1,292 matches
-
PCR. De asemenea, trebuie incluși aici și următorii martori pozitivi: - alicote de extracte finale repuse în suspensie, după ce s-a adăugat C. m. ssp. sepedonicus (a se vedea apendicele 2 pentru preparare); - suspensie în mediu apos de 106 celule pe mililitru dintr-un izolat virulent de C. m. ssp. sepedonicus (de exemplu, NCPPB 2140 sau NCPPB 4053); - de asemenea, în cazul în care este posibil, pentru testul PCR se utilizează ADN extras din probe de martori pozitivi. Pentru a evita riscurile
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
de încălzire sau într-o baie de aburi la 95 °C timp de zece minute. 3. Se așază tubul pe gheață timp de cinci minute. 4. Se adaugă 80 μl de soluție concentrată de lizozimă (50 mg de lizozimă pe mililitru în 10 mM Tri HCl, pH 8,0) și se lasă la incubat la 37 °C timp de 30 de minute. 5. Se adaugă 220 μl de Easy DNA(r) soluție A (Invitrogen), se omogenizează bine prin agitare și se
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
amestecul devine omogen. 8. Se centrifughează la 15 000 g timp de 20 de minute, la 4 °C, pentru a separa fazele și a forma interfaza. 9. Se varsă faza superioară într-un alt tub Eppendorf. 10. Se adaugă 1 mililitru de etanol la 100 % (-20 °C), se omogenizează rapid prin agitare și se lasă la incubat pe gheață timp de 10 minute. 11. Se centrifughează la 15 000 g timp de 20 de minute la 4 °C și se elimină
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
ADN-ului (Qiagen DNeasy Plant Kit, de exemplu), cu condiția ca metodele respective să aibă o eficacitate recunoscută ca fiind echivalentă, pentru purificarea ADN-ului provenit din probele martori care conțin între 103 și 104 celule de agent patogen pe mililitru. 6.2. PCR 6.2.1. Se prepară matricele de test și de control pentru PCR, urmând protocoalele validate (a se vedea apendicele 6). Se prepară o diluție zecimală din extractul de ADN provenit din probă (1:10 în apă
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
lactoză - sau slab Producție de acid pe bază de ramnoză - Producție de acid pe bază de salicină - Colorare Gram (a se vedea apendicele 9) + 9.2. Test de imunofluorescență (IF) (a) Se prepară o suspensie de aproximativ 106 celule pe mililitru într-un tampon de imunofluorescență (a se vedea apendicele 3). (b) Se prepară o diluție la jumătate dintr-un antiser adecvat. (c) Se urmează procedura testului de imunofluorescență (a se vedea secțiunea 4). (d) Pentru ca un test IF să fie
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
se vedea secțiunea 4). (d) Pentru ca un test IF să fie pozitiv, titrul obținut cu cultura trebuie să fie echivalent cu cel obținut cu martorul pozitiv. 9.3. Test PCR (a) Se prepară o suspensie de aproximativ 106 celule pe mililitru în apă ultrapură. (b) Într-un bloc de încălzire sau într-o baie de apă fiartă, se încălzesc 100 μl de suspensie în tuburi închise la 100 °C timp de 4 minute. În cazul în care este necesar, adăugarea de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
ssp. sepedonicus este pozitivă atunci când amplimerii PCR au aceeași dimensiune și prezintă aceleași polimorfisme de lungime a fragmentelor de restricție ca și pentru sușa martor pozitivă. 9.4. Test FISH (a) Se prepară o suspensie de aproximativ 106 celule pe mililitru în apă ultrapură. (b) Se urmează procedura testului FISH (a se vedea secțiunea 5). (c) Testul FISH este pozitiv în cazul în care obținem aceleași reacții cu cultura și martorul pozitiv. 9.5. Testul de profil al acizilor grași (FAP
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
prezent la toate Clavibacter spp., la niveluri cuprinse între 1 % și 5 %. În cazul C. m. ssp. sepedonicus, nivelul menționat gravitează de obicei în jurul valorii de 5 %. 9.6. BOX-PCR (a) Se prepară o suspensie de aproximativ 106 celule pe mililitru în apă ultrapură. (b) Se efectuează testul în conformitate cu procedura (Smith et al., 2001). 10. TEST DE CONFIRMARE Testul puterii patogene trebuie efectuat atât pentru a aduce confirmarea finală a unui diagnostic de C. m. ssp. sepedonicus, cât și pentru a
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
m. ssp. sepedonicus [NCPPB 4053 sau PD 406] pe un mediu de bază MTNA și se pune în suspensie într-un tampon fosfatat la 10 mM, astfel încât să se obțină o densitate celulară de aproximativ 1-2 x 108 UFC pe mililitru. Aceasta corespunde, în general, unei suspensii ușor turbide care prezintă o densitate optică de 0,20-600 nm. Se prelevează un con de stolon de la 200 de tuberculi dintr-o recoltă de varietate cu coajă albă, cunoscută ca fiind lipsită de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
