11,435 matches
-
lamininei; profilul microvascularizației, relevat prin intermediul markerilor endoteliali (CD31) și de activare endotelială (VEGF, NOS); procesul de remodelare, relevat prin intermediul metaloproteinazelor matriceale (MMP2, MMP9) și a inhibitorilor specifici acestora (TIMP1); procesul apoptotic, relevat prin intermediul Bax; profilul histoarhitectonic (de distribuție) al mastocitelor - relevat prin intermediul triptazei mastocitare; profilul celular și histoarhitectonic (de distribuție) al limfocitelor T - relevate prin intermediul markerilor CD4 - limfocite T helper și CD8 - limfocite CD8 citotoxice; 7.2. MATERIAL ȘI METODĂ Investigația imunohistochimică a fost realizată pe același lot de studiu care
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
NOS); procesul de remodelare, relevat prin intermediul metaloproteinazelor matriceale (MMP2, MMP9) și a inhibitorilor specifici acestora (TIMP1); procesul apoptotic, relevat prin intermediul Bax; profilul histoarhitectonic (de distribuție) al mastocitelor - relevat prin intermediul triptazei mastocitare; profilul celular și histoarhitectonic (de distribuție) al limfocitelor T - relevate prin intermediul markerilor CD4 - limfocite T helper și CD8 - limfocite CD8 citotoxice; 7.2. MATERIAL ȘI METODĂ Investigația imunohistochimică a fost realizată pe același lot de studiu care a făcut obiectul analizei morfologice în microscopie optică, caracteristicile lotului fiind prezentate în
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
colagen decât elastină (47% versus 7%) (Shepherd, Vanhoutte, 1975). Textura și, consecutiv, rezistența la rupere este determinată de diametrul fibrelor și de capacitatea lor de a forma fascicule (Kielty et al., 1993, Parry 1988). Pentru ambele loturi, rezultatele noastre au relevat, în baza evaluării calitative și semicantitative, prezența unei cantități importante de colagen tip I, în paralel cu o cantitate redusă de colagen tip III. Nu au fost observate diferențe semnificative între cele două loturi. Marcarea imunohistochimică a permis nu numai
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
și aprecierea diferențelor de organizare: în manieră fasciculară, disecând structura musculară compactă a mediei, pentru colagenul tip I, și în manieră singulară, ca fibre izolate în matrice, fără caracterul anastomozant specific, pentru colagenul tip III. Cuantificarea semi cantitativă nu a relevat diferențe majore între segmentele recoltate, fapt care indică o afectare a ansamblului structural venos - de la crosă la perforante - în momentul în care boala varicoasă este evidentă clinic. Aceste date sunt în consens cu teoria patogenică modernă care include, ca secvență
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
edificarea membranei bazale. Datorită heterogenității, formula moleculară este, cel mai frecvent, [α1(IV)]2α2(IV); poate însă să apară și ca [α3(IV)]2α4(IV) sau [α5(IV)]2α6(IV) Perumal et al., 2008). Rezultatele noastre completează datele din literatură, relevând prezența acestui tip de colagen nefibrilar atât la nivelul intimei, cât și al tunicii medii. Dată fiind calitatea de component major al membranelor bazale, identificarea imunohistochimică a permis evaluarea continuității membranei bazale care susține endoteliul și a modului în care
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
edificiul molecular principal al membranei bazale (LeBleu et al., 2007). Considerăm astfel rezultatele noastre ca semnificative științific pentru stadiul actual al cunoașterii, în principal prin faptul că investigarea prezenței lamininei a fost realizată comparativ în stadii CEAP diferite, evaluarea semicantitativă relevând diferențe semnificative. Astfel, laminina a fost identificată predominant la nivelul intimei, la nivelul membranei bazale endoteliale, în cantitatite redusă, cu o intensitate de reacție slabă, pentru sublotul 1 (varice simple, stadiul CEAP 2-3). Pentru sublotul 2 (varice complicate, stadiul CEAP
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
