9,518 matches
-
din celulele somatice sunt implicate în formarea tumorilor la oameni și animalele de laborator. Testul bacterian de mutație inversă este rapid, ieftin și relativ ușor de realizat. Multe dintre sușele experimentale au câteva particularități care le fac mai sensibile pentru detectarea de mutații, inclusiv secvențe de ADN sensibile la mutații în locurile de inversare, permeabilitate celulară crescută pentru moleculele mari și eliminarea sistemelor de regenerare a ADN sau intensificarea proceselor care au tendința să inducă erori în timpul regenerării ADN. Specificitatea sușelor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
de mamifere in vivo. Testul nu furnizează, prin urmare, informații directe privind capacitatea mutagenă și cancerigenă a unei substanțe la mamifere. Testul bacterian de mutație inversă se utilizează, de obicei, pentru o primă triere a activității genotoxice, în special pentru detectarea mutației punctiforme. O bogată bază de date demonstrează că multe produse chimice care dau rezultate pozitive în prezentul test prezintă activitate mutagenă și în alte teste. Există exemple de agenți mutageni care nu se detectează prin acest test; aceste deficiențe
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
metodă se descrie modul de lucru pentru procedeul de încorporare prin depunere și pentru cel cu preincubare. Oricare dintre acestea se poate accepta pentru realizarea experimentelor, atât cu activare metabolică, cât și fără aceasta. Pentru unele substanțe, este mai eficientă detectarea prin procedeul cu preincubare. Substanțele respective aparțin unor clase chimice care includ nitrozamine alifatice cu lanț scurt, metale bivalente, aldehide, coloranți azoici și diazoderivații, alcaloizi ai pirolizidinei, compuși alchilici și nitroderivați (3). De asemenea, se admite că unele clase de
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
că unele clase de mutageni nu se detectează întotdeauna prin procedee standard, ca încorporarea prin depunere sau procedeul cu incubare. Ar trebui să se considere că acestea sunt "cazuri izolate" și se recomandă cu tărie utilizarea unor procedee alternative pentru detectarea lor. Din categoria "cazuri izolate" este posibilă identificarea (împreună cu exemple de procedeele care se pot utiliza pentru detectarea acestora) a următoarelor cazuri: coloranți azoici și compuși diazoici (3) (5) (6) (13), cei în stare gazoasă și volatili (12) (14) (15
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
cu incubare. Ar trebui să se considere că acestea sunt "cazuri izolate" și se recomandă cu tărie utilizarea unor procedee alternative pentru detectarea lor. Din categoria "cazuri izolate" este posibilă identificarea (împreună cu exemple de procedeele care se pot utiliza pentru detectarea acestora) a următoarelor cazuri: coloranți azoici și compuși diazoici (3) (5) (6) (13), cei în stare gazoasă și volatili (12) (14) (15) (16) și glicozidele (17) (18). Orice deviație de la procedura standard necesită o justificare științifică. 1.5. DESCRIEREA METODEI
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
și dau răspunsuri reproductibile. Cele patru sușe de S. typhimurium menționate posedă perechi de bază GC în primul situs de reversie și se cunoaște că acestea nu pot să detecteze anumiți agenți mutageni oxidanți, agenți de reticulare și unele hidrazine. Detectarea acestor substanțe este posibilă cu ajutorul sușelor de E. coli WP2 sau de S. typhimurium TA102 (19) care posedă o pereche de bază AT în situsul primar de reversie. Combinația de sușe recomandată este, prin urmare, următoarea: − S. typhimurium TA1535 și
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
recomandată este, prin urmare, următoarea: − S. typhimurium TA1535 și − S. typhimurium TA1537 sau TA97 sau TA97a și − S. typhimurium TA98 și − S. typhimurium TA100 și − E. coli WP2 uvrA sau E. coli WP2 uvrA (pKM101) sau S. typhimurium TA102. Pentru detectarea agenților mutageni de reticulare s-ar putea prefera includerea sușei TA102 sau adăugarea unei sușe de E. coli capabile de regenerarea ADN [de ex. E. coli WP2 sau E. coli WP2 (pKM101)]. Ar trebui să se utilizeze procedurile stabilite pentru
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
care trebuie luate în considerație la determinarea cantității maxime de substanță de testat ce urmează se utilizeze sunt citotoxicitatea și solubilitatea în amestecul final de tratare. Ar putea fi util un test preliminar pentru determinarea toxicității și caracteristicilor de solubilitate. Detectarea citotoxicității poate fi posibilă printr-o reducere a numărului de colonii care provoacă reversia, o clarificare și diminuare a fondului de bacterii sau a gradului de supraviețuire a culturilor tratate. Prezența sistemelor de activare metabolică poate să influențeze citotoxicitatea unei
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
1. METODA Prezenta metodă este reprodusă după linia directoare OCDE TG 476, Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere (1997). 1.1. INTRODUCERE Testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere se poate utiliza pentru detectarea mutațiilor genice produse de substanțele chimice. Liniile celulare corespunzătoare conțin celule de limfom de șoarece L5178Y, liniile CHO, CHO-AS52 și V79 de celule de hamster chinezesc și celule limfoblastoide umane TK6 (1). În liniile celulare menționate, efectele genetice cel mai