con de stolon de la 200 de tuberculi dintr-o recoltă de varietate cu coajă albă, cunoscută ca fiind lipsită de C. m. ssp. sepedonicus. solanacearum. Se tratează stolonii urmând metoda obișnuită și se repune extractul concentrat în suspensie de 10 mililitri. Se varsă 900 μl de extract concentrat repus în suspensie în zece microfiole sterile de 1,5 ml. Se însămânțează prima microfiolă cu 100 μl din suspensia de C. m. ssp. sepedonicus. Se omogenizează prin agitare. Se stabilesc niveluri de
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
i = coeficientul câmpului (depinde de tipul de ocular și variază de la 8 la 24) K = coeficientul fiolei (1 sau 1,25) G = mărirea obiectivului (de 100 de ori, de 40 de ori etc.) 3. Se calculează celulele fluorescente caracteristice pe mililitru de extract concentrat repus în suspensie (N) N = C x 1 000/y x F unde: y = volumul de extract concentrat repus în suspensie pe fiecare fereastră și F = factorul de diluție al extractului concentrat repus în suspensie Apendicele 5
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
trei luni. După adăugarea antibioticelor, mediul se conservă o lună în atmosferă refrigerată. Apendicele 6 Protocol și reactivi PCR validați Nota bene: Testele preliminare trebuie să permită detectarea reproductibilă a cel puțin 103-104 celule de C. m. ssp. sepedonicus pe mililitru de extract de probă. De asemenea, testele preliminare nu trebuie să arate nici un fals rezultat pozitiv cu o gamă de sușe bacteriene selecționate. 1. Protocol PCR multiplex cu control PCR intern (Pastrik, 2000) 1.1. Oligonucleotide primeri Primer direct PSA-1
32006L0056-ro () [Corola-website/Law/295065_a_296394]
-
consultativ, întrucât: A. MĂSURI ÎN VIGOARE (1) Prin Regulamentul (CE) nr. 2604/20002, Consiliul a instituit un drept antidumping definitiv asupra importurilor de anumite tipuri de polietilenă tereftalată ("PET") cu un coeficient de vâscozitate egal sau mai mare de 78 mililitri pe gram, în conformitate cu DIN 53728 (Deutsche Industrienorm), (denumit în continuare "produs în cauză") înregistrate sub codul NC 3907 60 20 și originare, inter alia, din India. Măsurile constau în aplicarea unui drept specific de 181,7 EUR per tonă, cu excepția
32005R1646-ro () [Corola-website/Law/294355_a_295684]
-
publicului larg se aplică dispozițiile prezentate în continuare, referitoare la etichetare. Ambalajele detergenților care se vând publicului larg și sunt destinați a fi utilizați ca detergenți pentru rufe poartă următoarele indicații: - Cantitățile recomandate și/sau instrucțiunile de dozare, exprimate în mililitri sau grame pentru o încărcare standard a mașinii de spălat, pentru clasele de duritate mică, medie și mare a apei și instrucțiuni pentru procesele de spălare cu unul sau două cicluri; - Pentru detergenții de mare putere, numărul de încărcări standard
32004R0648-ro () [Corola-website/Law/292900_a_294229]
-
se pot spăla cu conținutul ambalajului atunci când se utilizează apă de duritate medie, care corespunde la 2,5 milimoli CaCO3/l; - În cazul în care odată cu produsul se livrează o cupă de măsurare, capacitatea acesteia trebuie să se indice în mililitri sau grame și să fie prevăzută cu marcaje care să indice doza de detergent corespunzătoare unei încărcări standard a mașinii de spălat pentru clase de duritate mică, medie și mare a apei. Încărcările standard ale mașinii de spălat sunt de
32004R0648-ro () [Corola-website/Law/292900_a_294229]
-
ecranul protector trebuie să explice în amănunt codificările utilizate pe flacon și să indice, unde este cazul, pentru un moment și o dată anume, cantitatea de radioactivitate pe doză sau pe flacon și numărul de capsule sau, pentru lichide, numărul de mililitri din recipient. ... (3) Flaconul este etichetat cu următoarele informații: ... - numele sau codul medicamentului, inclusiv numele sau simbolul chimic al radionuclidului; - numărul de identificare al seriei și data de expirare; - simbolul internațional pentru radioactivitate; - numele și adresa fabricantului; - cantitatea de radioactivitate
LEGE nr. 95 din 14 aprilie 2006 (**republicat��**)(*actualizată*) privind reforma în domeniul sănătăţii. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/276835_a_278164]
-
ecranul protector trebuie să explice în amănunt codificările utilizate pe flacon și să indice, unde este cazul, pentru un moment și o dată anume, cantitatea de radioactivitate pe doză sau pe flacon și numărul de capsule sau, pentru lichide, numărul de mililitri din recipient. ... (3) Flaconul este etichetat cu următoarele informații: ... - numele sau codul medicamentului, inclusiv numele sau simbolul chimic al radionuclidului; - numărul de identificare al seriei și data de expirare; - simbolul internațional pentru radioactivitate; - numele și adresa fabricantului; - cantitatea de radioactivitate
LEGE nr. 95 din 14 aprilie 2006 (**republicată**)(*actualizată*) privind reforma în domeniul sănătă��ii. In: EUR-Lex () [Corola-website/Law/277254_a_278583]