safenă lungă, respectiv artera safenă scurtă, pentru vena safenă scurtă) și care formează o multitudine de anastomoze, realizând astfel un sistem de vasa vasorum arteriale și venoase. În relație cu patologia bolii varicoase, trecerea în revistă a datelor din literatură relevă faptul că particularitățile de morfologie microscopică a microvascularizației peretelui venos au fost extrem de puțin studiate, deși posibilele conexiuni patogenice nu sunt de neglijat (Lefebvre, Lescalie, 1996) - inclusiv prin producerea recurențelor determinate de neovascularizație (van Rij et al., 2004), prin reactivitatea
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
vasa vasorum. Imaginile următoare sunt elocvente pentru a demonstra profilul microvascularizației, a VEGF și NOS (fig. 138 145). 7.4.3.2. EXPRESIA ELEMENTELOR MICROVASCULARE, A VEGF ȘI NOS ÎN BOALA VARICOASĂ - VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 2-3 Examenul calitativ a relevat existența unei rețele vasa vasorum puternic dezvoltate la nivelul adventicei, cu extindere marcată în interiorul tunicii medii. Intima hiperplazică a conținut numeroase elemente vasculare. În cazul venelor complicate prin tromboză, prezența elementor vasculare în trombusul recanalizat a fost evidentă. VEGF a
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
al., 1981, Haselbach et al., 1986, Bollinger et al., 1995, Bollinger et al., 1997). Studii imunohistochimice au completat informațiile morfologice microscopice, prin investigarea prezenței activatorilor plasminogenului derivat tisular și, respectiv, urokinazic, a inhibitorilor acestora și a factorului von Willebrand, rezultatele relevând un dezechibru local în balanța coagulare - fibrinoliză care contribuie la lezarea microcirculației (Kolbach et al., 2004). Mai mult, s-a emis ipoteza conform căreia producția concomitentă de VEGF în epiderm ar putea explica proliferarea capilară (Pardoe et al., 1996). Cu
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
longitudinală la nivel adventiceal, și circulară în medie, iar venulele post-capilare care apar în intimă drenează centrifug spre vasele venoase adventiceale, care formează ulterior colectori venoși cu traiect comun vaselor arteriale nutritive. Analiza morfometrică tridimensională (Kachlik et al., 2007) a relevat diferențe dimensionale certe între vasa vasorum arteriale (diametru 11,6-36,6 microni), capilare (diametru 4,7-11,6 microni) și vasa vasorum venoase (11,6-200,3 microni), precum și faptul că vasa vasorum venoase sunt mult mai numeroase decât cele arteriale. Abundența
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
localizării și densității, microvascularizația peretelui venos corespondent venelor varicoase simple (stadiul CEAP 2-3) și, respectiv, complicate (stadiul CEAP 4-6). Analiza preparatelor microscopice în care identificarea structurilor vasculare a fost evidentă, datorită marcajului pozitiv ale endoteliului vascular cu anticorpul anti-CD34, a relevat diferențe nete între cele două subloturi. Comparativ cu venele varicoase simple, la nivelul venelor varicoase complicate, s-a remarcat o dezvoltare semnificativă a microvascularizației la nivelul adventicei, asociată cu prezența de vase mici în treimea internă a mediei și în
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
a avea un rol determinat în răspunsul adaptativ al venei la diferiți stimuli (Naoum et al., 2007). Evaluarea nivelelor plasmatice ale VEGF (Howlader, Coleridge Smith, 2004), la pacienții cu boală varicoasă în diferite stadii clinice CEAP, în comparație cu un lot martor, relevă o tendință spre creștere a VEGF în toate stadiile insuficienței venoase cronice, semnificația statistică fiind prezentă numai în asociere cu ulcerațiile; edemul este asociat cu nivele VEGF crescute, dar nu și simptomele subiective asociate celor obiective, în boala varicoasă, reprezentate
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
