1,047 matches
-
specifică λ a soluției și aria secțiunii A. Clasificarea metodelor electroforetice După modul cum se desfășoară electromigrarea metodele electroforetice se clasifică în: - electroforeză în mediu liber în coloană de lichid sau electroforeză cu front mobil (electroforeză frontală, electroforeză de frontieră); - electroforeză pe medii stabilizante sau electroforeză zonală. 1. Electroforeza în mediu liber Migrarea electroforetică se realizează în coloană de lichid într-o celulă formată dintr-un tub în formă de U umplut cu soluție tampon de electrolit, cu o secțiune pătrată
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
aria secțiunii A. Clasificarea metodelor electroforetice După modul cum se desfășoară electromigrarea metodele electroforetice se clasifică în: - electroforeză în mediu liber în coloană de lichid sau electroforeză cu front mobil (electroforeză frontală, electroforeză de frontieră); - electroforeză pe medii stabilizante sau electroforeză zonală. 1. Electroforeza în mediu liber Migrarea electroforetică se realizează în coloană de lichid într-o celulă formată dintr-un tub în formă de U umplut cu soluție tampon de electrolit, cu o secțiune pătrată, construit din sticlă transparentă pentru
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
Clasificarea metodelor electroforetice După modul cum se desfășoară electromigrarea metodele electroforetice se clasifică în: - electroforeză în mediu liber în coloană de lichid sau electroforeză cu front mobil (electroforeză frontală, electroforeză de frontieră); - electroforeză pe medii stabilizante sau electroforeză zonală. 1. Electroforeza în mediu liber Migrarea electroforetică se realizează în coloană de lichid într-o celulă formată dintr-un tub în formă de U umplut cu soluție tampon de electrolit, cu o secțiune pătrată, construit din sticlă transparentă pentru adaptarea unui spectrometru
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
doi electrozi se leagă la o sursă de curent continuu și se aplică o diferență de potențial de 100-150 volți. Cei trei componenți proteici vor migra spre catod cu viteze diferite ce depind de mărimea, forma și sarcina lor. 2. Electroforeza pe medii stabilizante Se desfășoară pe suporturi solide care evită labilitatea fronturilor și elimină suprafețele de separare false datorate concentrației soluțiilor. Lichidul se găsește într-un suport sau mediu poros: - hârtie de filtru specială pentru electroforeză; - acetat de celuloză sub
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
și sarcina lor. 2. Electroforeza pe medii stabilizante Se desfășoară pe suporturi solide care evită labilitatea fronturilor și elimină suprafețele de separare false datorate concentrației soluțiilor. Lichidul se găsește într-un suport sau mediu poros: - hârtie de filtru specială pentru electroforeză; - acetat de celuloză sub formă de folii pentru separarea de insulină, fibrinogen, proteine, lipoproteine, glicoproteine, hemoglobine ; - geluri de agaroză (proteine), agar (proteine, vitamine, carbohidrați), poliacrilamidă, silice, rășini schimbătoare de ioni, amidon (enzime) etc. Acestea din urmă se caracterizează printr-o
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
se face direct (densitometric) sau prin alte metode (spectrometric) după extracția spoturilor decupate. Aparatul conține: - generator de curent continuu cu tensiune variabilă cuprinsă între 0 și 250- 500 V și cu o intensitate de cel mult 50 mA; - cameră de electroforeză cu două compartimente separate anodic și catodic în care se află doi electrozi de platină și în care se poate pune soluția de electrolit; electrozii sunt legați la bornele generatorului; - densitometru prevăzut cu un înregistrator de absorbanță și un integrator
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