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
1). În liniile celulare menționate, efectele genetice cel mai frecvent măsurate sunt o mutație în pozițiile timidin kinază (TK) și hipoxantin-guanină fosforibozil transferază (HPRT), precum și o transgenă de xantin-guanină fosforibozil transferază (XPRT). Testele de mutație TK, HPRT și XPRT permit detectarea diferitelor spectre ale diferitelor fenomene genetice. Amplasarea autozomică a TK și XPRT poate să permită detectarea fenomenelor genetice (de ex. deleții importante) care nu sunt detectate în locusul HPRT la cromozomii X (2) (3) (4) (5) (6). În testul in
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
timidin kinază (TK) și hipoxantin-guanină fosforibozil transferază (HPRT), precum și o transgenă de xantin-guanină fosforibozil transferază (XPRT). Testele de mutație TK, HPRT și XPRT permit detectarea diferitelor spectre ale diferitelor fenomene genetice. Amplasarea autozomică a TK și XPRT poate să permită detectarea fenomenelor genetice (de ex. deleții importante) care nu sunt detectate în locusul HPRT la cromozomii X (2) (3) (4) (5) (6). În testul in vitro de mutație genică pe celule de mamifere, se pot utiliza culturi de linii celulare stabilite
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
multor maladii genetice umane. Prezentul test determină fenomenele cromozomiale din celulele germinale spermatogoniale și, prin urmare, ar trebui să permită estimarea mutațiilor transmisibile produse în celulele germinale. Pentru test se utilizează, în general, rozătoare. Prezentul test citogenetic in vivo permite detectarea aberațiilor cromozomiale din mitozele spermatogoniale. Alte celule țintă nu fac obiectul prezentului test. Pentru detectarea aberațiilor de tip cromatidic din celulele spermatogoniale, ar trebui să se examineze prima diviziune celulară mitotică după tratament, înainte ca leziunile respective să se piardă
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
urmare, ar trebui să permită estimarea mutațiilor transmisibile produse în celulele germinale. Pentru test se utilizează, în general, rozătoare. Prezentul test citogenetic in vivo permite detectarea aberațiilor cromozomiale din mitozele spermatogoniale. Alte celule țintă nu fac obiectul prezentului test. Pentru detectarea aberațiilor de tip cromatidic din celulele spermatogoniale, ar trebui să se examineze prima diviziune celulară mitotică după tratament, înainte ca leziunile respective să se piardă în diviziunile celulare ulterioare. Prin analiza cromozomilor meiotici pentru detectarea aberațiilor de tip cromozomial în
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
fac obiectul prezentului test. Pentru detectarea aberațiilor de tip cromatidic din celulele spermatogoniale, ar trebui să se examineze prima diviziune celulară mitotică după tratament, înainte ca leziunile respective să se piardă în diviziunile celulare ulterioare. Prin analiza cromozomilor meiotici pentru detectarea aberațiilor de tip cromozomial în diakineză-metafaza I când celulele tratate se transformă în spermatocite, se pot obține informații suplimentare referitoare la celulele germinale spermatogoniale tratate. Prezentul test in vivo este destinat să verifice dacă mutagenii sunt la fel de activi în celulele
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
după tratament. Înainte de sacrificare, animalele se tratează cu o substanță de inhibare a metafazei (de ex. colchicină sau Colcemid(r)). Apoi, din celulele germinale, se realizează preparate cromozomiale care se colorează, iar celulele în metafază sunt analizate la microscop pentru detectarea aberațiilor cromozomiale. 1.4. DESCRIEREA METODEI DE TESTARE 1.4.1. Preparatele 1.4.1.1. Selectarea speciilor de animale Se utilizează, de obicei, hamsteri chinezești și șoareci de sex masculin. Cu toate acestea, se pot utiliza masculi din orice
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
să se realizeze la un interval de 24 de ore sau la un interval de timp egal cu de 1,5 ori durata ciclului celular după tratament, cu excepția cazului în care se cunoaște un alt moment corespunzător de prelevare pentru detectarea efectelor (6). În plus, se pot utiliza și alte momente de prelevare. De exemplu, pentru produsele chimice care pot produce cromozomi întârziați sau pot să aibă efecte independente de faza S, o prelevare timpurie a probelor ar putea fi adecvată
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
frecvent constă în determinarea prin autoradiografie a timidinei marcate cu tritiu (3H-TdR) care a fost încorporată. Pentru testele in vivo, USD se preferă utilizarea ficatului de șobolan. Se pot utiliza și alte țesuturi, dar acestea nu constituie obiectul prezentei metode. Detectarea unui răspuns UDS depinde de numărul de baze din ADN excizate și înlocuite la locul modificării. Prin urmare testul UDS este valoros în special pentru detectarea regenerării secvențelor lungi (20 -30 de baze) induse de substanță. Spre deosebire de acestea, pentru detectarea
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