bolii varicoase. Modificările morfologice semnificative ale microcirculației în venele varicoase, inclusiv cele trombozate, aduc în discuție implicarea lor în patogeneza bolii varicoase. Rezultatele evaluării nivelelor plasmatice VEGF și NOS vene normale versus vene varicoase, după inducerea experimentală a stazei venoase, relevă faptul că pierderea capacității de sinteză pentru VEGF și scăderea producției de NOS, determinate de staza venoasă, pot constitui secvențe în mecanismul patogenic al bolii varicoase primare (Hollingsworth et al., 2001). Din această perspectivă, rezultatele noastre relevă, prin caracteristicile NOS
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
a stazei venoase, relevă faptul că pierderea capacității de sinteză pentru VEGF și scăderea producției de NOS, determinate de staza venoasă, pot constitui secvențe în mecanismul patogenic al bolii varicoase primare (Hollingsworth et al., 2001). Din această perspectivă, rezultatele noastre relevă, prin caracteristicile NOS, un status funcționabil al endoteliului vascular și, consecutiv, al microvascularizației. Considerăm că pozitivitatea redusă a reacției imunohistochimice pentru NOS în vasa vasorum și, respectiv, intensă la nivel capilar sunt argumente în favoarea ideei că reactivitatea vasa vasorum se
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
al., 1993, Vaalmo et al., 1997, Li et al., 2000). MMPs și TIMPs sunt produse temporar ca răspuns la semnale externe ca: diverse proteaze, citokine sau factori de creștere, interacțiunile celulă matrice extracelulară și celulă-celulă. Trecerea în revistă a literaturii relevă scăderea MMP-2 și creșterea TIMP-1 în venele varicoase, comparativ cu venele normale (Porto et al., 1995), nivele scăzure de MMP-1 și MMP-13 în venele localizate inferior, comparativ cu cele localizate superior (Gillespie et al., 2002), rezultate contradictorii referitoare la prezența
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
fibroză la nivelul peretelui venos și formarea dilataților varicoase; aceste date necesită însă studii suplimentare pentru confirmare (Shireman et al., 1996, Badier Commander et al., 2000, Kosugi et al., 2003). Studii asupra stadiilor avansate ale bolii varicoase, complicate cu ulcer, relevă că MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 au avut nivele crescute în exudatul pacienților cu ulcer venos activ față de cei cu plăgi traumatice (Wysocki et al, 1993, Bullen et al 1995, Weckroth et al, 1996). Analiza biopsiilor de piele oferă date suplimentare
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
et al., 2000b). În schimb, pentru pacienții în stadiile CEAP IV, comparativ cu CEAP V, nu s-au putut identifica diferențe între nivelurile și activitatea MMP-1, MMP-2, MMP-9 și TIMP-1 (Saito et al., 2001). Pentru ambele loturi, rezultatele noastre au relevat diferențe evidente între cele două MMPs studiate. Pe de o parte, am evidențiat o prezență inconstantă, la un număr mic din cazurile analizate, a MMP-2. Pe de altă parte, MMP-9 a fost exprimat în toate cazurile, în paralel cu TIMP-1
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
2005). Apoptoza a fost analizată la nivelul populațiilor celulare endoteliale, inflamatorii și musculare netede, datele obținute indicând că modificările celulelor musculare netede, în context apoptotic, sunt importante pentru arhitectura și tonusul venos. Trecerea în revistă a literaturii dedicate acestui subiect relevă însă faptul că sunt puține date despre rolul morții celulare programate în leziunile peretelui venei varicoase. Pornind de la datele existente în literatură, obiectivul urmărit a fost reprezentat de investigarea activității apoptotice la nivelul celulelor musculare netede din tunica medie a
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
recoltate, în 4 din cele 5 cazuri investigate. Un singur caz a prezentat reacție imunohistochimică pozitivă, de intensitate scăzută, la nivelul celulelor musculare din tunica medie. În cazurile în care, la nivelul crosei lumenul a fost obstruat, trombusul intraluminal a relevat o expresie Bax intens pozitivă (fig. 168 169). 7.6.4. DISCUȚII Unul dintre cei mai importanți factori care influențează, la nivel molecular, viabilitatea celulei, este echilibrul dintre semnalele pro-apoptotice și cele anti-apoptotice, determinate de numărul de familii de gene