sensului de migrare. Identificarea compușilor separați se poate face prin culoare, absorbanță, fluorescență sau prin reacții chimice cu reactivi adecvați. Coloranți albastru de bromfenol, amido black 10B, azocarmin, tiazine Red R, ponceau 2R, Sudan Black B, ninhidrină. Factorii care influențează electroforeza 1. Natura moleculelor separate - mărimea particulelor; - natura și sarcina speciilor. 2. Aparatura - suportul (suprafețele solide se încarcă negativ) 3. Curentul electric Deplasarea electroforetică este proporțională cu mobilitatea, câmpul electric și cu timpul de trecere al curentului electric; 4. pH-ul
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
moleculelor separate - mărimea particulelor; - natura și sarcina speciilor. 2. Aparatura - suportul (suprafețele solide se încarcă negativ) 3. Curentul electric Deplasarea electroforetică este proporțională cu mobilitatea, câmpul electric și cu timpul de trecere al curentului electric; 4. pH-ul Nu influențează electroforeza acizilor, bazelor tari și a sărurilor Compușii organici de tipul acizilor carboxilici, baze aminate, substanțe amfotere migrează numai dacă pH-ul soluției de electroliți este diferit de punctul izoionic. 5. Natura soluției Ỉn soluție se pot găsi săruri, acizi, baze
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
de sodiu (LSS) și dodecilsulfatul de sodiu (DSS) desfac agregatele prin fixarea de proteine cărora le conferă sarcină negativă. Alți factori: - mișcarea de electroosmoză a soluției de electrolit care se deplasează spre catod (-); - fenomenul de evaporare; - fenomenul de difuzie. 3. Electroforeza prin izofocalizare, electrofocalizare (EF) Substanțele cu puncte izoelectrice diferite migrează într-un mediu gelificat care are între cele două extremități ale sale un gradient continuu de pH. Valorile cele mai mari ale pH-ului se găsesc în partea catodului, iar
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
în partea catodului, iar cele mai mici în partea anodului. Tehnica se aplică pentru amfoliți care vor migra până în momentul în care ating zona cu pH-ul corespunzător punctului izoelectric. Ei se imobilizează prin focalizare într-o zonă îngustă. 4. Electroforeza bidimensională A doua migrare se face în LSS sau DSS. 5. Electroforeza capilară (EC) Migrarea se face în tub capilar de silice topită, umplut cu o fază conducătoare de electroliți sau cu un gel. Capetele capilarelor se introduc în două
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
aplică pentru amfoliți care vor migra până în momentul în care ating zona cu pH-ul corespunzător punctului izoelectric. Ei se imobilizează prin focalizare într-o zonă îngustă. 4. Electroforeza bidimensională A doua migrare se face în LSS sau DSS. 5. Electroforeza capilară (EC) Migrarea se face în tub capilar de silice topită, umplut cu o fază conducătoare de electroliți sau cu un gel. Capetele capilarelor se introduc în două bacuri conținând o soluție apoasă de electrolit. Diferențele de potențial de circa
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
măsurare. Mediul de migrare: electroliți tampon sau gel impregnat cu o asemenea soluție. Soluției i se pot adăuga: - solvenți organici: acetonitril; - agenți tensioactivi: LSS, SDS; - ciclodextrine; - agenți complexanți, chelatizanți sau sechestranți; - compuși ionici ce conțin cromofori, fluorofori. Migrarea particulelor: Tehnicile electroforezei capilare 1. Electroforeza capilară zonală Este o electroforeză în soluție liberă și se realizează într-o capilară umplută cu soluție de electrolit. Separarea se face în funcție de mobilitatea electroforetică a analiților. 2. Electroforeza capilară micelară (MECE) Este o variantă a “Micellar
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
migrare: electroliți tampon sau gel impregnat cu o asemenea soluție. Soluției i se pot adăuga: - solvenți organici: acetonitril; - agenți tensioactivi: LSS, SDS; - ciclodextrine; - agenți complexanți, chelatizanți sau sechestranți; - compuși ionici ce conțin cromofori, fluorofori. Migrarea particulelor: Tehnicile electroforezei capilare 1. Electroforeza capilară zonală Este o electroforeză în soluție liberă și se realizează într-o capilară umplută cu soluție de electrolit. Separarea se face în funcție de mobilitatea electroforetică a analiților. 2. Electroforeza capilară micelară (MECE) Este o variantă a “Micellar Electrokinetic Capilary Chromatograpy
