5,517 matches
-
c) godeurile C și E - antigen de referință; ... d) godeul D - antigen de testat nediluat; ... 2. plăcile Petri 2 și 4: a) godeul A - antigenul de testat nediluat; ... b) godeul B - antigenul de testat diluat 1/2; ... c) godeul C - antigenul de testat diluat 1/4; ... d) godeul D - antigenul de testat diluat 1/8. ... 1.1.3. Instrucțiuni suplimentare a) Experimentul trebuie să fie efectuat cu două diluții de ser 1/5 și 1/10 în scopul obținerii precipitării optime
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
godeul D - antigen de testat nediluat; ... 2. plăcile Petri 2 și 4: a) godeul A - antigenul de testat nediluat; ... b) godeul B - antigenul de testat diluat 1/2; ... c) godeul C - antigenul de testat diluat 1/4; ... d) godeul D - antigenul de testat diluat 1/8. ... 1.1.3. Instrucțiuni suplimentare a) Experimentul trebuie să fie efectuat cu două diluții de ser 1/5 și 1/10 în scopul obținerii precipitării optime. ... b) Dacă diametrul precipitării este prea mic pentru fiecare
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
a agarului trebuie să fie de 0,8%, iar cea a serurilor de 5% și, respectiv, 10%. ... e) Se notează diametrele măsurate în următorul sistem de coordonate. Diluția de lucru este cea la care s-a înregistrat același diametru pentru antigenul de testat și antigenul de referință. ... D. Bluetongue (febră catarala) 1. Testul ELISA de blocare sau competitiv se va efectua conform următorului protocol: a) Testul ELISA competitiv care utilizează anticorpul monoclonal 3-17-A3 este capabil să detecteze anticorpii tuturor serotipurilor cunoscute
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
fie de 0,8%, iar cea a serurilor de 5% și, respectiv, 10%. ... e) Se notează diametrele măsurate în următorul sistem de coordonate. Diluția de lucru este cea la care s-a înregistrat același diametru pentru antigenul de testat și antigenul de referință. ... D. Bluetongue (febră catarala) 1. Testul ELISA de blocare sau competitiv se va efectua conform următorului protocol: a) Testul ELISA competitiv care utilizează anticorpul monoclonal 3-17-A3 este capabil să detecteze anticorpii tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului bluetongue (BTV
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
ELISA de blocare sau competitiv se va efectua conform următorului protocol: a) Testul ELISA competitiv care utilizează anticorpul monoclonal 3-17-A3 este capabil să detecteze anticorpii tuturor serotipurilor cunoscute ale virusului bluetongue (BTV). ... b) Principiul testului constă în întreruperea reacției dintre antigenul BTV și un anticorp monoclonal specific de grup (3-17-A3) prin adăugarea diluțiilor de ser de testare. Anticorpii de BTV prezenți în serul de testare blochează reactivitatea anticorpului monoclonal (ACM) și determină reducerea dezvoltării culorii scontate la adăugarea substratului enzimatic. ... 1
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de ser de testare. Anticorpii de BTV prezenți în serul de testare blochează reactivitatea anticorpului monoclonal (ACM) și determină reducerea dezvoltării culorii scontate la adăugarea substratului enzimatic. ... 1.1. Materiale și reactivi: 1. plăci de microtitru cu suprafața plata; 2. antigen pregătit conform procedurii descrise mai sus; 3. tampon de blocare: 5% (w/v) lapte praf deshidratat Marvel, 0,1% (v/v) de tween-20 furnizat sub formă de sirop de polioxietilena sorbiton monolaurat în PBS; 4. anticorp monoclonal: 3-17-A3 (furnizat sub
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de apă distilata; ATENȚIE! Întotdeauna adăugați acidul peste apă, niciodată apă peste acid. 8. agitator orbital; 9. cititor de placă ELISA (testul poate fi citit vizual). 1.2. Protocolul testului: Control orb: linia 1A-H este un control orb care conține antigen BTV și conjugat. Acesta poate fi folosit la etalonarea cititorului ELISA. 1.3. Control ACM: linia 2A-H este controlul anticorpului monoclonal și cuprinde antigen BTV, anticorp monoclonal și conjugat. Acesta reprezintă un control negativ. Media valorilor densității optice ale acestei
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