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
apoptoza este invers corelată cu restenozarea legată de hiperplazia intimală arterială după angioplastie și grefă venoasă (Durand et al., 2002, Mayr et al., 2002). Investigațiile asupra activității apoptozice în leziunile aterosclerotice avansate, în fragmente ale arterelor carotidiene, coronariene și renale, relevă apoptoză crescută, pe calea intrinsecă, incluzând Bax (Saxena et al. 2002). Rezultatele raportate în literatură, vizând relația apoptoză - boală varicoasă, sunt puține și controversate. Prezența expresiei Bax scăzute, în paralel cu expresia Bcl 2/Bcl-x crescută și, consecutiv, numărul mai
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
crescută și, consecutiv, numărul mai mic de celule apoptotice în tunica medie a venelor varicoase, comparativ cu venele normale, pledează pentru ipoteza conform căreia procesul morții programate a celulelor este inhibat în venele varicoase (Ascher et al., 2000). Alte date relevă fie o activitate apoptotică intensă în media venelor varicoase (Bujan et al., 2000), posibil limitată la segmentele distale, fără afectarea segmentelor proximale (Urbanek et al., 2004), fie o scădere statistic semnificativă a indexului apoptotic cuantificat în stratul adventiceal al venelor
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
3.1. EXPRESIA POPULAȚIEI MASTOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2-3 Examenul calitativ a evidențiat prezența mastocitelor în mod preferențial la nivelul adventicei, localizarea difuză alternând cu localizarea concentrată în jurul vasa vasorum adventiceale (fig. 170-172). Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 8 cazuri analizate, o valoare medie de 23,52 mastocite (tabelul 53). 7.7.3.2. EXPRESIA POPULAȚIEI MASTOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 4-6 Examenul calitativ a evidențiat prezența mastocitelor predominant la nivelul adventicei
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
predominant la nivelul adventicei, existând însă un număr important de mastocite și la nivelul tunicii medii. Sub raportul distribuției, mastocitele au fost identificate în principal în relație cu capilare din tunica medie și, respectiv, vasa vasorum adventiceale. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 5 cazuri analizate, o valoare medie de 43,24 mastocite (tabelul 54). 7.7.3.3. EXPRESIA POPULAȚIEI MASTOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE VERSUS VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 2-3 VERSUS STADIUL CEAP 4-6 Analiza statistică a
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
24 mastocite (tabelul 54). 7.7.3.3. EXPRESIA POPULAȚIEI MASTOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE VERSUS VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 2-3 VERSUS STADIUL CEAP 4-6 Analiza statistică a numărului mediu de mastocite, comparativ sublot 1 versus sublot 2, a relevat existența unei diferențe semnificative statistic (p < 0,0001). 7.7.4. DISCUȚII Mastocitele produc, stochează și eliberează variate tipuri de compuși vasoactivi (histamină, triptază, noradrenalină, prostaciclină, tromboxan A, citokine), a căror prezență poate fi corelată, inclusiv prin capacitatea de a
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]
-
EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE T ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE SIMPLE - STADIUL CEAP 2 3 Examenul calitativ a evidențiat prezența limfocitelor T4 și T8 la nivelul tunicii medii, cu localizare difuză în interiorul componentei colagenice care separă celulele musculare netede. Examenul cantitativ a relevat, pe ansamblul celor 8 cazuri analizate, o valoare medie de 25,67 limfocite T4, și 10,60 limfocite T8 (tabel 55). 7.8.3.2. EXPRESIA POPULAȚIEI LIMFOCITARE ÎN BOALA VARICOASĂ VARICE COMPLICATE - STADIUL CEAP 4-6 Examenul calitativ a evidențiat
CERCETĂRI HISTOLOGICE, HISTOCHIMICE ŞI ELECTRONOMICROSCOPICE ÎN VENELE VARICOASE by FLORIN COMŞA () [Corola-publishinghouse/Science/506_a_757]