942 matches
-
3. Control godeuri: Se adaugă 100 μl de tampon de blocare în godeurile Cc. Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Se adaugă 50 μl de seruri negative și pozitive de controlat, la o diluție de 1:5 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
în godeuri respectiv C-, C+ și C++. Se adaugă 50 μl tampon de blocare în godeurile pentru controlul Mab. Metodă de titrare Spot: se adaugă o diluție de 1:5 din fiecare ser de testat în tampon de blocare pentru godeurile duplicat ale coloanelor de la 3 la 12 (10 μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
μl ser + 40 μl tampon de blocare), sau Metodă de titrare a serului: Se prepară o diluție în serie, în binare din fiecare proba de testat (1:5 la 1:640) în tampon de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de blocare de-a lungul a opt godeuri, pe câte o singură coloana de la 3 la 12. 4. Imediat dupa adăugarea serurilor de testat, se diluează Mab 1:100 în tampon de blocare și se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii exceptând blank-ul de control. 5. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
60 minute pe un agitator. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 6. Se diluează concentratul de globuline de iepure anti-șoarece la 1/5000 în soluție tampon și se adaugă 50 μl din această în toate godeurile plăcii. 7. Se incubează la 37°C timp de 60 minute pe un agitator orbital. Se spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
spală de trei ori cu PBS și se usucă bine. 8. Se dezgheață OPD-ul și imediat înainte de utilizare se adaugă 5 μl de peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
peroxid de hidrogen 30% pentru fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce nu conțin anticorpi față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă se examinează și se înregistrează vizual sau utilizând un cititor spectofotometric. Analize și rezultate
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
fiecare 10 ml de OPD. Se adaugă 50 μl în toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce nu conțin anticorpi față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă se examinează și se înregistrează vizual sau utilizând un cititor spectofotometric. Analize și rezultate: Utilizând pachetul software se tipăresc
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
μl în toate godeurile plăcii. Se lasă să evidențieze culoarea timp de 10 minute și se stopează reacția cu acid sulfuric 1 M (50 μl în fiecare godeu). Culoarea se dezvoltă în godeurile de control al Mab și în acele godeuri cu seruri ce nu conțin anticorpi față de boală limbii albastre. 9. Fiecare placă se examinează și se înregistrează vizual sau utilizând un cititor spectofotometric. Analize și rezultate: Utilizând pachetul software se tipăresc valorile DO (densităților optice) și procentajul de inhibiție
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
placă se examinează și se înregistrează vizual sau utilizând un cititor spectofotometric. Analize și rezultate: Utilizând pachetul software se tipăresc valorile DO (densităților optice) și procentajul de inhibiție (PI) pentru testare și control de seruri bazate pe valorile înregistrate în godeurile de control al antigenului. Dată exprimată că valori DO și PI este utilizată pentru a determina dacă testul a fost efectuat în limite acceptabile. Limitele de control superioare (DCL) și limitele de control inferioare (LCL) pentru controlul Mab (antigen și
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
valori DO 0,4 și 1,4. Orice placă ce nu îndeplinește criteriile de mai sus trebuie eliminată. Dacă un pachet software al calculatorului nu este utilizabil, se printează valorile DO utilizând imprimantă ELISA. Se calculează valoarea medie DO pentru godeurile de control al antigenului, ce sunt echivalente cu valoarea 100%. Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
al antigenului, ce sunt echivalente cu valoarea 100%. Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm) x 100. Godeurile de control duble ale serurilor negative și godeurile blank în duplicat trebuie să înregistreze valori PI între +25% și -25% și respectiv între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Se determina valoarea DO 50% și se calculează manual pozitivitatea și negativitatea fiecărei probe. Valoarea procentuala de inhibiție (PI) = 100 - (DO al fiecărui test de control/DO medii ale Cm) x 100. Godeurile de control duble ale serurilor negative și godeurile blank în duplicat trebuie să înregistreze valori PI între +25% și -25% și respectiv între +95% și +105%. Neîncadrarea în aceste limite nu invalidează placă, dar sugerează că fondul de culoare se dezvoltă. Controlul serurilor intens pozitive și slab pozitive
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
respectiv între +51% și +80%. Diagnosticul de prag pentru seruri de testat este de 50% (50% PI sau 50% DO). Probele ce înregistrează valori PI 50% sunt înregistrate că negative. Probele ce înregistrează valori PI peste și sub pragul pentru godeurile duble sunt considerate dubioase; asemenea probe pot fi retestate prin testarea spot sau/și prin titrare. Probe pozitive pot fi de asemenea titrate a prevede o indicație a gradului de pozitivitate. Citire vizuală (cu ochiul liber): Probele pozitive și negative
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
de antigen sunt titrate față de o diluție constantă (1/100) de anticorpi monoclonali 3-17-A3. Protocolul este următorul: 1. Se titrează o diluție de 1:20 în PBS de antigen al bolii limbii albastre în raport cu o diluție serica binara (50 μl/godeu) pe placă de microtitrare, utilizând o pipeta multicanal. 2. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de trei ori. 4. Se adaugă 50 μl de anticorpi monoclonali 3-17-A3 (diluție
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
utilizând o pipeta multicanal. 2. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 3. Se spală cu PBS de trei ori. 4. Se adaugă 50 μl de anticorpi monoclonali 3-17-A3 (diluție 1/100) în fiecare godeu al plăcii de microtitrare. 5. Se incubează o oră la 37°C pe un agitator orbital. 6. Se spală cu PBS de trei ori. 7. Se adaugă 50 μl de globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
oră la 37°C pe un agitator orbital. 6. Se spală cu PBS de trei ori. 7. Se adaugă 50 μl de globulina de iepure anti-șoarece conjugat cu peroxidaza din hrean, diluat la o concentrație optimă de pretitrare, în fiecare godeu al plăcii. 8. Se incubează timp de o oră la 37°C pe un agitator orbital. 9. Adăugare de substrat și cromogen așa cum este descris anterior. Se stopează reacția după 10 minute prin adăugare de acid sulfuric soluție 1 Molar
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon barbital sodic sau borat, pH 8,5% până la 9% este turnata într-o placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice 2, 4 și 6 sunt umplute cu ser martor pozitiv, godeurile 3 și 5 sunt umplute cu seruri de testat. Sistemul este incubat timp de 72 ore la temperatura camerei într-o cameră închisă și umedă. Interpretare: Un ser de testat este pozitiv dacă formează o linie specifică de precipitare cu
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]
-
Procedeu: 1% agaroză preparată în tampon barbitol sodic sau borat, pH 8,5% până la 9% este turnata într-o placă Petri pentru a obține o grosime minimă a stratului de 0,3 mm. Un șablon (rozeta) de testare, cu șapte godeuri uscate, fiecare cu diametrul de 5 mm, este decupat (făcută cu o matriță) în agar. Rozeta conține un godeu central și șase godeuri dispuse în cerc cu rază de 3 cm. Godeul central este umplut cu antigen standard. Godeurile periferice
EUR-Lex () [Corola-website/Law/259612_a_260941]