unde: t0= este timpul de la începutul testului Ca metodă alternativă, viteza medie specifică de creștere se calculează din panta dreptei de regresie a diagramei lnN versus timp. Procentul de inhibiție a vitezei specifice de creștere la fiecare concentrație a substanței de testare (Iμt) se calculează cu formula
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de testare (Iμt) se calculează cu formula: unde: μc= viteza medie specifică de creștere pentru proba martor μt= viteza medie specifică de creștere pentru concentrația testată Scăderea procentuală a vitezei medii specifice de creștere la fiecare concentrație a substanței față de testul martor este trasată ca funcție de logaritmul concentrației. Valoarea CE50 se poate citi din acest grafic. Se propune să se folosească simbolul CEb50 pentru a nu denumi ambiguu valoarea CE50 derivată prin această metodă. Timpii de măsurare trebuie indicați, de exemplu
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
creștere pot duce la modificări mari ale biomasei. Prin urmare, valorile CEb și CEt nu sunt comparabile numeric. 2.3. CALCULUL VALORII NOEC NOEC se determină printr-o metodă statistică adecvată pentru compararea probelor multiple (de exemplu, analiza varianței și testul Dunnett), folosind valoarea individuală a ariei dintre curba de creștere A (vezi punctul 1.2.1) sau a vitezei specifică de creștere μ (vezi punctul 2.2) pentru fiecare replică. 3. RAPORT Protocolul de test cuprinde, dacă este posibil, următoarele
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]
-
de exemplu, analiza varianței și testul Dunnett), folosind valoarea individuală a ariei dintre curba de creștere A (vezi punctul 1.2.1) sau a vitezei specifică de creștere μ (vezi punctul 2.2) pentru fiecare replică. 3. RAPORT Protocolul de test cuprinde, dacă este posibil, următoarele informații: - substanța de testare: date de identificare chimică a substanței, - organismele de experiență: origine, cultura de laborator, numărul sușei, metodă de cultivare, - condițiile experimentale: - data de începere și de încheiere a testului, durata, - temperatură, - compoziția
by Guvernul Romaniei () [Corola-other/Law/87087_a_87874]