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
impregnat cu o asemenea soluție. Soluției i se pot adăuga: - solvenți organici: acetonitril; - agenți tensioactivi: LSS, SDS; - ciclodextrine; - agenți complexanți, chelatizanți sau sechestranți; - compuși ionici ce conțin cromofori, fluorofori. Migrarea particulelor: Tehnicile electroforezei capilare 1. Electroforeza capilară zonală Este o electroforeză în soluție liberă și se realizează într-o capilară umplută cu soluție de electrolit. Separarea se face în funcție de mobilitatea electroforetică a analiților. 2. Electroforeza capilară micelară (MECE) Este o variantă a “Micellar Electrokinetic Capilary Chromatograpy” (MECC). Se mai numește cromatografie
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
ionici ce conțin cromofori, fluorofori. Migrarea particulelor: Tehnicile electroforezei capilare 1. Electroforeza capilară zonală Este o electroforeză în soluție liberă și se realizează într-o capilară umplută cu soluție de electrolit. Separarea se face în funcție de mobilitatea electroforetică a analiților. 2. Electroforeza capilară micelară (MECE) Este o variantă a “Micellar Electrokinetic Capilary Chromatograpy” (MECC). Se mai numește cromatografie capilară electrocinetică. În soluția de electrolit se adaugă agent tensioactiv. Se formează agregate sferice purtătoare de sarcini electrice. Micelele sunt formate din lanțuri, cu
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
sarcini electrice. Micelele sunt formate din lanțuri, cu extremitățile hidrofobe spre interior, iar extremitățile hidrofile încărcate electric orientate spre exterior. Micelele se dezagregă și se refac continuu. Ele înglobează analiți hidrofobi pe care îi antrenează în migrarea lor electroforetică. 3. Electroforeza capilară pe gel (GCE) - Gelul de agaroză 0,5 - 2% Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
lor electroforetică. 3. Electroforeza capilară pe gel (GCE) - Gelul de agaroză 0,5 - 2% Unitate de agaroză - Gelul de poliacrilamidă 3,5 - 20% Atenție la faptul că poliacrilamida este un neurotoxic. Pentru separarea electroforetică a proteinelor se folosește așa numita electroforeză pe gel de poliamidă cu dodecilsulfatul de sodiu, SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) SDS este un agent tensioactiv anionic care în amestec cu proteinele denaturează structura secundară și terțiară a acestora și încarcă fiecare proteină cu sarcină negativă
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
lor în funcție de mărimea lor. Se utilizează 1.4 g SDS la 1 g proteine. Proteinele denaturate se aplică pe stratul de gel de poliamidă și se imersează în soluția tampon. Proteinele scurte migrează mai ușor prin porii gelului. 4. Electroforeza capilară în contracurent Se introduce în soluția tampon folosită, a unor aditivi numiți “selectori chiralici”: ciclodextrine, eteri coroană, proteine, hidrați de carbon, antibiotice macrociclice (vancomicina, rifampicine), complecși metalici enantioselectivi. APLICAȚIILE ELECTROFOREZEI Determinarea mobilității electroforetice Mobilitatea μ a unei particule reprezintă
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
Proteinele scurte migrează mai ușor prin porii gelului. 4. Electroforeza capilară în contracurent Se introduce în soluția tampon folosită, a unor aditivi numiți “selectori chiralici”: ciclodextrine, eteri coroană, proteine, hidrați de carbon, antibiotice macrociclice (vancomicina, rifampicine), complecși metalici enantioselectivi. APLICAȚIILE ELECTROFOREZEI Determinarea mobilității electroforetice Mobilitatea μ a unei particule reprezintă distanța d (în metri) parcursă de o particulă coloidală încărcată electric în timpul t, de o secundă, sub acțiunea unui câmp electric al cărui gradient de potențial E este de un volt
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