-
de 5% din animalele exploatării prezintă o reacție pozitivă, se efectuează un control complementar asupra fiecărui animal al exploatării prin intermediul unui test fixare a adaosului. Pentru testul de fixare a adaosului, serul conținând cel puțin 20 de unități ICIFT la mililitru este considerat ca fiind pozitiv. Antigenii utilizați trebuie aprobați de laboratorul național și trebuie să fie standardizați în raport cu al doilea ser la standard internațional anti-brucella abortus. ANEXA D Probe pentru cercetarea epidydimita contagioasă a oilor (B. ovis) Testul de fixare
jrc1730as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86878_a_87665]
-
serul la standard internațional anti-brucella ovis. Serul de lucru (de control zilnic) trebuie etalonat în raport cu serul la standard internațional anti-brucella ovis preparat de laboratorul veterinar central din Weybridge, Surrey, U.K. Serul conținând cel puțin 50 de unități internaționale la mililitru este considerat ca fiind pozitiv. ANEXA E MODELUL 1 CERTIFICAT SANITAR 1 pentru schimburile de ovine și caprine de tăiere între statele membre ale Comunității Europene Țara de origine ................................................................................................................................... Ministerul competent ........................................................................................................................ Serviciul teritorial competent............................................................................................................. I. Numărul de animale............................................................................................................. II. Identificarea
jrc1730as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86878_a_87665]
-
Se răcește rapid la temperatura ambiantă. 6.3.5 Se adaugă 1 ml de precipitat cupru-zinc (4.5) în fiecare eprubetă și se omogenizează cu atenție. 6.3.6 Se filtrează prin hârtie de filtru uscată, se aruncă primii doi mililitri, se refiltrează dacă este necesar până când filtratul este complet limpede și se iau apoi 5 ml din el într-o eprubetă. 6.3.7 Se adaugă 5 ml de soluție-tampon de dezvoltare a colorației (4.2). 6.3.8 Se
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Pregătirea curbei de etalonare 6.4.1 Se pregătește, cu ajutorul unei soluții etalon de fenol (4.8.2), o gamă de soluții etalon cu conținut de 0 (pentru martor sau proba martor), 2, 5, 10 și 20 μg fenol per mililitru. Se pipetează câte 1 ml de apă și 1 ml din cele patru soluții etalon de fenol în fiecare dintre cele cinci eprubete. 6.4.2 Se adaugă în fiecare eprubetă 1 ml de soluție de sulfat de cupru (II
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
Calcul și formulă 7.1.1 Pornind de la valoarea măsurată a absorbției (6.3.9), se calculează cantitatea de fenol cu ajutorul curbei de regresie (6.4.5). 7.1.2 Se calculează activitatea fosfatazică, exprimată în μg de fenol per mililitru de lapte pasteurizat cu ajutorul următoarei formule: Activitatea fosfatazică = 2,4 x A x D unde A este cantitatea de fenol în μg obținută la 7.1.1; D este factorul de diluare a diluării efectuate la 6.3.10 (în
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
condițiile de operare descrise. 3. Principiu Omogenizarea unui volum determinat de eșantion de lapte într-un mediu de cultură pe o cutie Petri și incubare la 30șC timp de 72 de ore. Numărarea coloniilor și calcularea numărului de microorganisme per mililitru de lapte crud sau pasteurizat sau per 0,1 ml de lapte sterilizat sau UHT preincubat. 4. Aparatură și sticlărie de laborator Materialul obișnuit de laborator și, mai ales: 4.1 Aparatură 4.1.1 Cuptor cu aer cald, reglabil
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
exprimarea rezultatelor 8.1 Laptele crud și pasteurizat 8.1.1 Se folosesc rezultatele plăcilor ce conțin între 10 și 300 de colonii (vezi 8.1.3 și 8.1.4). 8.1.2 Se calculează numărul de microorganisme per mililitru de lapte crud sau pasteurizat cu ajutorul formulei următoare: unde este suma totală a coloniilor numărate conform pct. 8.1.1, (n1 + 0,1n2)d este egal cu volumul eșantionului inseminat, unde: n1 este numărul de plăci numărate la prima diluare
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]
-
și 290 colonii Diluție 10-3: 33 și 28 colonii Număr/ml: = = = 28 590 = 29 000 = 2,9 x 104 8.1.3 Dacă toate inventarierile dau o valoare mai mică de 10, se va nota că numărul de microorganisme per mililitru este "mai mic de 10 x d", "d" fiind inversul factorului de diluare celui mai slab. 8.1.4 Dacă toate inventarierile dau valori mai mari de 300 și dacă numărătoarea este posibilă, se face o estimare și se înmulțește
jrc1705as1991 by Guvernul României () [Corola-website/Law/86853_a_87640]