șobolan. Se pot utiliza și alte țesuturi, dar acestea nu constituie obiectul prezentei metode. Detectarea unui răspuns UDS depinde de numărul de baze din ADN excizate și înlocuite la locul modificării. Prin urmare testul UDS este valoros în special pentru detectarea regenerării secvențelor lungi (20 -30 de baze) induse de substanță. Spre deosebire de acestea, pentru detectarea regenerării secvențelor scurte (1-3 baze) este necesară o sensibilitate mult mai mică. În plus, datorită nereparării, unei reparări eronate sau a unei replicări eronate a leziunilor
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
Detectarea unui răspuns UDS depinde de numărul de baze din ADN excizate și înlocuite la locul modificării. Prin urmare testul UDS este valoros în special pentru detectarea regenerării secvențelor lungi (20 -30 de baze) induse de substanță. Spre deosebire de acestea, pentru detectarea regenerării secvențelor scurte (1-3 baze) este necesară o sensibilitate mult mai mică. În plus, datorită nereparării, unei reparări eronate sau a unei replicări eronate a leziunilor din ADN, pot apărea fenomene mutagene. Amploarea răspunsului UDS nu oferă nici o indicație despre
jrc4583as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89749_a_90536]
-
controale pentru a se stabili dacă se respectă reglementările din acordul financiar și conținutul programului Sapard. Aceste controale le includ pe cele impuse de reglementările privind măsurile speciale în raport cu care se solicită ajutorul, dar și verificările necesare pentru prevenirea și detectarea fraudelor și neregulilor, în special în ceea ce privește riscurile apărute. În cadrul funcției de ordonanțare, cererile fac obiectul unor verificări care stabilesc dacă s-au respectat termenii și condițiile, eligibilitatea, integralitatea documentelor, corectitudinea documentelor justificative, data primirii, etc. Toate verificările care trebuie făcute
jrc4809as2000 by Guvernul României () [Corola-website/Law/89976_a_90763]
-
dintr-o inspecție extinsă la tancurile pentru transportul produselor chimice și al gazelor: - dispozitivele de monitorizare și siguranță a tancurilor de marfă cu privire la temperatură, presiune și nivel, - dispozitivele de analiză a oxigenului și explozimetrele, inclusiv calibrarea acestora. Existența echipamentului de detectare a produselor chimice (suflante) cu un număr suficient de tuburi de detectare a gazelor specifice tipului de marfă transportată; - seturi de dispozitive de evacuare a cabinei care să asigure o protecție suficientă a ochilor și a căilor respiratorii pentru fiecare
jrc5156as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90324_a_91111]
-
gazelor: - dispozitivele de monitorizare și siguranță a tancurilor de marfă cu privire la temperatură, presiune și nivel, - dispozitivele de analiză a oxigenului și explozimetrele, inclusiv calibrarea acestora. Existența echipamentului de detectare a produselor chimice (suflante) cu un număr suficient de tuburi de detectare a gazelor specifice tipului de marfă transportată; - seturi de dispozitive de evacuare a cabinei care să asigure o protecție suficientă a ochilor și a căilor respiratorii pentru fiecare persoană de la bord (dacă acest lucru este cerut de produsele enumerate în
jrc5156as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90324_a_91111]
-
18). 5. NAVE DE PASAGERI CARE NU SUNT CUPRINSE ÎN DIRECTIVA 1999/35/CE În plus față de elementele prevăzute în secțiunea 1, următoarele elemente trebuie considerate ca făcând parte dintr-o inspecție extinsă la navele de pasageri: - testarea sistemului de detectare și alarmare în caz de incendiu, - testarea închiderii corespunzătoare a ușilor antifoc, - testarea instalației de amplificare/comunicare, - un exercițiu de incendiu cu testarea, ca un minimum de cerințe, a tuturor echipamentelor individuale de stingere a incendiilor și cu participarea unei
jrc5156as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90324_a_91111]
-
anexa II și pe baza tipului de informații menționate în anexa III, fără a se aduce atingere cerințelor suplimentare prevăzute de legislația menționată; (b) autorizare explicită anterioară diseminării; (c) un plan de monitorizare în conformitate cu părțile relevante din anexa III, în vederea detectării efectelor pe care un OMG sau OMG-urile le au asupra sănătății umane sau asupra mediului; (d) într-o modalitate adecvată, cerințele legate de abordarea unor noi informații, informațiile destinate populației, informațiile privind rezultatele răspândirii de OMG-uri și schimburile
jrc5093as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90261_a_91048]
-
1. denumire științifică; 2. taxonomie; 3. alte denumiri (denumire comună, denumirea speciei etc.); 4. markere fenotipice și genetice; 5. gradul de înrudire între organismul donator și organismul gazdă sau între organismele de origine; 6. descrierea tehnicilor de identificare și de detectare; 7. sensibilitatea, fiabilitatea (în termeni cantitativi) și specificitatea tehnicilor de detectare și identificare; 8. descrierea distribuției geografice și a habitatului natural al organismului, inclusiv informații asupra prădătorilor naturali, organisme-victimă, paraziți și concurenți, simbionți și organisme gazdă; 9. organisme în cazul
jrc5093as2001 by Guvernul României () [Corola-website/Law/90261_a_91048]