citit vizual). 1.2. Protocolul testului: Control orb: linia 1A-H este un control orb care conține antigen BTV și conjugat. Acesta poate fi folosit la etalonarea cititorului ELISA. 1.3. Control ACM: linia 2A-H este controlul anticorpului monoclonal și cuprinde antigen BTV, anticorp monoclonal și conjugat. Acesta reprezintă un control negativ. Media valorilor densității optice ale acestei linii de control reprezintă valoarea de inhibiție 0%. 1.4. Control pozitiv: linia 3A-H este controlul pozitiv. Acesta cuprinde antigen BTV, diluții de antiser
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
anticorpului monoclonal și cuprinde antigen BTV, anticorp monoclonal și conjugat. Acesta reprezintă un control negativ. Media valorilor densității optice ale acestei linii de control reprezintă valoarea de inhibiție 0%. 1.4. Control pozitiv: linia 3A-H este controlul pozitiv. Acesta cuprinde antigen BTV, diluții de antiser pozitiv BTV, ACM și conjugat și este inclus pentru a indica faptul că testul este efectuat corespunzător și că trebuie să se obțină niveluri similare de inhibiție de la un test la altul. 1.5. Serurile de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
diluții ale serului. Alternativ, pentru supraveghere serologica la scară largă, serurile pot fi testate într-o singură diluție (1/4) sau în două diluții 1/2 și 1/4 că test de control rapid. 1.6. Procedura: 1. Se diluează antigen BTV la concentrație pretitrata în PBS, se agită ușor pentru a dispersa virusul agregat (dacă agitatorul nu este disponibil, se pipeteaza puternic) și se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii ELISA. Se agită ușor marginile plăcii pentru a se
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
la concentrație pretitrata în PBS, se agită ușor pentru a dispersa virusul agregat (dacă agitatorul nu este disponibil, se pipeteaza puternic) și se adaugă 50 æl în toate godeurile plăcii ELISA. Se agită ușor marginile plăcii pentru a se dispersa antigenul. 2. Se incubează la temperatura de 37°C timp de 60 de minute cu ajutorul unui agitator orbital. Se spală plăcile de 3 ori prin golirea ��i umplerea godeurilor cu PBS nesteril și se usucă cu ajutorul unei hârtii absorbante. 3. Se
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
testare b) Valorile de inhibiție mai mari de 40% la o diluție de ser de 1/4 sunt considerate pozitive. Citirea vizuală este posibilă având în vedere că inhibiția de 40% este cea mai mica valoare vizibilă. ... 1.8. Prepararea antigenului BTV ELISA: 1. Se spală de trei ori 10 roux de celule confluente bhk-21 cu un mediu Eagle fără ser și se infectează cu serotipul 1 de virus BTV într-un mediu Eagle fără ser. 2. Se incubează la temperatura
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
5 ml de 40% sucroza w/v în PBS, folosindu-se 30 ml tuburi de centrifugare Beckmann și un rotor SW 28. 11. Se înlătura supernatantul, se drenează tuburile și se resuspenda celulele granulate în PBS prin ultrasonare. Se stochează antigenul în alicote la temperatura de -70°C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
30 ml tuburi de centrifugare Beckmann și un rotor SW 28. 11. Se înlătura supernatantul, se drenează tuburile și se resuspenda celulele granulate în PBS prin ultrasonare. Se stochează antigenul în alicote la temperatura de -70°C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
de centrifugare Beckmann și un rotor SW 28. 11. Se înlătura supernatantul, se drenează tuburile și se resuspenda celulele granulate în PBS prin ultrasonare. Se stochează antigenul în alicote la temperatura de -70°C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS peste placă de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
supernatantul, se drenează tuburile și se resuspenda celulele granulate în PBS prin ultrasonare. Se stochează antigenul în alicote la temperatura de -70°C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS peste placă de microtitru într-o serie de două diluții 50 æl/godeu cu ajutorul
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
C. 1.9. Titrarea antigenului BTV ELISA: Antigenul BTV ELISA este titrat prin ELISA indirect. Două diluții de antigen sunt titrate cu ajutorul unei diluții constante (1/50) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1.10. Procedura: 1. Se diluează antigen de BTV în PBS peste placă de microtitru într-o serie de două diluții 50 æl/godeu cu ajutorul unei pipete cu multiple canale. 2. Se incubează timp de o oră la temperatura de 37°C într-un agitator orbital. 3