electric al cărui gradient de potențial E este de un volt/metru. Gradientul de potențial este determinat de intensitatea i a curentului (în amperi), raportată la conductibilitatea specifică γ a soluției și aria secțiunii A. Separarea electroforetică a chiralilor Capilar electroforeza este o variantă a electroforezei frontale, care se utilizează pentru separarea chiralilor. Izomerii D și L pot fi separați cu ajutorul ciclodextrinelor. În anumit caz, izomerul D formează un complex stabil cu ciclodextrina. Izomerul D se separă de izomerul L pentru că
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
potențial E este de un volt/metru. Gradientul de potențial este determinat de intensitatea i a curentului (în amperi), raportată la conductibilitatea specifică γ a soluției și aria secțiunii A. Separarea electroforetică a chiralilor Capilar electroforeza este o variantă a electroforezei frontale, care se utilizează pentru separarea chiralilor. Izomerii D și L pot fi separați cu ajutorul ciclodextrinelor. În anumit caz, izomerul D formează un complex stabil cu ciclodextrina. Izomerul D se separă de izomerul L pentru că este reținut mai mult timp
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
complex stabil cu ciclodextrina. Izomerul D se separă de izomerul L pentru că este reținut mai mult timp de ciclodextrine. Identificarea și separarea unor compuși biologici Chimiotripsina poate fi impurificată cu tripsină și din acest motiv farmacopeele cer controlul purității prin electroforeza clasică. Tehnica de lucru prevede folosirea hârtiei de tip MN 862 Whatman nr. 1 sau Schleicher-Schüll 2043 b sub formă de benzi de 3 cm lățime. Benzile de hârtie se impregnează cu tampon barbital pH 8.6 și se introduc
ANALIZA MEDICAMENTELOR. VOLUMUL 2 by MIHAI IOAN LAZ?R, DOINA LAZ?R, ANDREIA CORCIOV? () [Corola-publishinghouse/Science/83481_a_84806]
-
aplică electroliza pentru extragerea unor metale din compuși, de exemplu Na, K, Mg, Ca, Al; rafinarea metalelor: Cu, Ag, Zn, Pb; în galvanostegie (acoperirea unui metal cu o peliculă fină dintr-un alt metal); în metode electrochimice, de analiză: polarografie, electroforeză etc. Depunerea electrochimică a metalelor pe substraturi metalice se aplică pentru protecție anticorozivă, în scop decorativ, pentru reducerea frecării sau îmbunătățirea unor parametrii electrici sau magnetici. Depunerile de cupru sunt folosite ca strat intermediar la nichelarea și cromarea oțelului, la
BAZELE EXPERIMENTALE ALE CHIMIEI FIZICE ŞI COLOIDALE by ELENA UNGUREANU ,ALINA TROFIN () [Corola-publishinghouse/Science/299_a_754]
-
cancerului, inclusiv a celui pancreatic [232-234]. S-au identificat numeroase proteine asociate cu adenocarcinomul pancreatic: PGK1 (implicată în glicoliză), un component al cromatinei: histona H4, un factor modulator al RNA polimerazei (C14orf166), doi componenți lipoproteinici (APOC1 și APOAII) [100]. Utilizarea electroforezei dublu dimensionale în gel (2-DE) și spectometriei de masă a identificat 154 de markeri serici cu rol potențial în diagnosticul de CP, printre care și fibrinogenul γ asociat cu starea de hipercoagulabilitate în CP [235, 236]. Prin metoda SELDI-TOF s-
Tratat de oncologie digestivă vol. II. Cancerul ficatului, căilor biliare și pancreasului by Luminiţa Leluţiu, Alexandru Irimie () [Corola-publishinghouse/Science/92187_a_92682]
-
acide și alcaline); ... f) cazuri de reumatism degenerativ: vor fi apreciate în ceea ce privește diagnosticul și capacitatea de muncă; ... g) analize de laborator: ... - examen sânge: hemoleucograma, hematocrit, formula leucocitara, glicemie, colesterol, lipide totale, uree, creatinina, proteină C reactiva; - probe funcționale hepatice: transaminaze, electroforeza, dozare de bilirubina, gamaglutamiltranspeptidaza, markeri virali pentru hepatită B și C, dozare enzime pancreatice; - test serologic pentru lues (TPHA); test HIV obligatoriu la cei care lipsesc din țară mai mult de 6 luni; - examen sumar de urină; - alte investigații de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/149928_a_151257]