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
și cromogen că mai sus. Se împiedică reacția după 10 minute prin adăugarea unui mol de acid sulfuric 50 æl/godeu. 1.11. În încercarea concurență anticorpul monoclonal trebuie să fie în exces, de aceea se alege o soluție de antigen care se găsește pe curbă de titrare "nu în zona plăcii", care dă circa 0,8 OD după 10 minute. 2. Testul de imunodifuzie pe gel de agar se va efectua conform următorului protocol: 2.1. Antigen: antigenul precipitat este
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
o soluție de antigen care se găsește pe curbă de titrare "nu în zona plăcii", care dă circa 0,8 OD după 10 minute. 2. Testul de imunodifuzie pe gel de agar se va efectua conform următorului protocol: 2.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat ��n orice sistem de cultură celulară care suporta rapidă multiplicare a serotipului specific de virus BTV. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
soluție de antigen care se găsește pe curbă de titrare "nu în zona plăcii", care dă circa 0,8 OD după 10 minute. 2. Testul de imunodifuzie pe gel de agar se va efectua conform următorului protocol: 2.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat ��n orice sistem de cultură celulară care suporta rapidă multiplicare a serotipului specific de virus BTV. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
imunodifuzie pe gel de agar se va efectua conform următorului protocol: 2.1. Antigen: antigenul precipitat este preparat ��n orice sistem de cultură celulară care suporta rapidă multiplicare a serotipului specific de virus BTV. Sunt recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100 de ori pentru a fi eficace. Acest lucru se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
recomandate celulele BHK și Vero. Antigenul este prezent în fluidul supernatant la finalul creșterii virusului, dar trebuie concentrat de 50-100 de ori pentru a fi eficace. Acest lucru se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea a 0,3% v/v betapropiolactona. 2.2. Serul de control pozitiv cunoscut: utilizându-se un ser de referință internațional și un antigen, este produs un ser național standard, standardizat la proporții optime în raport cu serul
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
se poate realiza prin orice procedura standard de concentrare proteica; virusul din antigen poate fi inactivat prin adăugarea a 0,3% v/v betapropiolactona. 2.2. Serul de control pozitiv cunoscut: utilizându-se un ser de referință internațional și un antigen, este produs un ser național standard, standardizat la proporții optime în raport cu serul internațional de referință, liofilizat și folosit că ser de control cunoscut în fiecare test. 2.3. Ser de testare 2.4. Procedura: a) 1% agaroza preparată în tampon
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
diametrul de 5,0 mm, este tăiat în agar. Ansamblul constă într-un godeu central și 6 godeuri dispuse într-un cerc cu rază de 3 mm. ... 1 6 2 X 5 3 4 c) Se umple godeul central cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu serul pozitiv cunoscut, iar godeurile 1, 3 și 5 sunt umplute cu ser de testat. ... d) Sistemul este incubat timp de 72 de ore la temperatura ambianța într-o cameră
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]
-
sunt umplute cu ser de testat. ... d) Sistemul este incubat timp de 72 de ore la temperatura ambianța într-o cameră închisă, umedă. ... 2.5. Interpretare: un ser de testare este pozitiv dacă formează o linie de precipitina specifică cu antigenul, precum și o linie completă de identificare cu serul de control. Un ser de testare este negativ dacă nu formează o linie specifică cu antigenul și nu curbează linia serului de control. Plăcile Petri trebuie examinate pe un fond întunecat și
NORMA SANITARĂ VETERINARA din 10 aprilie 2002 privind stabilirea protocoalelor de testare şi condiţiile de autorizare a targurilor de animale, fermelor de carantina sau centrelor de colectare în cazul importurilor de animale vii din speciile bovine şi porcine provenite din tari terţe. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/144269_a_145598]